腹瀉病人沙門菌的血清分布類型和耐藥性狀況解析

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腹瀉病人沙門菌的血清分布類型和耐藥性狀況解析

陳琴,張瑞中,郭少燕

[目的]解析深圳市腹瀉病人沙門菌的血清分布類型和耐藥性狀況，為臨床診療提供依據。[方法]選取本院2013年—2015年323例腹瀉病人作為研究對象，采用抗藥性試紙測定沙門菌對抗菌藥物的敏感程度。[結果]298株鑒定為血清型，25株不能確定類型，在298株血清型菌株中劃分出60種血清類型，共發現23種沙門菌，主要為腸炎沙門菌占42.3%，豬霍亂沙門菌占28.9%，鼠傷寒沙門菌占8.7%，羅生沙門菌占7.0%，斯坦利沙門菌占3.4%。沙門菌藥物敏感性實驗結果表明：菌株對頭孢噻肟敏感程度最大，達到92.6%，其次為頭孢曲松(90.6%)、頭孢拉定(88.9%)、頭孢哌酮(86.2%)，沙門菌對亞胺培南和氨芐西林的敏感程度較低。[結論]深圳市腹瀉案例主要由腸炎沙門菌和豬霍亂沙門菌構成。高氣溫季節的感染率高于低氣溫季節，臨床應依照藥物敏感結果選用抗菌藥物，應首選頭孢噻肟。

深圳；腹瀉；沙門菌；血清型；抗藥性

沙門菌能夠引發人類產生腹瀉以及食物中毒狀況，全世界每年有1 800萬例沙門菌急性感染病人，其中致死病人達到68萬例，世界衛生組織已經把該病羅列為存在重要影響的食物性傳播疾病。多年以來，沙門菌在深圳市基于食物中毒產生的病原菌中通常位居前列。此外，基于抗生素的不科學選取并且廣泛采用耐藥病株使得沙門菌發生多層級的耐藥狀況。自從1990年起，具備ACSSuT耐藥狀況的DT104模式屬傷寒沙門菌在歐美等國家迅速傳播，因而關于沙門菌檢測和抗藥性的研究非常重要。本研究針對2013年—2015年發生在深圳市龍華新區人民醫院的腹瀉病人進行沙門菌血清解析以及抗藥性分析，以了解本區域沙門菌分布以及耐藥情況，為臨床科學選取抗生素提供理論依據。

1 選材和方法

1.1 選材

1.1.1 菌體來源 從深圳市龍華區人民醫院2013年—2015年獲得臨床腹瀉疑似沙門菌感染病人323例，男163例，女160例；門診198例，臨床125例；年齡18 d至6歲。

1.1.2 實驗材料和質量控制 亞硒酸胱氨酸增菌溶液[1]、沙門菌顯色培養基、革蘭陰性菌鑒別卡、12種抗藥性試紙以及水解酪蛋白瓊脂、沙門菌診療血清、Vitek 3 compack[2]、藥品敏感性試紙。質量控制菌株選取抗生素敏感實驗控制菌株ATCC25863和ATCC37969。

1.2 方法

1.2.1 菌株的鑒別和分類 依照國家指標GB 352 4889.4-2012進行關于疑似沙門菌的菌株測定，選取智能化生化方式對沙門菌診斷血清進行鑒定。

1.2.2 抗生素藥品的敏感性測定 選取瓊脂延展方法，根據美聯邦指定的臨床實驗室規則委員會制定的準則對抑菌群進行判別。采用12種藥物敏感試紙，包含氨芐西林10 μg、頭孢拉啶30 μg、頭孢吡肟30 μg、頭孢噻肟30 μg、環丙沙星5 μg、氯霉素30 μg、鏈霉素10 μg、磺胺復合物300 μg、四環素30 μg、萘啶酸30 μg、慶大霉素30 μg、甲氧芐啶5 μg。

1.3 統計學方法 選取SPSS 15.0統計軟件[3]進行數據統計分析，構成比比較采用χ2檢驗，以P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 323株沙門菌血清分型結果

2.1.1 沙門菌病人年齡分布 共采集323株疑似沙門菌菌株，通過檢驗能夠認定298株為血清型，其余25株不能確定類型，298株劃分為60種血清類型，年齡主要在4歲以下，占98%，6歲以上人群患沙門菌感染腹瀉[4]的概率較小。見圖1。

圖1 2013年—2015年患沙門菌腹瀉病人年齡分布

2.1.2 沙門菌病人發病時間分布 從時間分布來看，沙門菌病人發病時間大多分布在6月～10月，占65%，2015年沙門菌腹瀉病人發病時間見圖2。

圖2 2015年沙門菌腹瀉病人發病時間分布

2.1.3 沙門菌類型分布 本研究檢測出的沙門菌類型有23種，其中分離數目在5株之上的血清類型有6種[5]，排在前5位有腸炎沙門菌(42.3%)、豬霍亂沙門菌(28.9%)、鼠傷寒沙門菌(8.7%)、羅生沙門菌(7.2%)和斯坦利沙門菌(3.4%)。298株沙門菌類型分布見表1。

表1 298株沙門菌群別及血清型分布情況

2.2 沙門菌藥物敏感性和抗藥性 沙門菌的抗藥性實驗結果表明：菌株對頭孢噻肟敏感度最大，達到92.6%，其次為頭孢曲松，敏感度為90.6%，對頭孢拉定的敏感度為88.9%，對頭孢哌酮的敏感程度為86.2%，沙門菌對亞胺培南和氨芐西林的敏感度較低[6]。沙門菌對氨曲南、氯霉素、頭孢曲松、頭孢噻肟以及氨芐西林的抗藥程度[7]均超過16%，氨芐西林、頭孢噻肟、頭孢曲松以及頭孢拉定的中介比例較低，亞胺培南、頭孢哌酮和氨曲南的中介比例較高。見表2。

表2 沙門菌藥物敏感性和抗藥性情況(n=298) 株(%)

2.3 沙門菌對藥物的抗藥性 10種抗菌藥物包括氨芐西林、亞胺培南、頭孢哌酮、頭孢噻肟、頭孢拉定、頭孢曲松、氨曲南、氯霉素、克拉維酸和鏈霉素。本研究選用8種245株沙門菌完成抗藥性實驗，在298株沙門菌中抗藥性達到3種之上的沙門菌菌株為205株，占68.8%，各類血清模式沙門菌的多層級抗藥性能存在差異，其中鼠傷寒類型的沙門菌多重耐藥特性[8]層級以8抗藥性的菌株數目為主，腸炎類沙門菌則以4抗藥性為主，乙型副傷寒類沙門菌則以6抗藥性為主，而徹斯特沙門菌的多層級抗藥效能較輕。在抗藥性譜模式上產生ACSSuT和抗藥譜[9]，該抗藥譜包含氨芐西林、亞胺培南、頭孢哌酮、氨曲南和氯霉素等5類以及更多種類的抗藥性藥物的菌株達到143株。其中腸炎沙門菌抗藥程度較高，達45.2%。245株沙門菌對10種藥物均具有抗藥性，主要包含腸炎12株、豬霍亂10株、鼠傷寒1株。血清類型沙門菌多層級抗藥率見表3。

表3 血清類型沙門菌多層級抗藥率 %

3 討論

3.1 2013年—2015年腹瀉類沙門菌血清型分布 本研究結果發現，深圳市腹瀉案例主要由腸炎沙門菌和豬霍亂沙門菌構成，該現象和相鄰的江蘇省狀況類似，但和國內的其他區域存在一定差別，東南沿海區域主要以鼠傷寒沙門菌為主。

3.2 腹瀉沙門菌發生的季節和年齡特點 從圖中可看出：腹瀉病人發病時間多在6月～10月，占發病總數的65%，提示溫度為腹瀉類沙門菌增殖的一個主要因素。研究結果表明：1月沙門菌感染病例較少，占2.3%，2月～4月沙門菌感染病例逐步增多，但該時段的發病率總體較低，占22.3%，5月～6月呈現沙門菌感染發病的小高峰，占13.0%，7月～9月沙門菌感染病例達到高峰，占42.0%。9月～10月沙門菌感染病例逐步下降，11月～12月沙門菌感染病例數較少。4歲以下的幼兒占98%，超過6歲的人群患沙門菌感染腹瀉的概率較小。

3.3 兒童腹瀉沙門菌抗感染治療分析 美聯邦抗生素抗藥性監測發現，23.7%的非傷寒類型的沙門菌最少包含1類及其以上的抗生素，其中最為多見的為多重抗藥譜，ACSSuT+抗藥譜[10]。本研究發現：298株沙門菌對3類以上的抗菌藥物的耐藥性高達205株，抗藥性達到68.8%，說明該區域的沙門菌菌株包含多層級的抗藥狀況。鼠傷寒沙門菌為耐藥層級最為重要的血清類型，并且在抗藥性譜模式上，產生ACSSuT和抗藥譜，本研究結果和山東省的研究結果類似[11]。本研究中沙門菌對于頭孢類抗生素敏感度在86%以上，因而頭孢類抗菌藥依舊是臨床治療沙門菌感染的首選藥物，但長時間采用3代或者4代的頭孢菌素易獲得超廣譜β-內酰胺酶菌株，因而在醫學實驗中，若要完全治愈沙門菌感染應當聯合用藥。

3.4 深圳市腹瀉病人沙門菌實驗啟示 在現有的農牧業以及養殖業的發展中主要選取抗生素作為養殖材料并且混合添加劑等物質防范家禽傳染病，長時間選用抗生素的結果使得菌類獲得耐藥特性，尤其是多層級耐藥特性，而該類耐藥菌類依照各類方式反饋到人類身上。美國食品檢測機構2012年相關研究數據顯示：在養殖業中選取的抗生素大約3 000萬磅，而該年實現人類病癥醫療選取的抗生素大約為800萬磅。此外，科研者針對美國市面上售賣的生肉實現抗藥菌株的檢驗，結果顯示80.5%的火雞肉、68.5%的豬肉以及56.2%的牛肉有耐藥菌類，并且具有抗藥性質的沙門菌檢出率較高，72%的火雞肉類被檢測得到包含最少兩種抗生素的抗藥性沙門菌。當前，食品中對沙門菌的抗藥性程度較高，因而對現實醫療實踐具有較高的價值。

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AnalysisofserumdistributionanddrugresistanceofSalmonellaindiarrheapatients

ChenQin，ZhangRuizhong，GuoShaoyan

(People’s Hospital of New District Longhua District Shenzhen,Guangdong 518109 China)

R473.57

A

10.3969/j.issn.1009-6493.2017.32.040

1009-6493(2017)32-4170-03

陳琴，護師，本科，單位：518109，深圳市龍華新區人民醫院；張瑞中、郭少燕單位：518109，深圳市龍華新區人民醫院。

信息陳琴,張瑞中,郭少燕.腹瀉病人沙門菌的血清分布類型和耐藥性狀況解析[J].護理研究，2017，31(32)：4170-4172.

2016-08-31；

2017-10-16)

(本文編輯 范秋霞)