磁性納米吸附劑對GST-tagged蛋白的分離純化

鄒雪艷,孫 新,秦明明,董 爍，張于濤,曹朋樂,李強(qiáng)偉,柴 云*

(1.河南大學(xué) 納米材料工程研究中心，河南 開封 475004； 2.河南大學(xué) 化學(xué)化工學(xué)院，河南 開封 475004)

磁性納米吸附劑對GST-tagged蛋白的分離純化

鄒雪艷1,孫 新2,秦明明1,董 爍1，張于濤1,曹朋樂1,李強(qiáng)偉2,柴 云2*

(1.河南大學(xué) 納米材料工程研究中心，河南 開封 475004； 2.河南大學(xué) 化學(xué)化工學(xué)院，河南 開封 475004)

本文以Fe3O4/半胱氨酸(以Fe3O4/Cys)為載體，通過在其表面修飾功能化的谷胱甘肽(GSH)基團(tuán)，得到Fe3O4/Cys-GSH納米吸附劑，可直接應(yīng)用于谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記(GST-tagged)融合蛋白的親和分離. 實驗結(jié)果表明，制備的Fe3O4/Cys-GSH納米吸附劑對GST-tagged融合蛋白具有特異性、普適性、重復(fù)利用性能，可實現(xiàn)對目標(biāo)蛋白的快速、高效分離，具有潛在的市場應(yīng)用價值.

四氧化三鐵；L-半胱氨酸；親和分離；谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記(GST-tagged)

谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)是一組具有多種生理功能的蛋白質(zhì)，在機(jī)體有毒化合物的代謝、保護(hù)細(xì)胞免受急性毒性化學(xué)物質(zhì)攻擊中起到重要作用，是體內(nèi)代謝反應(yīng)中II相代謝反應(yīng)的重要轉(zhuǎn)移酶[1]. 同時GST還是一種新的腫瘤標(biāo)志物，對肝癌、肺癌、卵巢癌腺癌、腺鱗癌等具有一定的預(yù)測作用[2-4]，為臨床治療及預(yù)后判斷提供理論依據(jù). 因此分離、純化GST及GST標(biāo)簽(GST-tagged)蛋白具有十分重要的意義.

目前常見的蛋白質(zhì)提純方法有：親和沉淀法、電泳法、透析法、層析法、超速離心法等[5-10]. 其中親和沉淀法因其具有操作簡便、易于放大等優(yōu)點，被認(rèn)為是蛋白質(zhì)純化強(qiáng)有力的技術(shù)手段. 早在1997年河北醫(yī)科大學(xué)劉滿英等[11]綜述了以殼聚……