ABO血型正反定型不符1例原因分析

●孟明敏

ABO血型正反定型不符1例原因分析

●孟明敏

患者，女，24歲，孕1產1。2016年12月24日入院生產，于2016年12月26日產下一子，產后血紅蛋白為79g/L，伴陰道出血，24日入院時，檢驗科采用玻片法檢驗血型報為O,RH(+)，26日患者輸血復查血型玻片法為O,RH(+)，微柱凝膠卡式法為正反定型不符，正定型為O型，反定型為B型，RH(+)，經多種檢測方法檢測，及疑難血型的鑒定，考慮患者為B亞型。為患者輸血安全故建議患者輸注O型洗滌紅細胞2u，輸注后患者未出現不良反應，報道如下。

ABO血型；ABO亞型

1 血型血清學檢查

1.1 試劑與方法

抗A、抗B試劑（河北醫科大學生物醫學工程中心），抗D（上海市血液生物醫藥有限責任公司）抗A+B（上海市血液生物醫藥有限責任公司），抗H（上海市血液生物醫藥有限責任公司）采用直接血凝法。血型血清學方法見文獻[1]。ABO、RhD血型定型檢測卡（長春博訊生物技術有限責任公司）。人源血清抗A、抗B實驗室自制。

1.2 卡式血型鑒定

患者血型為正定型為O型，反定型為B型，RH(+)。采用ABO、RhD血型定型檢測卡（長春博訊生物技術有限責任公司）血型鑒定，用37℃生理鹽水洗滌患者RBC3次（用37-40℃生理鹽水洗滌紅細胞可去除紅細胞表面附著的導致紅細胞凝集的冷凝集素，可獲得可靠的正定型。），配成0.5%RBC懸液，加入正定型及Rh以及對照空中，再加分別加入兩滴患者血清于反定型孔中，離心結果為-，-，4+，-，4+，-。

1.3 玻片法血型鑒定

初篩患者血型為O，RhD(+)。采用抗A、抗B試劑（河北醫科大學生物醫學工程中心），抗D（上海市血液生物醫藥有限責任公司），用37℃生理鹽水洗滌患者RBC3次（用37-40℃生理鹽水洗滌紅細胞可去除紅細胞表面附著的導致紅細胞凝集的冷凝集素，可獲得可靠的正定型。），配成0.5%RBC懸液，重新做ABO血型鑒定，反應仍然和沒經洗滌的標本反應結果一樣，結果為-，-，4+。

1.4 試管法特殊血型鑒定

取患者血清3ml以及生理鹽水洗滌3次的3%RBC懸液備用，血型血清學方法見文獻[2]。實驗結果見表1。

表1 血型鑒定結果

1.5 吸收放散實驗

取洗滌3次后的壓積紅細胞2ml加入標準化的人源抗B血清[3]1ml混合均勻后放置4攝氏度冰箱反應一小時后，離心分離上清液，用4攝氏度冷鹽水洗滌紅細胞4-5次，制成壓積紅細胞2ml，加入1ml生理鹽水56攝氏度反應15分鐘，離心取上清液備用，分別在兩個試管中加入B細胞和O細胞，然后加入上清液，離心看結果。見表1。

1.6 血型結論

處于對患者輸血安全考慮，輸血科鑒定患者血型結果為B亞型，Rh(+)。

1.7 配血試驗

抗人球蛋白檢測法，選擇O型RH（+）洗滌紅細胞2u，與患者血樣本做交叉配血試驗，配血主側不凝集，不溶血，配血相合，患者輸注后無不良反應。

2 討論

因紅細胞膜抗原分布不同，ABO血型系統有多種亞型。ABO亞型是指屬同一血型抗原，但抗原結構和性能或抗原位點數有一定差異。ABO血型系統中以A亞型最多見，A亞型主要有A1和A2，占全部A型血的99.9%，其他A亞型（A3、AX、AM）為數少；B亞型（B3、BM、BX）比A亞型少見。在進行ABO血型鑒定時如只做正定型，易將亞型誤定為“O”型.對ABO亞型的準確鑒定需根據紅細胞與抗A、抗A1、抗B、抗AB、抗H的凝集強度、血漿中是否存在抗A1、分泌型人的唾液中A，B，H物質進行區分[4].但部分亞型之間只表現為極少的血型血清學差異，紅細胞吸收放散試驗對證實是否存在弱A或弱B抗原非常重要，常是區別各亞型的主要依據.類孟買血型也表現為紅細胞A或B抗原缺失或弱表達，與Am，Ax，Ael，Bm，Bx等亞型相似，但類孟買血型紅細胞H抗原也缺失或弱表達，ABO亞型紅細胞H抗原則較強.白血病患者致ABO血型抗原減弱的血型血清學特征與ABO亞型也很相似，但其導致血型抗原減弱的機制與亞型不同，不涉及血型基因的變異，未改變紅細胞膜表面抗原表達的本質，隨疾病的發生而減弱，隨疾病的好轉而恢復.而ABO亞型是由基因突變所致，和疾病的發生無關，并可通過家系調查或經PCRRFLP及ABO基因測序等分子生物學方法進行確認。

本例B亞型患者輸入O型洗滌紅細胞2U達到了預期療效，未發生不良反應。根據以上試劑進行實驗。分別用卡式法，玻片法，鹽水試管法對患者血液進行血型鑒定，ABO血型不合可引起嚴重的溶血性輸血反應。ABO亞型患者需要輸血時，輸入相同亞型供血者的血液無疑是最理想的選擇，但由于ABO亞型的頻率極低，幾乎無法找到相同亞型供血者.而給ABO亞型受血者輸入亞型對應正常血型的血液，有引起溶血反應或因同種免疫產生同種抗體的可能。

如果將B亞型的血輸給O型的受血者，受血者就會產生免疫反應，從而引起嚴重的溶血性輸血反應。對于ABO亞型受血者，則選成分輸血，所選血液成分的血型應以避免輸入其血漿中抗體對應的紅細胞血型抗原及其紅細胞血型抗原對應的抗體，并以盡量避免異型紅細胞血型抗原輸入導致同種免疫為原則.ABO亞型受血者輸入紅細胞時應選擇O型，輸入血漿及冷沉淀時應選擇AB型或亞型對應的正常血型，但輸入血小板時只能選擇亞型對應的正常血型，因為輸入血小板的同時會有較多血漿的輸入，輸O型或AB型分別可能致血漿中的抗體或血小板上抗原與受血者不相容.也就是說B亞型的人如果作為受血者，只能接受O型的洗滌紅細胞和B/AB型血漿，以及B型血小板。

（作者單位：武安市第一人民醫院）

[1]李廣,中華人民共和國衛生部.中國輸血技術操作規程[M].天津:天津科技出版社,1997,60-62.

[2]肖星浦.輸血技術手冊.[J].四川科學技術出版社,1992:95-98.

[3]張宇宏,陳晨,張獻清,穆士杰,李芳莉[J].現代檢驗醫學雜志,2007(1):104-104.

[4]吳國光,邵超鵬,蘇宇清,等.輸血技術學[M].北京:人民衛生出版社,2003:148-152.