觀察糖尿病患者與正常人之間以及不同骨量的糖尿病患者之間維生素D受體基因型的分布差異

葛光巖

【摘要】 目的 研究糖尿病患者與正常人之間以及不同骨量糖尿病患者之間維生素D受體基因型的分布差異及臨床意義。方法 選取56例糖尿病患者作為觀察組， 另選同期體檢的56例健康者作為對(duì)照組。采用聚合酶連反應(yīng)限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性技術(shù)對(duì)兩組進(jìn)行維生素D受體基因型檢測(cè)， 并分析比較不同骨量糖尿病患者不同部位骨密度分布情況， 及VDR基因型與骨量變化的關(guān)系。結(jié)果 維生素D受體基因結(jié)果可分為Aa、AA、aa等3個(gè)型號(hào)。觀察組VDR基因型：Aa型19例（33.93%）， AA型5例（8.93%）， aa型32例（57.14%）；對(duì)照組VDR基因型：Aa型20例（35.71%）， AA型6例（10.71%）， aa型30例

（53.57%）。兩組VDR基因型分布比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。56例糖尿病患者中， 骨量正常患者23例（41.07%）， 骨量減少患者15例（26.79%）， 骨質(zhì)疏松患者18例（32.14%）。不同骨量糖尿病患者各部位骨密度均呈下降趨勢(shì)， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。糖尿病患者VDR基因中， Aa、AA、aa基因各部位骨密度呈下降趨勢(shì)， 不同基因型骨密度比較， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。骨質(zhì)疏松、骨量減少患者aa基因型頻率明顯高于骨量正常患者， 而Aa基因型頻率又低于骨量正常患者， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 糖尿病患者維生素D受體基因分布對(duì)比健康人群無明顯差異；而糖尿病患者對(duì)應(yīng)Apal酶切位點(diǎn)維生素D受體基因多態(tài)與患者骨質(zhì)疏松存在必然關(guān)系。

【關(guān)鍵詞】 骨質(zhì)疏松；糖尿病；維生素D受體基因

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.27.038

糖尿病并發(fā)骨質(zhì)疏松癥在臨床中較為常見， 且骨質(zhì)疏松癥在糖尿病患者中發(fā)生率較高；現(xiàn)目前， 對(duì)糖尿病患者的維生素D受體基因多態(tài)的研究與骨質(zhì)疏松的相關(guān)性， 尚不明確[1]。本次研究， 對(duì)本院2015年12月～2017年2月收治的56例糖尿病患者作為研究對(duì)象， 觀察糖尿病患者與正常人之間維生素D受體基因型的分布差異， 為篩選出糖尿病合并骨質(zhì)疏松患者等高危人群提供依據(jù)， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2015年12月～2017年2月收治的56例糖尿病患者為觀察組， 其中男35例， 女21例， 年齡42～75歲， 平均年齡（58.5±16.5）歲；其中1型糖尿病患者24例， 2型糖尿患者32例， 其中骨質(zhì)疏松18例， 骨量減少15例；另選同期本院體檢的56例健康人群作為對(duì)照組， 其中男34例， 女22例， 年齡40～71歲， 平均年齡（55.5±15.5）歲。兩組均自愿參與本次研究。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 ①維生素D基因受體檢測(cè)；引物設(shè)計(jì)、合成：上游引物5， -CAG ATG AGG GAG GAC AGC GAA-3；下游引物5， -GCA ACT CCT GTC GGT CAT GAG TC-3。②全血DNA抽取， 15 g/L抗凝全血250 μl， 抽提兩組人員DNA， 將其置于-20℃環(huán)境中保存。擴(kuò)增產(chǎn)物的限制性內(nèi)切酶酶切， 聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增產(chǎn)物5 μl， 運(yùn)用2.5 U TaqI或5 U Apal酶切， 采用37℃ Apal水浴保溫2 h。反應(yīng)終止后， 產(chǎn)物經(jīng)15 g/L（Apal）瓊脂糖凝膠電泳， 溴化乙啶染色， 采用凝膠圖像分析系統(tǒng)分析。

1. 3 觀察指標(biāo) ①糖尿病患者與健康人群維生素D受體基因分布情況；②不同骨量糖尿病骨質(zhì)疏松患者的維生素D受體基因分布情況分析。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)， 多行多列比較采用方差分析；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)， 多行多列比較采用秩和檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 VDR基因Apa I酶切結(jié)果 維生素D受體基因結(jié)果可分為Aa、AA、aa等3個(gè)型號(hào)。觀察組VDR基因型：Aa型19例（33.93%）， AA型5例（8.93%）， aa型32例（57.14%）；對(duì)照組VDR基因型：Aa型20例（35.71%）， AA型6例（10.71%）， aa型30例（53.57%）。兩組VDR基因型分布比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2. 2 糖尿病患者不同骨量患者各部位骨密度比較 56例糖尿病患者中， 骨量正常患者23例（41.07%）， 骨量減少患者15例（26.79%）， 骨質(zhì)疏松患者18例（32.14%）。不同骨量糖尿病患者各部位骨密度均呈下降趨勢(shì)， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2. 3 糖尿病患者VDR基因型與骨量變化關(guān)系分析 糖尿病患者VDR基因中， AA、Aa、aa基因各部位骨密度呈下降趨勢(shì)， 不同基因型骨密度比較， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。骨質(zhì)疏松、骨量減少患者aa基因型頻率明顯高于骨量正常患者， 而Aa基因型頻率又低于骨量正常患者， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

糖尿病并發(fā)骨質(zhì)疏松癥在臨床中較為常見， 且骨質(zhì)疏松癥在糖尿病患者中發(fā)生率較高；現(xiàn)目前， 對(duì)糖尿病患者的維生素D受體基因多態(tài)的研究與骨質(zhì)疏松的相關(guān)性， 尚不明確。糖尿病骨質(zhì)疏松癥是糖尿病的并發(fā)癥之一， 該病發(fā)病機(jī)制尚不明卻， 可能與鈣、維生素D或胰島素缺乏及遺傳基因等有關(guān)[2]。

目前研究顯示， 雌激素受體、維生素D受體基因等基因多態(tài)性與患者骨密度、骨量存在一定關(guān)系。本次研究顯示， 糖尿病患者與健康人群維生素D受體基因型分布比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。據(jù)有關(guān)報(bào)道顯示， 維生素D受體基因多態(tài)與骨密度之間存在必要聯(lián)系， 維生素D受體基因其對(duì)骨密度的影響是家族遺傳的75%～85%；對(duì)于絕經(jīng)婦女的一般資料顯示：AA、 Aa、aa、基因型分布頻率比較正常女性較高[3-7]。

根據(jù)本次研究對(duì)本院收治的56例糖尿病患者作為研究對(duì)象， 其中骨質(zhì)疏松、骨量減少的糖尿病患者aa基因型頻率明顯高于骨量正常糖尿病患者（P<0.05）， 而Aa基因頻率相比又低于骨量正常糖尿病患者， 因此維生素D受體基因與糖尿病患者骨質(zhì)疏松存在必然關(guān)系。

綜上所述， 糖尿病患者維生素D受體基因分布對(duì)比健康人群無明顯差異；而糖尿病患者對(duì)應(yīng)Apal酶切位點(diǎn)維生素D受體基因多態(tài)與患者骨質(zhì)疏松存在必然關(guān)系。

參考文獻(xiàn)

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[收稿日期：2017-05-08]endprint