中藥飲片丹參表里關聯的研究

田紅林 劉兆龍 孫 蕓

(1 新疆醫科大學附屬中醫醫院藥學部，烏魯木齊，830000； 2 新疆醫科大學中醫學院，烏魯木齊，830011)

中藥飲片丹參表里關聯的研究

田紅林1劉兆龍1孫 蕓2

(1 新疆醫科大學附屬中醫醫院藥學部，烏魯木齊，830000； 2 新疆醫科大學中醫學院，烏魯木齊，830011)

目的：研究中藥丹參飲片外觀性狀和內在成分的相關性。方法：通過外觀、色澤、質地、大小、氣味等傳統經驗鑒別判定飲片質量，同時采用高效液相色譜法(HPLC)測定飲片中丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量。對比實驗結果的一致性。結果：傳統經驗鑒別與HPLC測定結果對中藥丹參飲片的判定結果一致。結論：傳統經驗鑒別方法簡便、可靠，可用于丹參飲片的質量控制。

丹參；傳統經驗鑒別；高效液相色譜法；表里關系

丹參(SalviamiltiorrhizaBge.)是傳統中藥之一,為活血祛瘀、涼血、養血安神的婦科要藥。常用于月經不調，經行困難，產后瘀滯腹痛以及肢體疼痛，心腹刺痛，癥瘕等癥[1]。古人入藥丹參多為野生品，外觀形態在古典醫籍均有記載，李時珍《本草綱目》曰：“處處山中有之，一枝五葉，葉如野蘇而尖，青色，皺皮。小花成穗如蛾形，中有細子，其根皮丹而肉紫”[2]。

現今丹參的使用以栽培品為主，其主根粗壯，分枝較少，直徑5～15 mm，表面紅褐色，具縱皺，質地堅實，折斷面平整，以條粗，色紫紅者為佳[3]。藥典規定丹參飲片含丹參酮ⅡA不得少于0.20%，丹酚酸B不得少于3.0%[1]。

丹參為臨床重要的常用中藥飲片，醫院購買丹參批次多、批量大，若每批都通過高效液相色譜法測定含量，會使得檢驗時間長，影響藥材在臨床中的使用。筆者在醫院多年從事中藥材鑒定工作，結合工作經驗，首先通過傳統經驗鑒別[4]，即性狀鑒別，判定丹參是否合格，然后通過HPLC考察丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量。通過對比2個實驗的結果，發現傳統經驗鑒別與高效液相色譜法測定結果一致。表明傳統經驗鑒別方法簡便、可靠，可廣泛用于日常中藥飲片的驗收。由于野生資源不足，本文只討論栽培品。

1材料與方法

1.1 一般材料

1.1.1 儀器 Waters2695高效液相色譜儀(美國Waters公司)；AG-135電子天平0.01 mg(瑞士)；AL204電子天平0.1 mg(梅特勒-托利多儀器有限公司)；SK3300LH超聲清洗器(上海科導超聲儀器有限公司)；Direct-QTM5超純水儀(MilliPore)；DYQ-188流水式粉碎機(中國浙江省瑞安市環球藥械廠)；KDM型控溫電熱套(山東甄城華魯電熱儀器廠)。

1.1.2 材料 丹參酮ⅡA(批號：110766-200518)、丹酚酸B(批號：A0056-12020104)對照品均由中國食品藥品檢定研究院提供；丹參(批號分別為：(131103-1、131112-1、131120-1、131124-1131129-1、140205-1、140214-1、140302-1、140316-1、140327-1、141010-1、141022-1、141104-1、141128-1、141207-1)由新疆奇康哈博維藥有限公司提供；甲醇、乙腈為色譜純，由美國Fisher試劑公司提供；其他試劑均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 傳統經驗鑒別[5-6]筆者采用傳統經驗分別鑒別15批丹參飲片，通過丹參飲片表面色澤、質地、端面色澤、端面質地判斷中藥飲片的質量優劣[7]。并由新疆維吾爾自治區中醫醫院李延升主任中藥師復核鑒定結果。

1.2.2 色譜條件與溶液制備[1]1)丹參酮ⅡA：參照藥典高效液相色譜法(附錄Ⅵ D)測定。

色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(75∶25)為流動相；檢測波長為270 nm。理論板數按丹參酮ⅡA峰計算應不低于2 000。

對照品溶液的制備：取丹參酮ⅡA對照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1 mL含丹參酮ⅡA16 μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備：取本品粉末(過三號篩)約0.3 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，稱定重量，加熱回流1 h，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

本品含丹參酮ⅡA(C19H18O3)不得少于0.20%。

2)丹酚酸B：參照藥典高效液相色譜法(附錄Ⅵ D)測定。

色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59)為流動相；檢測波長為286 nm。理論板數按丹酚酸B峰計算應不低于2 000。

對照品溶液的制備：取丹酚酸B對照品適量，精密稱定，加75%甲醇制成每1 mL含0.14 mg的溶液，即得。

供試品溶液的制備：取本品粉末(過三號篩)約0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50 mL，稱定重量，加熱回流1 h，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

本品按干燥品計算，含丹酚酸B(C36H30O16)不得少于3.0%。

1.2.3 方法學考察[8-11]1)線性關系考察：依次分別精密量取丹參酮ⅡA、丹酚酸B標準品溶液各0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、3.0 mL置10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，即得系列對照品溶液。分別進樣，記錄色譜圖。2)精密度試驗：取同一質量濃度的對照品溶液，重復進樣5次，測定。3)穩定性試驗：精密吸取同一供試品溶液，每2 h進樣1次，每次進樣10 μL.連續考察12 h。4)重復性試驗：取樣品，依法制備供試溶液，平行制備5份，測定。5)回收率試驗：精密吸取已知含量的樣品6份，每樣吸取5 mL，分別精密加入丹參酮ⅡA對照品溶液0.1 mL、丹酚酸B對照品溶液0.5 mL，依法測定并計算回收率。

1.2.4 樣品含量測定 將上述15批丹參藥材按照《中國藥典》2010年版一部第70頁丹參項下含量測定方法分別測定了丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量，判斷藥材是否合格。

表1 傳統經驗鑒別結果

2結果

2.1 傳統經驗鑒別

2.1.1 丹參驗收標準 1)顏色棕紅色為3分，棕紅色帶黑色2分，桃紅色1分，黑色0分；2)直徑0.2～0.8 cm為3分，0.2～0.4 cm為0分，0.8～1.2 cm為0分；3)斷面顏色類白色2分，斷面白色1分，黑色為0分；4)氣味苦澀味3分，淡苦澀為2分，無味為0分；5)非藥用部位多為1分。10%以上判為不合格；6)0～6分為不合格，6～10分為合格。非藥用部位過多為劣藥既為不合格。

2.1.2 依據丹參驗收標準 15批樣品判定其中6批(批號分別為：131120-1、140214-1、140302-1、140327-1、141022-1、141104-1)為不合格藥材。見表1。

2.2 方法學考察[12-15]

2.2.1 線性關系考察 以對照溶液濃度為橫坐標(C，mg/mL)，以峰面積為縱坐標(A)作圖，得丹參酮ⅡA、丹酚酸B的回歸方程分別為：Y=1.468 3×10-5X-0.04340(r=0.999 9)；Y=1.323 4×10-7X-0.003175(r=0.999 8)，結果表明，丹參酮ⅡA在5.2～156 μg、丹酚酸B在28～840 μg、范圍內與峰面積均呈良好的線性關系。

2.2.2 精密度試驗 結果丹參酮ⅡARSD為1.06%(n=5)，丹酚酸BRSD為1.17%(n=5)，表明儀器精密度良好。

2.2.3 穩定性試驗 結果的丹參酮ⅡARSD為1.79%(n=5)，丹酚酸BRSD為2.01%(n=5)，表明供試品溶液在12 h內穩定。

2.2.4 重復性試驗 結果丹參酮ⅡARSD為1.68%(n=5)，丹酚酸BRSD為1.05%(n=5)。表明方法重復性良好。

2.2.5 回收率試驗 結果測得的丹參酮ⅡA平均回收率為99.34%，RSD為0.58%(n=6)；丹酚酸B平均回收率為99.79%，RSD為0.66%(n=6)，結果見表2、表3。

表2 回收率試驗結果(n=6)

表3 回收率試驗結果(n=6)

圖1 丹參酮ⅡA、丹酚酸B HPLC色譜圖

注：A.丹參酮ⅡA對照品,B.丹酚酸B對照品,C.藥材中丹參酮ⅡA,D.藥材中丹酚酸B;1丹參酮ⅡA,2丹酚酸B

2.3 樣品含量測定 將上述15批丹參藥材分別測定丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量，按照藥典規定，丹參酮ⅡA不得少于0.20%，丹酚酸B不得少于3.0%，判斷藥材是否合格，結果5批(批號分別為：131120-1、140214-1、140327-1、141022-1、141104-1)不合格。結果見表4。含量測定結果顯示，有5批不合格的丹參均為丹參酮ⅡA的含量較低，不符合《中國藥典》規定，與傳統經驗鑒別判定不合格的批次及數量吻合。實驗結果說明傳統經驗鑒別的可靠性、準確性高，可以用于日常中藥飲片的驗收。

表4 HPLC法測定丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量結果

2.4 統計學分析

2.4.1 將高效液相色譜法測定結果與傳統經驗鑒別結果的數據交易比對，并采用響應面統計學公式進行含量方程的擬合，得到以下結果。見表5。

表5 2種鑒別方法的統計

注：χ2=15.00，P=0.001

2.4.2 利用經驗擬合丹參酮含量方程

Y=-0.186 6+0.0525*顏色+0.0276*直徑+0.0596 2*斷面顏色+0.117 25*非藥用部位

R2=0.820 881R2s=0.749 234F=11.457 2P=0.0009

2.4.3 丹酚酸B含量預測定方程

Y=9.558 7-0.927 4*顏色-0.61480*直徑-1.0871 2*斷面顏色+(顏色-2.266 7)*[(直徑-2.4)*0.906 77]

R2=0.906 296R2S=0.868 814F=24.179 8P=0.0001

結果顯示，傳統經驗鑒別與現代儀器鑒別有較好的相關性。

3討論

丹參外表顏色主要為棕紅色，有的略帶黑色，斷面角質樣。若斷面出現黑色，說明丹參未熏過硫磺。外表顏色為淡的紅棕色，則說明飲片大部分經過硫磺熏蒸。丹參飲片的粗細主要是影響丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量。丹參直徑較粗則丹酚酸B含量符合藥典規定，丹參酮ⅡA含量不符合規定。反之，丹參較細則丹參酮ⅡA符合藥典規定。因此，丹參飲片批號為131120-1、140214-1、140327-1、141022-1、141104-1131120-1、140214-1的直徑較粗，丹酚酸B含量符合藥典規定，丹參酮ⅡA含量不符合規定。批號140302-1丹參直徑較小，丹參酮ⅡA符合藥典要求。

本實驗采用傳統經驗鑒別和HPLC含量測定，2種方法比較了15個批次丹參飲片的質量，實驗結果說明傳統經驗鑒別和HPLC含量測定在判定中藥材質量方面存在表里關系。雖然目前有很多研究單位已經開始使用電子鼻、電子眼、電子舌來研究中藥材及飲片性狀和內在品質的相關性[4]，但是由于中藥材及飲片來源為礦物藥、植物藥、動物藥，使用電子設備考察中藥材質量也在摸索之中，而且設備價格昂貴，容易損壞。

對于全國各級醫療單位來說，尤其是相對偏遠的縣級醫療單位，由于各種原因使用現代儀器檢驗中藥飲片較為困難，故而多采用傳統經驗鑒別來驗收中藥飲片。因此傳統中藥材鑒別就顯得更加實用，傳承傳統經驗鑒別就顯的更為迫切。本實驗結果說明傳統經驗鑒別方法可靠、快速簡便、準確性高，可以用于日常中藥飲片的驗收。

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[2]謝宗萬.中藥品種理論與應用[S].北京:人民衛生出版社,2008:202.

[3]中國藥品生物制品檢定所,廣東省藥品檢定所.中國中藥材真偽鑒別圖典(2)[S].廣州：廣東科技出版社,2007:49.

[4]李兵,張志勇.幾種常見中藥飲片摻偽、摻雜鑒別及快速檢驗[J].中國藥業,2010,19(18):78-79.

[5]鄒廣珍.幾種中藥飲片摻偽鑒別[J].實用中醫藥雜志,2009,25(12):839.

[6]丁維毅,付光煜,趙蓮芳,等.常見中藥飲片中偽充品的鑒別[J].中國中藥雜志,2001,26(9):641-642.

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(2016-09-06收稿 責任編輯：徐穎)

第三屆中非中醫藥國際合作與發展論壇第二輪會議通知(2017埃及·開羅)

為貫徹落實《中醫藥“一帶一路”發展規劃(2016-2020年)》要求，促進在“一帶一路”沿線國家的中醫藥海外中心建設、中醫藥國際標準認可、中藥產品注冊以及中醫藥對外交流合作示范基地的建設，整合中醫藥國際合作資源，構建中醫藥國際合作平臺，世界中醫藥學會聯合會決定在埃及首都開羅舉辦“第三屆中非中醫藥國際合作與發展論壇”。論壇期間國內外學者、埃及以及周邊國家的醫藥衛生行業主管部門及企業代表將進行學術研討、技術交流合作及商業對接。

現將會議有關事項通知如下：

一、大會主題：推動中醫藥交流合作 服務非洲人民健康

二、主辦單位：世界中醫藥學會聯合會

承辦單位：北京東方恒信國際交流有限公司

三、會議時間：2017年11月10日-16日，11月9日報到。

四、會議地點：埃及·開羅

五、論壇內容：

(一)學術及商業研討

1、中醫中藥在埃及以及周邊國家的現狀與未來；

2、埃及以及周邊國家食品藥品監督管理部門醫藥(包括植物藥等)進口的相關政策、法規，所在國家對接企業、機構以及相關商業程序；

3、埃及以及周邊國家醫療行業的執業要求及進口藥品市場銷售業的要求與規定；

4、埃及以及周邊國家使用中藥(中藥飲片、植物提取物、中成藥)的情況、藥品來源以及主要進口商；

5、中國中醫藥相關廠商在埃及以及周邊國家開設分廠、進行二次加工或成品分裝上市的可能性及對策。

(二)實地考察與座談

1、考察埃及的醫藥大學和制藥企業；

2、考察埃及中醫診所及私立醫院；

3、與埃及以及周邊國家的經銷商、投資商以及有合作意向的企業座談并商業洽談。

六、報名方式

(一)網絡報名

登陸網站(http://tcmforum.medmeeting.org/cn)，在個人代表注冊專區中報名，一次性繳納全部參會費用。

(二)線下報名

電話報名，并通過以下賬戶匯款繳納全部參會費用。

賬戶名：世界中醫藥學會聯合會

賬號：110060971018002604480117

開戶行：交通銀行北京育惠東路支行

特別提示：請準確填寫或來電說明住宿要求，單位名稱及相關信息務請準確，以便開具發票。線下匯款者請注明：參會者姓名+中非論壇。

網絡報名截止日期：2017年10月10日12:00。

參會者須在2017年11月7日統一在北京報到，報到時務請攜帶報名表、護照、身份證。特殊情況請提前聯系說明。

七、參會費用

共計26000元人民幣。費用包括：會議費、往返機票，簽證費、地接費、英文助理、車費、食宿費。9月15日前繳費：個人優惠500元人民幣；團體(10人及以上)每人優惠1000元人民幣。

簽證未通過者退還全部團費(簽證費除外)。簽證已辦妥，因個人原因不能參加會議者，團費退還百分之三十。如需換乘商務艙或入住酒店單房，須提前告知并支付相應差價。

八、聯系方式

辦公室電話：+86 10 58239055

張老師：+86 13811425951，魏老師：+86 13621390426

世界中醫藥學會聯合會

2017年8月1日

ResearchonExteriorPropertiesandContentCorrelationofSalviaeMiltiorrhiza

Tian Honglin1, Liu Zhaolong1, Sun Yun2

(1DepartmentofPharmacy,theSixthHospitalAffiliatedtoXinjiangMedicalUniversity,Urumqi830000,China; 2SchoolofTraditionalChineseMedicine,XinjiangMedicalUniversity,Urumqi830011,China)

Objective:To observe the correlation between properties and tastes of Salviae Miltiorrhiza(Dan shen) and its contents.Methods:To identify the quality of Chinese herbs from its shape, color, texture, size and taste as well as the content of tanshitone IIA and salvianolic B by HPLC. Then compare the results.Results:The two results of assessment conform to each other.Conclusion:Traditional ways in identifying herbs are reliable and convenient.

Salviae Miltiorrhiza; Traditional identifying ways; HPLC; Correlation between interior and exterior

R284

：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2017.09.051

新疆醫科大學附屬中醫醫院院級課題(ZYY201311)；全國中藥特色技術傳承人才培訓項目(2014)

田紅林(1976.03—)，男，本科，副主任藥師，主要從事中藥民族藥研究開發，E-mail:547626727@qq.com

孫蕓(1976.12—)，女，碩士，副教授，研究方向：中藥民族藥創新與研發，Tel：(0991)4366567，E-mail:sunyun330@163.com