辛伐他汀對腎缺血再灌注損傷大鼠心肌細胞凋亡的影響

荊嬌+馬海玲+閆文升+張永忠+張玉清+焦宗偉

【摘要】目的 觀察辛伐他汀預處理對腎缺血再灌注損傷大鼠遠程器官細胞凋亡的影響。方法 采用夾閉雙側腎動靜脈45分鐘后去夾再灌的方法復制腎缺血再灌注損傷（RI/RI）模型。36只SD大鼠隨機分成3組：（1）假手術組；（2）腎缺血再灌注組；（3）辛伐他汀組，每組12只。取心肌組織測定乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸激酶（CK）活性，TUNEL法檢測細胞凋亡率，蛋白免疫印跡檢測NF-kB蛋白表達。結果 與假手術組比，腎缺血再灌注組LDH、肌CK活性增高，細胞凋亡率升高，NF-kB表達增多，差異有統計學意義（P<0.05）。與腎缺血再灌注組相比辛伐他汀組LDH、CK活性降低，胞凋亡率降低，差異有統計學意義（P<0.05），NF-kB表達降低。結論 辛伐他汀對RIRI大鼠心肌損傷有改善作用，可能與凋亡基因NF-kB表達有關。

【關鍵詞】辛伐他汀；細胞凋亡；NF-kB

【中圖分類號】R542.2 【文獻標識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2017.21..02

他汀類藥物是三羥基三甲基戊二酰輔酶A還原酶抑制劑，目前普遍用于治療高脂血癥。近年來發現，他汀類藥物除降血脂作用外，還有抗炎作用，對腎臟有保護功能等其他非降脂方面的作用，在防治心臟疾病方面也日益重視[1]。但辛伐他汀預處理對遠程器官的影響的研究尚不多見。本實驗就此進行了初步研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

成年健康雄性SD（河北省實驗動物中心）；辛伐他汀（杭州上虞京新藥業有限公司）；LDH、CK（南京建成生物制品公司）；NF-kB（Santa cruz biotechnology）。

成年健康雄性SD大鼠36只，體重16～230 g，在20～26℃實驗室安靜飼養兩天后隨機分為3組：（1）假手術組；（2）腎缺血再灌注組；（3）辛伐他汀組。每組12只。分組后，辛伐他汀組每日給予辛伐他汀20 mg/kg灌胃，持續2周。假手術組和缺血再灌組每日給予等量的生理鹽水灌胃。兩周之后復制動物模型。

1.2 方法

10%水合氯醛腹腔麻醉，開腹，暴露雙側腎動、靜脈。除假手術組只開腹不夾閉腎動、靜脈外，其余各組均需夾閉雙側腎動、靜脈45 min，然后除夾再灌。后逐層縫合。取心肌組織測定、LDH、CK、活性，TUNEL法檢測細胞凋亡率，蛋白免疫印跡檢測NF-kB蛋白表達。各項指標檢測方法嚴格按說明書操作。

1.3 統計學方法

采用SPSS 20.0統計學軟件對數據進行分析，計量資料以“x±s”表示，采用t檢驗；計數資料以百分數（%），例（n）表示，采用x2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 辛伐他汀對心肌組織LDH和CK活性的影響

缺血再灌注組心肌組織LDH和CK活性高于假手術組，與缺血再灌注組相比，辛伐他汀組LDH、CK活性降低，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 辛伐他汀對心肌細胞凋亡率的影響

與假手術組比較，缺血再灌注組凋亡指數升高，而辛伐他汀組凋亡指數低于缺血組。差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.3 辛伐他汀對心肌細胞NF-kB表達的影響

與假手術組比較，缺血再灌注組NF-kB表達升高，而辛伐他汀組NF-kB表達降低。差異有統計學意義（P<0.05）。見圖1。

3 討 論

RI/RI是多因素參與的復雜過程，其主要的損傷因素有自由基損傷、NO等舒張血管物質的減少、內皮素等縮血管物質產生過多等[2]。腎缺血再灌注期間產生的大量的OFR可通過血液循環可造成遠隔器官的損傷，戎浩[3] 等的研究也表明腎缺血后遠端器官也有不同程度的損傷，核轉錄因子-kB（NF-kB）是細胞核內重要的轉錄調節因子，是細胞存活、細胞周期、細胞黏附和遷移的重要調節者，有報道大鼠心肌缺血再灌后NF-kB活化對心肌細胞的凋亡起促進作用[4]。

本實驗應用實驗室以往的方法[5]復制腎缺血再灌注損傷模型，觀察各項指標，結果顯示，缺血再灌注后，LDH、CK活性均顯著升高，NF-kB表達升高。說明缺血再灌注后心肌受損，心肌細胞凋亡增多。而給予辛伐他汀干預后，LDH、CK活性降低，NF-kB表達降低與缺血再灌注組相比，差異有統計學意義（P<0.05），這說明辛辛伐他汀對RIRI大鼠心肌損傷有改善作用，可能與凋亡基因NF-kB表達有關，但具體機制有待于進一步的探討研究。

參考文獻

[1] 姜 華，尹 微.辛伐他汀對膿毒癥大鼠心肌保護作用的研究[J].臨床合理用藥雜志，2016，9（21）：48-49.

[2] 仝 飛，夏曉紅.短暫反復缺血預處理對大鼠腎缺血再灌注損傷的保護作用及其機制研究[D].石家莊：河北醫科大學，2011.

[3] 戎 浩，夏曉紅.褪黑素對腎缺血再灌注損傷大鼠腦組織氧自由基和細胞凋亡的影響[J].中國病理生理雜志，2015，31（10）：1861.

[4] 胡煜輝，馮 云，劉星等.大鼠心肌缺血再灌注損傷中心肌細胞凋亡與NF-kB p65、iNOS的表達[J].細胞與分子免疫學雜志，2010，26（9）：868-871.

[5] 夏曉紅，申玉學，石紀才，等.內皮素抗體在大鼠腎缺血/再灌注損傷的作用[J].中國病理生理雜志，1999，15（5）：415-417.endprint