丙型肝炎病毒感染過程中其NS3/4A蛋白酶切割線粒體抗病毒信號蛋白的動態過程

許軍，杜曉婷，張揚，袁正宏，易志剛

復旦大學基礎醫學院病原生物學系，醫學分子病毒學教育部/衛生部重點實驗室，上海 200032

·論著·

丙型肝炎病毒感染過程中其NS3/4A蛋白酶切割線粒體抗病毒信號蛋白的動態過程

許軍，杜曉婷，張揚，袁正宏，易志剛

復旦大學基礎醫學院病原生物學系，醫學分子病毒學教育部/衛生部重點實驗室，上海 200032

已知丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)可通過其蛋白酶NS3/4A切割線粒體抗病毒信號蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein，MAVS)來逃逸天然免疫識別，但尚不清楚其切割動力學及切割在抑制干擾素中的作用。本研究旨在細胞模型中探討HCV感染過程中病毒復制建立及病毒NS3/4A切割MAVS的動態過程，探究NS3/4A切割MAVS對病毒逃逸宿主天然免疫建立感染的貢獻。首先構建基于綠色熒光蛋白(green fluorescent protein，GFP)的MAVS切割報告系統(GFP-NLS-MAVS-TM462)，用 HCV Jc1-Gluc 感染Huh7.5/GFP-NLS-MAVS-TM462細胞。結果顯示，病毒復制早期MAVS切割效率較低；NS3/4A高效切割MAVS發生于HCV復制晚期，且其切割效率與NS3蛋白水平相關。利用帶有GFP ypet的HCV報告病毒Jc1-378-1感染Huh7.5/RFP-NLS-MAVS-TM462細胞，在單細胞水平觀察HCV感染陽性細胞中MAVS被切割情況，發現HCV復制細胞中僅部分細胞MAVS被切割。進一步研究發現，不同基因型NS3/4A切割MAVS的效率僅與NS3表達水平相關。以上結果提示，HCV蛋白酶NS3/4A切割MAVS依賴NS3/4A蛋白在病毒復制過程中的累積，對在病毒復制早期逃逸宿主天然免疫建立感染可能無顯著貢獻。

丙型肝炎病毒；非結構蛋白3/4A；線粒體抗病毒信號蛋白；干擾素

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)是單股正鏈RNA病毒，隸屬于黃病毒科丙型肝炎病毒屬[1]。HCV感染人體后導致70%～80%感染者慢性化，其中部分慢性化患者發展為肝硬化、肝細胞肝癌[2-4]。……