炎癥介質hs-CRP、IL-6和MMP-9水平與腦微出血的相關性研究*

盧俏麗，李 晨△，賈志榮

(1.天津市第五中心醫院神經內科,天津 300450；2.北京大學第一醫院神經內科，北京 100034)

論著·臨床研究

炎癥介質hs-CRP、IL-6和MMP-9水平與腦微出血的相關性研究*

盧俏麗1，李 晨1△，賈志榮2

(1.天津市第五中心醫院神經內科,天津 300450；2.北京大學第一醫院神經內科，北京 100034)

目的探討炎癥介質高敏C反應蛋白(hs-CRP)、白細胞介素6(IL-6)和基質金屬蛋白酶9(MMP-9)水平與腦微出血(CMB)的關系。方法收集非急性缺血性腦血管病患者201例，均行頭磁共振成像(MRI)+磁敏感加權成像(SWI)檢查，根據SWI結果分為CMB組49例和非CMB組152例，記錄兩組患者臨床資料，檢測炎癥介質hs-CRP、IL-6及 MMP-9的水平。采用Logistic回歸分析hs-CRP、IL-6和MMP-9水平與CMB的關系。結果CMB組患者炎癥介質hs-CRP、IL-6和MMP-9水平均明顯高于非CMB組(P<0.05)。Logistic多元回歸分析顯示調整了年齡、性別及傳統危險因素的影響，炎癥介質hs-CRP、IL-6和MMP-9[OR值(95%CI)分別為1.745(1.342～2.270),1.223(1.018～1.533),1.284(1.082～1.423),P<0.05)]同樣是CMB發生的危險因素。結論炎癥介質hs-CRP、IL-6和MMP-9水平與CMB密切相關，參與了CMB的發生。

腦出血；C反應蛋白質；白細胞介素6；基質金屬蛋白酶9；腦微出血；危險因素；炎癥介質

腦微出血(cerebral microbleeding,CMB)是腦內微小血管病變所致的，以含鐵血黃素沉積為主要特征的一種腦實質亞臨床損傷[1]。以往的報道認為，高血壓血管病變、腦淀粉樣血管病、既往缺血性腦損傷等造成的腦內微小血管病變是CMB形成的主要原因[2]。高血壓血管病變導致的CMB多發生在基底節區，腦葉CMB多與腦淀粉樣血管病變有關[1]。研究顯示，合并CMB的卒中患者卒中復發風險顯著增高[2]。有研究認為CMB灶數量較多時，在運用抗凝、抗血小板、溶栓治療時自發性出血的風險較高[3]。近一些研究顯示炎性反應是導致動脈粥樣硬化最重要的機制，且與腔隙性腦梗死及腦白質疏松密切相關，參與了小血管病變的過程[4]。目前炎癥過程與微出血的關系研究尚少。本研究旨在分析CMB的相關危險因素，為以后卒中的預防及治療提供臨床依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2013年6月至2015年12月天津市第五中心醫院神經內科收治的非急性缺血性腦血管病患者201例。根據磁敏感加權成像(SWI)結果分為兩組，CMB組49例，平均年齡(68.6±7.8)歲；無CMB 組152例，平均年齡(61.8±11.1)歲。納入標準：(1)所有患者均符合中華神經科學會2010年制訂的缺血性腦血管病診斷標準；(2)經頭顱磁共振成像(MRI)證實，且彌散加權成像(DWI)排除新發腦梗死；(3)年齡在45歲以上；(4)簽署知情同意書。排除標準[5]：(1)伴有嚴重意識障礙、失語的腦梗死后遺癥患者；(2)顱腦創傷史；(3)既往腦出血病史；(4)惡性腫瘤;(5)風濕及膠原病；(6)嚴重內科疾病(臟器功能衰竭)；(7)感染性疾病或服用抗炎藥物；(8)高敏C反應蛋白(hs-CRP)>8 mg/L；(9)不同意參加。

1.2方法

1.2.1臨床資料收集 記錄年齡、性別、體質量、身高、血壓、血糖、血脂及有無吸煙史、飲酒史、心臟病史等資料。收縮壓大于140 mm Hg或舒張壓大于90 mm Hg，或既往有高血壓史或正在服用抗高血壓藥物即診斷為高血壓。吸煙史、飲酒史包括過去曾經吸煙、飲酒已戒除或未戒除者。高脂血癥：三酰甘油(TG)≥1.7 mmol/L；低度脂蛋白膽固醇(LDL-C)≥3.64 mmol/L；總膽固醇(TC)≥5.7 mmol/L。空腹血糖水平大于或等于7.0 mol/L和(或)餐后血糖大于或等于11.1 mol/L診斷為糖尿病；抗血栓藥物包括抗血小板藥物及抗凝藥物。

1.2.2SWI檢查及CMB診斷 采用Philips Achieva 3.0T超導型MRI掃描儀，頭顱8通道矩陣線圈,SWI主要參數:三維梯度回波(3DFFE)序列，重復時間(Act TR) 17 ms,回波時間(TE) 24 ms,翻轉角5°,視野183 mm×230 mm，矩陣256×203，激勵次數1，層厚1 mm，層數100,敏感性因子1.5，掃描時間114 s。SWI圖像重建:原始圖像層厚1 mm，實時在線技術自動最小密度投影(mIP)重建。重建層厚5 mm，常規掃描直接顯示圖像，所有圖像在工作站上進行對比分析。采用隨機雙盲法由經驗豐富的影像科及神經科醫師同時閱片，并參考微出血解剖評定量表(MARS)對微出血進行評價，取得一致意見后記錄[6]。CMB的診斷標準[7]：SWI及梯度回波加權成像(GRE-T2WI)序列上表現為1～10 mm低信號，形狀為圓形或卵圓形，排除鐵、鈣沉積，骨影，血管流空信號。腔隙性腦梗死診斷標準:FLAIR序列3～15 mm邊界清楚的低密度影像，而T2序列表現為高信號影像，T1序列表現為低信號影像。腦白質病變診斷標準：參照Wahlund 評分分級方法,每側大腦半球均被劃分為5個區域，即額葉、頂枕葉、顳葉、幕下區域(包括小腦和腦干)、基底節區(包括紋狀體、蒼白球、丘腦、內囊、外囊、島葉)，每個區域單獨評分(0～3分，4個等級)，基底節區域0分為無損傷，1分為1個局限性損傷，2分為多于1個局限性損傷，3分為融合損傷，最終得分為雙側大腦半球各區域評分的總和。

1.2.3炎性標志物檢測 (1)hs-CRP水平測定：采用乳酸比濁免疫法檢測，于患者入院24 h內取空腹肘靜脈血3 mL,注入乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管中，室溫下靜置0.5～1.0 h后以3 000 r/min離心15 min，離心半徑10 cm，分離血清，-20 ℃冰箱保存，定期分批檢測。(2)白細胞介素6(IL-6)水平測定：采用雙抗體夾心酶聯免疫法檢測，于患者入院后24 h內取空腹肘靜脈血2 mL，凝固后分離血清，于20 ℃保存待測，將血清于測定前置冷水中復融混勻，4 ℃時予3 000 r/min離心15 min，離心半徑10 cm，分離血清，-20 ℃冰箱保存，定期分批檢測。(3)基質金屬蛋白酶9(MMP-9)水平測定：采用Quantikine試劑盒，ELISA方法檢測，于患者入院后24 h內取空腹肘靜脈血3 mL,盡快分離血清，低溫保存，檢測前復融。為保證檢測結果準確可靠，每次檢測均由檢驗科同一醫師操作，每次檢測前同一質控物矯正儀器。

2 結 果

2.1兩組臨床資料比較 CMB組患者年齡、高血壓患病率、收縮壓水平、冠心病患病率、腔隙性腦梗死發生率、抗血栓藥物使用率及腦白質疏松評分均高于非CMB組(P<0.05)，見表1。

2.2兩組炎癥介質hs-CRP、IL-6和MMP-9水平比較 CMB組患者炎癥介質hs-CRP、IL-6和MMP-9水平均明顯高于非CMB組(P<0.05)，見表2。

表2 兩組炎癥介質水平比較[M(Q1，Q3)]

2.3CMB與炎癥介質hs-CRP、IL-6、MMP-9水平關系的Logistic回歸分析 以有無CMB為因變量，將炎癥介質hs-CRP、IL-6、MMP-9水平為自變量進行Logistic多元回歸分析，結果顯示，調整了年齡和性別的影響，炎癥介質hs-CRP、IL-6、MMP-9是CMB發生的危險因素。調整了年齡、性別及傳統危險因素BMI、吸煙、飲酒、高血壓、收縮壓及舒張壓水平、糖尿病、高脂血癥、冠心病、腔隙性腦梗死、抗血栓藥物的使用及腦白質疏松評分的影響，炎癥介質hs-CRP、IL-6、MMP-9仍是CMB發生的危險因素，見表3。

表3 Logistic回歸分析

CMB1：調整了年齡與性別；CMB2：調整了年齡、性別及傳統危險因素

3 討 論

CMB不僅常見于缺血性、出血性卒中患者，而且見于正常老年人群，更為重要的是，CMB可以預測未來缺血性卒中的再發及抗栓患者的出血性卒中的發生[8],因此探尋其發病機制已成為研究熱點。既往研究證實炎性反應與腦微血管病變、腔隙性腦梗死和腦白質病變密切相關。本研究進一步明確炎癥介質hs-CRP、IL-6和 MMP-9與CMB的關系。

既往研究顯示炎癥介質hs-CRP、IL-6、IL-18在CMB患者中明顯高于非CMB患者，與CMB的位置無關，與小血管病變的嚴重程度相關，提示炎性反應是微出血的重要的發病機制[5]。有研究發現血清MMP-9水平升高與CMB 密切相關，并且血清MMP-9水平與CMB 呈正相關[9]。又有研究顯示卒中患者中hs-CRP、MMP-9與CMB密切相關，同時MMP-9是神經損傷的獨立危險因素[10]。本研究結果顯示調整了年齡、性別及傳統危險因素的影響，炎癥介質hs-CRP、IL-6和MMP-9仍是CMB發生的危險因素，與上述結果一致。大量研究證實內皮功能障礙和血腦屏障(BBB)的破壞是腦小血管病的主要起始病理表現。IL-6是一種在炎性反應中起重要作用的細胞活素，與腦微出血及腦小血管病密切相關[11]。有研究發現老年人的含鐵血黃素沉積于毛細血管周圍，外滲的含鐵血黃素經擴大的血管間隙遷移，促進炎性反應，導致腔隙梗死的形成，這些發現在某種程度上支持炎性過程，反映了炎性機制導致小血管病和CMB的發生[12]。動物實驗結果顯示，MMP-9表達增加與慢性血腦屏障損傷關系最為密切[13]。腦缺血再灌注后，MMP表達增加，尤其是MMP-9增加更為顯著，MMP-9通過降解細胞外基質，使血腦屏障破壞，血腦屏障通透性增加[14]。上述研究均支持炎性反應參與內皮功能障礙和血腦屏障破壞，導致CMB的發生。

綜上所述，炎癥介質hs-CRP、IL-6和MMP-9水平升高與CMB密切相關，同時炎性反應參與了CMB的發生。CMB與缺血性卒中及出血性卒中密切相關，CMB病灶越多，患者腦卒中復發風險越高。考慮使用抗血小板聚集、抗凝治療或溶栓治療時，最好行常規頭MRI+SWI及血炎性標志物檢測，判斷有無CMB及CMB的嚴重性，用以指導臨床用藥及評估出血轉化的風險。

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Studyoncorrelationbetweenlevelsofhs-CRP,IL-6andMMP-9withcerebralmicrobleeding*

LuQiaoli1,LiChen1△,JiaZhirong2

(1.DepartmentofNeurology,TianjinFifthCentralHospital,Tianjin300450,China；2.DepartmentofNeurology,FirstHospital,PekingUniversity,Beijing100034,China)

ObjectiveTo discuss the correlation between levels of hs-CRP,IL-6 and MMP-9 with cerebral microbleeding(CMB).MethodsA total of 201 of non-acute ischemic cerebrovascular were collected and performed heal MRI+susceptibility-weighted imaging(SWI).The patients were divided into the CMB group(49 cases) and non-CMB group(152 cases) according to the SWI examination results.The clinical data were recorded in the two groups.The levels of inflammatory mediators high-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP),interleukin-6 (IL-6) and matrix metalloproteinase-9(MMP-9) were tested.The Logistic regression analysis was used to analyze the relation between the levels of hs-CRP,IL-6 and MMP-9 with cerebral microbleeding.ResultsThe levels of inflammatory mediators hs-CRP,IL-6 and MMP-9 in the CMB group were significantly higher than those in the non-CMB group (P<0.05).The logisticMultivariate logistic regression analysis showed that the levels of hs-CRP,IL-6 and MMP-9[ORvalue(95%CI):1.745(1.342-2.270),1.223(1.018-1.533),1.284(1.082-1.423),P<0.05)] were the risk factors of CMB after adjusting the influence of age,sex and traditional risk factors.ConclusionThe levels of inflammatory mediators hs-CRP,IL-6 and MMP-9 are closely associated with CMB,which participate in CMB occurrence.

cerebral hemorrhage；C-reactive protein；interleukin-6；matrix metalloproteinase 9；cerebral microbleeding;risk factor;inflammatory mediator

R741

A

1671-8348(2017)26-3629-03

2017-02-18

2017-06-13)

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.26.010

天津市衛生局科技基金(2013KZ021)；天津市濱海區衛生局科技項目(2013BWKY025)。

盧俏麗(1983-)，住院醫師，碩士，主要從事腦血管病及神經免疫方面研究。△

，E-mail：lichenokk@163.com。