普 珍 袁瑞瑛 卓瑪東智 王聚樂(lè)
(西藏大學(xué)醫(yī)學(xué)院,西藏 拉薩 850000)
藏藥喜馬拉雅米口袋顯微及薄層色譜鑒別
普 珍 袁瑞瑛 卓瑪東智 王聚樂(lè)*
(西藏大學(xué)醫(yī)學(xué)院,西藏 拉薩 850000)
目的:建立藏藥材喜馬拉雅米口袋的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法采用顯微鑒別法與薄層色譜法對(duì)樣品進(jìn)行鑒別。結(jié)果喜馬拉雅米口袋的顯微特征與薄層鑒別可作為該藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)方法。結(jié)論兩種方法簡(jiǎn)便、可行、操作性強(qiáng),為該藥材的質(zhì)量控制提供了參考依據(jù)。
喜馬拉雅米口袋;顯微鑒別;薄層色譜鑒別
喜馬拉雅米口袋(藏名杰巴區(qū)土)是《中華本草》藏藥卷(2002)[1]所收載的藥材之一,來(lái)源于豆科喜馬拉雅米口袋Gueldenstaedtia himalaica Baker.的根、莖、花果及全草。具有利尿、消腫,主治水腫。目前該藥材質(zhì)量控制方面僅有性狀鑒別,本文采用顯微鑒別法與薄層色譜鑒別法對(duì)該藥材進(jìn)行定性鑒別,可作為藏藥材喜馬拉雅米口袋的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法。
1.1 儀器:FA2004B電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)、恒溫水浴鍋(上海科析實(shí)驗(yàn)儀器廠)、JP2FⅠ-Ⅱ型紫外分析儀(上海嘉明馬科技有限公司)、0.5%羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G板(青島高能達(dá)化工有限公司)。RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 (上海精科實(shí)驗(yàn)有限公司)、OLYMPUS-BX51高級(jí)熒光顯微鏡、TSView顯微照相機(jī)。
1.2 試藥:無(wú)水乙醇(批號(hào)20060516,天津市博迪化工有限公司)、甲醇(批號(hào)20060414,天津市博迪化工有限公司)、乙酸乙酯(批號(hào)20061109,天津市德才工貿(mào)有限公司)、蘆丁對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)。喜馬拉雅米口袋藥材采自西藏拉薩、林芝,并經(jīng)西藏自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所生藥學(xué)專家 (格桑索朗,副主任藥師) 鑒定為為豆科喜馬拉雅米口袋的根、莖、花果及全草。
2.1 顯微鑒別:照顯微鑒別法(《中國(guó)藥典》2005年版第一部附錄 II C)[2]項(xiàng)下的方法制片觀察。包括根莖橫切面顯微鑒別、粉末顯微鑒別。
2.2 薄層色譜鑒別
2.2.1 供試品溶液的制備:取本品粉末2g,用40mL無(wú)水乙醇分兩次各超聲處理30min,過(guò)濾,合并濾液,濾液蒸干,再用1.5mL無(wú)水乙醇溶解,即得供試品溶液。
2.2.2 對(duì)照品溶液的制備:精密稱取蘆丁對(duì)照品加甲醇制成1mg/mL的對(duì)照品溶液。
2.2.3 對(duì)照藥材溶液的制備:取對(duì)照藥材粉末2g,用40mL無(wú)水乙醇分2次各超聲提取30min,合并濾液,濾液蒸干,再用1.5mL無(wú)水乙醇溶解,即得對(duì)照藥材溶液。
2.2.4 薄層色譜法:按照《中國(guó)藥典》2005年版第一部附錄Ⅵ B試驗(yàn)[2],吸取上述3種溶液各10μL,分別點(diǎn)于同一以0.5%羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯-甲酸-水(8:1:1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以3%三氯化鋁-乙醇溶液進(jìn)行顯色,在100℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰,置紫外光燈(365nm) 下檢視。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
3.1 顯微鑒別:根莖橫切面顯微鑒別:本品根莖類圓形。最外層由1列栓化的細(xì)胞構(gòu)成,細(xì)胞多角形或類圓形。皮層較窄,2~4列細(xì)胞,細(xì)胞圓形、類圓形,細(xì)胞壁不均勻增厚。維管束5~9個(gè),呈環(huán)狀排列,韌皮部外方被帽狀的纖維束包裹,韌皮部較小,細(xì)胞多角形,較小;木質(zhì)部類圓形,導(dǎo)管2~4個(gè)徑向排列,形成層不明顯。髓射線明顯,較寬,由3~5列細(xì)胞構(gòu)成,近木質(zhì)部的細(xì)胞略木質(zhì)化。髓部較寬廣,全部由大型的薄壁細(xì)胞構(gòu)成,見圖1。

粉末顯微鑒別:本品粉末淺棕色。單細(xì)胞或多細(xì)胞非腺毛多見,先端銳尖,基部細(xì)胞類長(zhǎng)圓形,非腺毛長(zhǎng)500~2000μm。纖維束較多,纖維細(xì)胞多碎斷,胞腔較大,紋孔明顯。導(dǎo)管多見,多為螺紋導(dǎo)管,單個(gè)或直徑成束存在,直徑50~80μm。表皮細(xì)胞可見,垂周壁較平直,偶有波狀彎曲,有的表皮細(xì)胞上可見氣孔,見圖2。

3.2 薄層色譜鑒別:不同產(chǎn)地喜馬拉雅米口袋平行條件下進(jìn)行薄層色譜,結(jié)果如圖3所示。

藏藥材喜馬拉雅米口袋的質(zhì)量控制方面僅有性狀鑒別,不能有效控制其質(zhì)量[3]。本文采用顯微鑒別法與薄層色譜鑒別法對(duì)該藥材進(jìn)行定性鑒別,并建立了該藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)方法。結(jié)果顯示,該方法簡(jiǎn)便、可行、操作性強(qiáng)。
[1]國(guó)家中醫(yī)藥管理局中華本草編委會(huì).中華本草(藏藥卷)[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,2002:318.
[2] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典[S].一部,北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:附錄18.
[3] 陳靜,支張,索朗次仁. 現(xiàn)代分析技術(shù)對(duì)藏藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化的重要性[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志,2015(6):36-37.
普珍(1971-),女,西藏日喀則人,副教授,研究方向:藏藥藥效學(xué)。
*通訊作者:王聚樂(lè)(1963-),男,陜西興平人,教授,研究方向:藏藥作用的物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機(jī)制。
R291.4
B
1006-6810(2017)07-0048-02
2017年3月18日收稿