血細(xì)胞分析儀紅細(xì)胞參數(shù)干擾因素分析及處理

李艷+孫家祥+葉敏

【摘要】 目的 探討血細(xì)胞分析中紅細(xì)胞參數(shù)干擾因素及糾正方法。方法 32例標(biāo)本， 其中冷凝集標(biāo)本6例（冷凝集組）、高脂血標(biāo)本22例（高脂血組）、高白細(xì)胞（WBC）標(biāo)本4例（高WBC組）。所有樣本均使用EDTA-K2真空管采集靜脈血2～3 ml， 初檢30 min內(nèi)完成。冷凝集組標(biāo)本用37℃水浴10～20 min后立即上機再次檢測；高脂血組標(biāo)本采用低速離心（速度為1000 r/min）15 min后， 用等量血球稀釋液置換血漿混勻后再次上機檢測；高WBC組標(biāo)本采用壓積管低速離心去除白細(xì)胞層及血漿層加入等量稀釋液混勻后再次檢測。分析各組處理前后血紅蛋白（Hb）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細(xì)胞計數(shù)（RBC）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）等紅細(xì)胞參數(shù)變化。結(jié)果 高脂血組和高WBC組標(biāo)本處理前后Hb、MCH、MCHC水平比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）， 而RBC、HCT、MCV水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。冷凝集組標(biāo)本處理后的RBC（4.05±0.45）×1012/L、HCT（36.9±3.5）%、MCV（91.1±4.1）fl， 均高于處理前的（2.52±0.32）×1012/L、（18.6±2.2）%、（73.8±3.2）fl， MCH（30.6±3.8）pg、MCHC（335.8±15.8）g/L均低于處理前的（49.4±3.5）pg、（668.8±26.4）g/L， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；而冷凝集組處理前后Hb水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 冷凝集、高脂血和高WBC會對紅細(xì)胞參數(shù)產(chǎn)生明顯影響， 標(biāo)本必須適當(dāng)處理后方可獲得正確結(jié)果。

【關(guān)鍵詞】 紅細(xì)胞參數(shù)；冷凝集；高脂血；高白細(xì)胞

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.27.018

【Abstract】 Objective To investigate the interference factors and corrective methods of red blood cell parameters in hematology analyzer. Methods Among 32 specimen， there were 6 cold agglutination specimen （cold agglutination group）， 22 hyperlipidemia specimens （hyperlipidemia group） and 4 high white blood cells （WBC） specimens （high WBC group）. All samples were collected with EDTA-K2 vacuum tube for 2～3 ml and the initial examination was completed within 30 min. The cold agglutination group was tested again immediately after 10～20 min of water bath at 37℃. The hyperlipidemia group received low-speed centrifugation （speed as 1000 r/min） for 15 min， and the same amount of blood cell dilution was used to replace the plasma and then tested again after mixing. The high WBC group was treated with a pressure tube at low speed to remove the white blood cell layer and plasma layer. The same amount of dilution was mixed and tested again. Analysis was made on changes of red blood cell parameters of hemoglobin （Hb）， mean corpuscular hemoglobin （MCH）， mean corpuscular hemoglobin concentration （MCHC）， red blood cell （RBC） count， hematocrit （HCT） and mean corpuscular volume （MCV） before and after treatment. Results The hyperlipidemia group and high WBC group had statistically significant difference in Hb， MCH， MCHC level before and after treatment （P<0.05）， and had no statistically significant difference in RBC， HCT， MCV level （P>0.05）. The cold agglutination group had higher RBC as （4.05±0.45）×1012/L， HCT as （36.9±3.5）% and MCV as （91.1±4.1） fl after treatment than （2.52±0.32）×1012/L， （18.6±2.2）% and （73.8±3.2） fl

before treatment， and lower MCH as （30.6±3.8） pg and MCHC as （335.8±15.8） g/L than （49.4±3.5） pg and （668.8±26.4） g/L before treatment. Their difference was statistically significant （P<0.05）. Cold agglutination group had no statistically significant difference in Hb level before and after treatment （P>0.05）. Conclusion Cold agglutination， hyperlipidemia and high white blood cells have an obvious effect on red cell parameters， and the samples must be properly treated before to obtain correct results.endprint

【Key words】 Red blood cell parameters； Cold agglutination； Hyperlipidemia； High white blood cells

作為常規(guī)檢驗項目之一的血細(xì)胞分析已是臨床對患者評價必不可少的指標(biāo)， 在臨床診療中具有非常重要的作用。目前， 各級醫(yī)療機構(gòu)對血細(xì)胞分析基本上都采用專用的血細(xì)胞分析儀進行檢測， 只是儀器的型號與分析的參數(shù)略有不同。在實際工作中， 血細(xì)胞分析結(jié)果會受到多種因素的干擾， 甚至出現(xiàn)一些參數(shù)間相互矛盾或與臨床明顯不符的情況， 值得高度注意。本文對在實際工作中遇到的32例紅細(xì)胞參數(shù)明顯不符的標(biāo)本進行了分析與處理， 報告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 本次選取的32例標(biāo)本均來自本院2016年1月～

2017年2月門診和住院患者， 年齡5～76歲， 平均年齡（42.5±15.6）歲；其中女14例， 男18例；其中冷凝集標(biāo)本

6例（冷凝集組）、高脂血標(biāo)本22例（高脂血組）、高WBC標(biāo)本4例（高WBC組）。除4例高WBC標(biāo)本明顯提示外， 其余標(biāo)本初檢時因發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞參數(shù)明顯不符遂作進一步顯微鏡檢查或低速離心， 后發(fā)現(xiàn)是冷凝集和脂血影響。

1. 2 儀器與試劑 邁瑞B(yǎng)C-6600全自動血液分析儀及配套試劑；BD真空采血管；低速離心機。

1. 3 檢測方法 所有樣本均為隨機靜脈采血， 使用EDTA-K2真空管收集2～3 ml， 初檢30 min內(nèi)完成。冷凝集標(biāo)本用37℃水浴10～20 min后立即上機檢測；高脂血標(biāo)本采用低速離心（速度為1000 r/min）15 min后， 用等量血球稀釋液置換血漿混勻后再上機檢測；高WBC標(biāo)本采用壓積管低速離心去WBC層及血漿層加入等量稀釋液后混勻檢測。

1. 4 觀察指標(biāo) 監(jiān)測各組處理前后紅細(xì)胞參數(shù)（包括Hb、MCH、MCHC、RBC、HCT、MCV）變化。

1. 5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS23.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行處理。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

高脂血組和高WBC組標(biāo)本處理前后Hb、MCH、MCHC水平比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）， 而RBC、HCT、MCV水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。冷凝集組標(biāo)本處理前后的RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC水平比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）， 而Hb水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

3 討論

用血球分析儀作血細(xì)胞分析時， 嚴(yán)重脂血產(chǎn)生的白色渾濁會對比色法測定Hb水平造成影響， 造成Hb假性升高， 并造成MCHC及MCH數(shù)據(jù)的偏差[1]。但是在臨床上特別是門診標(biāo)本， 往往不易發(fā)現(xiàn)脂血標(biāo)本， 容易忽略， 從而造成患者Hb假性升高。本文發(fā)現(xiàn)的22例高脂血標(biāo)本是因為審報告時Hb與其他參數(shù)嚴(yán)重不符， 從而將標(biāo)本低速離心才發(fā)現(xiàn)。有報道認(rèn)為， 脂血標(biāo)本是否影響Hb測定， 與其甘油三酯（TG）含量有關(guān)， 當(dāng)TG<10.0 mmol/L時， 一般影響較小， 特別是當(dāng)TG>14.0 mmol/L時， 對血細(xì)胞分析多種參數(shù)影響明顯[2， 3]， 應(yīng)引起高度注意。本文主要分析脂血對紅細(xì)胞參數(shù)的影響， 對其他影響參數(shù)不在這里討論。對脂血標(biāo)本的處理有多種方法， 作者用血球分析儀配套的稀釋液等量置換血漿后再上機檢測， 結(jié)果得以糾正。近來， 李福林等[4]研究得出根據(jù)RBC大中小三種體積可分別用不同線性方程計算Hb， 與真實值非常接近， 同時避免了置換血漿帶來的不便， 簡化了操作步驟， 在實際工作中還需進一步印證。

高WBC標(biāo)本對Hb的影響與脂血類似， 大量的WBC影響Hb溶液的濁度， 使吸光度升高造成Hb測定假性升高。這種高WBC對Hb的影響更具隱蔽性， 特別是某些血液病大量的有核紅細(xì)胞可能造成Hb假性正常或升高， 影響病情的判斷和診療。以往報道認(rèn)為， 一般WBC≥40.0×109 /L 時， 其中的WBC才會對Hb的測定產(chǎn)生明顯影響， WBC值越高， 影響越大[5]。杜澤麗等[6]的研究表明， 這種影響可以通過回歸方程先計算差值：Hb差值=-25.09+21.89×1 g[WBC（×109/L）]，

然后得出實際值， 方便實用。但是否符合每一種血細(xì)胞分析儀， 有待于進一步驗證。

冷凝集標(biāo)本在臨床也較常見， 特別是在氣溫較低的季節(jié)更易出現(xiàn)， 這類標(biāo)本往往與某些特殊人群相關(guān)， 尤其是一些自身免疫性疾病或某些特殊感染病例更易出現(xiàn)[7-10]。RBC聚集成較大團塊檢測時溶血不完全不但影響RBC參數(shù)， 可能還會被儀器誤計為白細(xì)胞， 導(dǎo)致WBC結(jié)果偏高。從本文統(tǒng)計的數(shù)據(jù)來看， 這類標(biāo)本除對Hb無影響外， 對RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC影響顯著。其實對這類標(biāo)本處理并不難， 往往37℃水浴10～20 min后立即上機檢測大多可以糾正， 關(guān)鍵是要及時發(fā)現(xiàn)參數(shù)間的矛盾才會被糾正。

在實際工作中， 醫(yī)務(wù)工作者一定要關(guān)注血細(xì)胞分析各個參數(shù)的關(guān)聯(lián)度， 凡參數(shù)之間矛盾較大或嚴(yán)重不符者務(wù)必及時查找原因， 除關(guān)注儀器本身的性能和使用狀況， 及時查看提示信息外， 標(biāo)本因素是不容忽視的主要因素。認(rèn)真核查標(biāo)本狀況， 采取不同的處理方式， 是保證檢驗結(jié)果正確的前提。

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[收稿日期：2017-05-03]endprint