健脾清化散瘀飲對脾虛濕熱血瘀型隆起糜爛性胃炎患者EGF、bFGF、Ki67表達的影響

方文怡 ，高尤亮 ，毛欣欣 ，柯 曉 ，王文榮 ，胡光宏

（1.福建中醫藥大學，福建 福州 350122；2.福建中醫藥大學附屬第二人民醫院，福建 福州350003；3.莆田市第一醫院，福建 莆田 351100）

健脾清化散瘀飲對脾虛濕熱血瘀型隆起糜爛性胃炎患者EGF、bFGF、Ki67表達的影響

方文怡1，2，高尤亮2，毛欣欣3，柯 曉2，王文榮2，胡光宏2

（1.福建中醫藥大學，福建 福州 350122；2.福建中醫藥大學附屬第二人民醫院，福建 福州350003；3.莆田市第一醫院，福建 莆田 351100）

目的 觀察健脾清化散瘀飲治療脾虛濕熱血瘀型隆起糜爛性胃炎（REG）的臨床療效，并探討其可能作用機制。 方法 選取脾虛濕熱血瘀型REG患者32例做為REG組，健康志愿者20例做為正常組，正常組不予干預，REG組予健脾清化散瘀飲口服治療，療程為3個月，觀察REG組的臨床療效，并比較正常組及REG組治療前后EGF、bFGF、Ki67表達的變化。 結果 中醫臨床證候、胃鏡、病理療效總有效率分別為93.75%、78.14%、84.375%。與正常組比較，REG組治療前胃黏膜EGF、bFGF、Ki67表達明顯提高（P＜0.01，P＜0.05）；REG組治療后胃黏膜EGF、bFGF、Ki67表達較與治療前明顯下調（P＜0.01，P＜0.05）。 結論 健脾清化散瘀飲治療脾虛濕熱血瘀型REG有效，其作用機制可能與降低Ki67、bFGF、EGF表達有關。

隆起糜爛性胃炎；健脾清化散瘀飲；脾虛濕熱血瘀證；EGF；bFGF；Ki67

隆起糜爛性胃炎（raised erosive gastritis，REG）是一種具有特征形態及病理變化的特殊類型的胃炎，第十屆世界胃腸病學大會將其列為具有高度癌變傾向的疾病之一［1-2］。REG是一類以細胞增殖異常為特征的增殖性疾病，具有癌變傾向。Ki67是公認的全面反映細胞群體增殖活性的可靠且客觀的指標［3］。此外近年研究表明，堿性成纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）、表皮生長因子（epidermal growth factor，EGF）可顯著刺激上皮細胞的增殖，兩者表達失衡可影響胃黏膜修復功能的表達，促進REG的發生和發展［4-5］。前期研究發現REG以脾虛濕熱血瘀證多見［6］，且經驗方健脾清化散瘀飲治療本病較單純西藥組更有優勢［7］，因此本研究擬進一步探討健脾清化散瘀飲治療REG的療效作用機制，通過觀察中醫證候積分、胃鏡、病理治療前后的變化，以及對胃黏膜EGF、bFGF、Ki67表達的影響，探討健脾清化散瘀飲治療REG的可能的作用機制，為中藥治療REG的臨床應用提供實驗理論依據。

1 臨床資料

1.1 西醫診斷標準 鏡下REG診斷標準參照《全國慢性胃炎共識意見（2012，上海）》［8］制訂：胃鏡下單個或多個疣狀、膨大皺襞狀或丘疹樣隆起，最大徑5～10 mm，頂端可見黏膜缺損或臍樣凹陷，中央有糜爛。

1.2 中醫辨證標準 由于國家標準和行業標準并無脾虛濕熱血瘀證的中醫診斷標準，因此課題組在福建省中西醫結合學會消化系統疾病專業委員會、福建中醫藥學會脾胃病學分會的指導下，并與全國名老中醫楊春波教授共同討論，擬定了REG脾虛濕熱血瘀證的診斷標準。主癥：① 胃脘部痞脹或疼痛；② 舌質紫暗或暗紅，有瘀斑或瘀點，苔白膩微黃或黃膩或黃膩干；③ 餐后及飲食不慎后癥狀易發作或加重。次癥：① 精神倦怠；② 胃脘部灼熱；③ 胃脘痛日久不愈；④ 口苦口臭；⑤ 不思飲食。胃鏡象：胃鏡下單個或多個疣狀、膨大皺襞狀或丘疹樣隆起，最大徑5～10 mm，頂端可見黏膜缺損或臍樣凹陷，中央有糜爛［8］。證型確定：具備主證3項加次證1項并結合胃鏡象。

1.3 納入標準 ① 治療組符合西醫診斷及中醫辨證標準；②正常組無上消化道不適且胃鏡鏡下胃黏膜正常，Hp陰性者；③ 年齡18～60歲；④ 同意加入本研究并簽署知情同意書。

1.4 排除標準 ① 合并腦血管、心血管、肝、腎、肺和造血系統等嚴重原發性疾病者；② 伴有胃潰瘍或十二指腸潰瘍患者；③ 哺乳期或妊娠婦女、精神病患者；④ 不愿配合檢查、治療及失訪患者，未按規定服用藥物，無法判斷臨床療效者。

1.5 一般資料 選取我院2013年1月—2015年12月脾虛濕熱血瘀型REG患者32例做為REG組，同時選取健康志愿者20例做為正常組。2組在性別、年齡上比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

表1 2組一般資料比較（x±s）

2 治療方法

2.1 REG組 予經驗方健脾清化散瘀飲口服治療，藥物組成：黨參 15 g，白術 9 g，茯苓 15 g，茵陳9 g，黃連 3 g，半夏 9 g，陳皮 9 g，扁豆 15 g、厚樸9 g，砂仁 6 g，莪術 9 g，鱉甲 18 g，丹參 15 g，炙甘草3 g，本院藥劑科煎藥機代煎，每次1袋，每袋200 mL，早晚各服1次，療程為3個月。

2.2 病理學檢查 正常組于胃竇部鉗取胃黏膜組織3塊。REG組胃鏡下觀察胃竇有隆起病變部位處取胃黏膜組織3塊，首次活檢處鏡下進行拍照留底。于中藥口服治療后，胃鏡下隆起未消失者，于原部位鉗取胃黏膜組織3塊；若隆起消失者，盡量于原部位鉗取胃黏膜組織3塊。所取組織經10%中性福爾馬林固定，常規脫水，石蠟包埋常規厚度切片，HE染色后置于顯微鏡下觀察。病理診斷標準參考《中國慢性胃炎共識意見（2012 年，上海）》［8］。

2.3 觀察指標 采用MaxVisionTM／AP免疫組化法染色測定EGF、bFGF、Ki67。兔抗人bFGF單克隆抗體（工作效價1∶50）、兔抗人EGF單克隆抗體（工作效價1∶50）購自北京中杉金橋生物技術有限公司，Ki67單克隆抗體購自邁新生物技術開發有限公司，MaxVisionTM／AP購自邁新生物技術開發有限公司。按試劑說明書步驟操作，實驗均設陰性及陽性對照。EGF、bFGF陽性表達在細胞質內出現棕黃色顆粒為陽性，Ki67陽性表達在細胞核內出現棕黃色顆粒為陽性。染色結果在相同條件下進行拍照，圖片進行計算機圖像分析測累積光密度（IOD）、Ki67計數。

2.4 療效評定標準

2.4.1 證候療效評定標準 參照《慢性胃炎的中西醫結合診療共識意見》［9］擬定，主要觀察臨床癥狀（主癥、次癥）和體征的變化并根據癥候量化表記錄、評分，所有癥狀均分為無、輕、中、重4級，主癥分別記 0、2、4、6 分，次癥分別記 0、l、2、3 分。 ① 臨床痊愈：主要癥狀、體征消失或基本消失，療效指數≥95%；② 顯效：主要癥狀、體征明顯改善，70%≤療效指數＜95%；③ 有效：主要癥狀、體征明顯好轉，30%≤療效指數＜70%；④ 無效：主要癥狀、體征無明顯改善，甚或加重，療效指數＜30%。

療效指數＝［（治療前積分－治療后積分）／治療前積分］×100%；

2.4.2 胃鏡及病理療效評定標準 參照《慢性胃炎的中西醫結合診療共識意見》［9］擬定，① 治愈：胃鏡下隆起糜爛較治療前消失，慢性炎癥好轉達輕度，腺體萎縮、腸化生和異型增生消失；② 顯效：胃鏡下隆起糜爛較治療前減少≥2／3，慢性炎癥好轉，腺體萎縮、腸化生和異型增生明顯減輕；③ 有效：胃鏡下隆起糜爛較治療前減少≥1／3～2／3，炎癥有所減輕，腺體萎縮、腸化生和異型增生減輕；④ 無效：胃鏡下隆起糜爛較治療前減少＜1／3或增多，病理所見無好轉者。

2.5 統計學方法 采用SPSS 20.0統計軟件進行數據分析。計量資料符合正態分布以（x±s）表示，采用t檢驗；不符合正態分布的兩組比較采用Wilcoxon秩和檢驗，多組比較采用Kruskal-Wallis H檢驗。計數資料采用χ2檢驗。

3 結 果

3.1 REG組證候療效、胃鏡療效、病理療效情況見表2。

表2 REG組證侯療效、胃鏡療效、病理療效情況

3.2 正常組及REG組治療前后胃黏膜EGF、bFGF、Ki67表達比較 見表3。

表3 正常組及REG組治療前后胃黏膜EGF、BFGF、Ki-67表達比較（x±s）

4 討 論

REG屬于中醫“痞滿”“嘈雜”“胃脘痛”等范疇，課題組前期研究發現REG患者以脾虛濕熱血瘀證最為常見，其中實證多與氣滯、濕、熱、血瘀等因素有關，虛證多與氣虛有關，且隨著胃黏膜病變程度加重，血瘀、虛證的比例較前增加［10］。健脾清化散瘀飲為本課題組治療REG的經驗方，全方共奏健脾益氣、清熱化濕、軟堅散結、活血化瘀之效。本研究采用健脾清化散瘀飲治療脾虛濕熱血瘀型REG患者32例，結果顯示：胃鏡療效有效率為78.14%；病理療效有效率為84.375%；中醫證候療效有效率為93.75%。所有治療組用藥后均未見明顯不良反應。該結果提示健脾清化散瘀飲治療REG有一定的臨床療效。

EGF對胃黏膜有保護及促增生作用，在生理狀態下，EGF能夠調節細胞的生長，但是它的過度表達可導致細胞的分裂增殖以及細胞的惡性轉化，從而導致腫瘤細胞的生長［11］。相關研究發現，Ki67表達的高低，對評價浸潤性生長、轉移等生物學行為，評估細胞增殖活性、判斷腫瘤預后具有重要意義［12］，因此Ki67有可能作為確定癌前人群高危個體的生物標志物［13］。bFGF是一種多功能細胞生長因子及血管生長因子，能刺激血管生成，抵抗胃酸對黏膜重建的抑制作用［14］，且與胃癌的發生、發展關系密切，bFGF陽性表達率越高，越易發生轉移［15］。

本研究結果表明：與正常組比較，REG患者EGF、Ki67、bFGF表達明顯升高，提示REG患者胃黏膜處于一種高增殖、高分化、高表達狀態，導致黏膜產生隆起性病變。而經健脾清化散瘀飲3個月口服治療后，REG患者黏膜中 EGF、Ki67、bFGF表達明顯下調，提示健脾清化散瘀飲可能是通過下調EGF、Ki67、bFGF表達而對REG起治療作用。

綜上所述，健脾清化散瘀飲治療REG不僅在臨床癥狀療效、病理學各方面有著顯著的療效，而且明顯降低EGF、bFGF、Ki67表達，這可能是健脾清化散瘀飲治療REG的作用機制之一，為臨床上治療REG提供進一步的試驗理論依據，而具體的調控機制的研究還有待進一步的研究探索。

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R573.3

B

1000-338X（2017）05-0006-03

2017-08-20

福建省自然科學基金項目（2015J01478）；福建衛生廳中醫藥科研課題（WZPW201302）；福建省教育廳課題（JAT 160225）

方文怡（1985—），女，醫學碩士，主要從事中西醫結合消化系統疾病研究。

通迅作者：柯曉（1965—），男，主任醫師。 E-mail：drkxkx@163.com