馬超數(shù)排卵技術(shù)研究進(jìn)展

文│郭少仙（河南省焦作市博愛縣動物疫病預(yù)防控制中心）張陽陽（河南省武陟縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所）姚利雙（河南省焦作市博愛縣農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量綜合檢測中心）

馬超數(shù)排卵技術(shù)研究進(jìn)展

文│郭少仙（河南省焦作市博愛縣動物疫病預(yù)防控制中心）張陽陽（河南省武陟縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所）姚利雙（河南省焦作市博愛縣農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量綜合檢測中心）

近年來，隨著經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，各種馬術(shù)運(yùn)動逐漸在國內(nèi)廣泛開展，因此對馬匹的數(shù)量、質(zhì)量要求也日趨提高。但是，馬是繁殖周期較長的單胎動物，通常情況下母馬一年只能生產(chǎn)一匹小馬駒，嚴(yán)重制約著馬的擴(kuò)繁。胚胎移植技術(shù)是優(yōu)良種馬快速擴(kuò)繁的有效途徑，而超數(shù)排卵是胚胎移植的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，簡化和提高馬的超數(shù)排卵技術(shù)具有重要的生產(chǎn)應(yīng)用價(jià)值。本文對母馬的生理特點(diǎn)、超數(shù)排卵的機(jī)理、超數(shù)排卵藥物、超數(shù)排卵胚胎的活力及對妊娠率的影響等方面進(jìn)行了綜述。

一、母馬生理特點(diǎn)

1.發(fā)情周期。馬是季節(jié)性繁殖動物，繁殖季節(jié)一般在較為溫暖的季節(jié)，我國母馬的發(fā)情季節(jié)一般在3～8月份。母馬發(fā)情周期平均為21天（16～25天），發(fā)情期5～10天，也有延長至12天的情況；母馬妊娠期平均為340天，分娩后6～13天母馬開始發(fā)情，稱為產(chǎn)后發(fā)情。產(chǎn)后發(fā)情配種一般比較容易受胎。

2.卵巢。母馬卵巢的結(jié)構(gòu)特殊，卵巢髓質(zhì)在外，皮質(zhì)在內(nèi)，具有排卵窩；只有排卵窩有生殖上皮，成熟卵泡只能從排卵窩處破裂排卵，故排卵過程較長。此外，卵巢對促卵泡素（FSH）的反應(yīng)不如其他家畜敏感，使得卵泡發(fā)育到成熟的時(shí)間也較其他家畜長，所以母馬的發(fā)情期持續(xù)時(shí)間較長。母馬一般為單側(cè)排卵，兩側(cè)卵巢的排卵幾率不同，一般情況下左側(cè)卵巢排卵比右側(cè)排卵多。隨著卵泡發(fā)育，促卵泡素的分泌不斷增加，又會通過大腦的神經(jīng)組織使垂體分泌促黃體素，促使卵泡里的卵子成熟，使卵泡破裂排卵，破裂的卵泡里面形成黃體；母馬排卵后14天左右黃體達(dá)到最大，此時(shí)黃體細(xì)胞很大，周圍出現(xiàn)空腔，排卵后17天黃體開始退化，約需7周時(shí)間黃體才能完全退化。

二、超數(shù)排卵的機(jī)理

哺乳動物卵巢的卵泡，根據(jù)不同的發(fā)育階段可分為原始卵泡、初級卵泡、次級卵泡、三級卵泡和成熟卵泡。動物出生后早期，一定數(shù)量的卵泡開始生長，但大多數(shù)處于靜止?fàn)顟B(tài)，開始生長的卵泡經(jīng)過初級卵泡、次級卵泡形成有腔卵泡，大多數(shù)卵泡在此階段閉鎖。如果初情期后有促性腺激素的刺激，有些卵泡通過周期性的選擇及生長，達(dá)到排卵。實(shí)驗(yàn)證明，動物有腔卵泡閉鎖之前，注射FSH或孕馬血清促性腺激素（PMSG）能使大量卵泡不閉鎖而發(fā)育成熟；在排卵之前注射促黃體生成素（LH）或人絨毛膜促性腺激素（HCG），可以保證大量成熟卵母細(xì)胞同時(shí)排卵。超數(shù)排卵的過程就是應(yīng)用超過體內(nèi)正常水平的外源促卵泡激素，使將要閉鎖的有腔卵泡發(fā)育成熟而排卵。

三、超數(shù)排卵藥物

從1974年第一次成功對母馬超數(shù)排卵以來，已經(jīng)有許多學(xué)者嘗試運(yùn)用不同的激素對母馬進(jìn)行超數(shù)排卵。用于母馬超數(shù)排卵的激素主要FSH、LH、PMSG和HCG等。

Fortune和Kimmich （1983）比較了不同劑量豬FSH誘導(dǎo)母馬超數(shù)排卵的效果，結(jié)果顯示，得到了1.5～1.8的排卵率，其中50%～83%的母馬排雙卵。Woods和Ginther（1983）的研究顯示，用馬垂體提取物（EPE；主要是FSH和LH）處理母馬得到的平均排卵率為3.0枚，70%的母馬排兩個(gè)以上卵。Squires等（1986）比較了運(yùn)用EPE和豬FSH超數(shù)排卵的效果，給母馬注射EPE得到的排卵率為2.2枚，注射150毫克豬FSH得到的排卵率為1.6枚。這些數(shù)據(jù)清晰地表明，EPE誘導(dǎo)母馬超數(shù)排卵效果較好，每個(gè)發(fā)情周期能得到2～3枚卵。

由于EPE中LH的含量變化很大，在很多實(shí)驗(yàn)中，F(xiàn)SH和LH的精確含量沒有報(bào)道，但在牛超數(shù)排卵時(shí)，F(xiàn)SH制劑中LH的量太高一般會降低排卵反應(yīng)。因此，許多學(xué)者開始使用一種純化的馬垂體制劑產(chǎn)品（eFSH）。許多研究均表明，eFSH處理成功地提高了發(fā)情周期母馬的排卵率和胚胎回收率。PMSG由于半衰期長，能對卵巢產(chǎn)生持續(xù)刺激，從而引起卵巢的不良反應(yīng)，且用于馬的超數(shù)排卵效果不好，實(shí)際生產(chǎn)中較少使用。HCG與LH的生物學(xué)功能基本相似，常與FSH配合使用，具有促進(jìn)卵泡成熟和排卵并形成黃體的作用。

四、超數(shù)排卵胚胎的活力及對妊娠率的影響

1.超數(shù)排卵胚胎的活力。Squires 等（1987）移植了自發(fā)排卵和超數(shù)排卵母馬的胚胎，得到了相同的群體妊娠率。此外，Dippert等（1994）分別從超數(shù)排卵母馬和自發(fā)排卵母馬輸卵管回收胚胎，并培養(yǎng)了10天，發(fā)育情況相似。因此表明，超數(shù)排卵與自發(fā)排卵獲得的胚胎的生存能力沒有顯著差異。

2.超數(shù)排卵與妊娠率。正常母馬的超數(shù)排卵可以增加卵母細(xì)胞數(shù)量，通過人工授精從而提高母馬的個(gè)體妊娠率。Niswender等通過對比試驗(yàn)研究結(jié)果顯示，對母馬每天注射兩次eFSH，每次12.5毫克，用2500國際單位的HCG誘導(dǎo)排卵方法的母馬的排卵率和妊娠率最高（排卵率為3.4±0.7，妊娠率為1.8±0.8）。Raz等研究顯示，eFSH處理母馬排卵率（2.2±1.9）高于對照組（1.1±0.3），但是，16匹eFSH處理母馬中8匹妊娠，妊娠率為50%；26匹對照母馬中16匹妊娠，妊娠率為62%。Squires等表示，在eFSH處理的母馬之間排卵率變化相當(dāng)大，且eFSH處理的母馬大約有25%的母馬在沖胚時(shí)不能收集到胚胎。造成排卵率和胚胎回收率變化的原因尚不清楚，或許eFSH能更有效的提高個(gè)體的胚胎回收率，對提高一群母馬的胚胎回收率和妊娠率還有待研究。

五、小結(jié)

目前，超數(shù)排卵技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐中，但是個(gè)體之間超數(shù)排卵效果差異較大。同一種超數(shù)排卵方法對不同個(gè)體之間的超排效果不同，這除了個(gè)體本身的差異外，激素藥物的使用劑量、注射途徑、生產(chǎn)廠家、生產(chǎn)批號的不同，都影響著超數(shù)排卵的效果。同時(shí)，超數(shù)排卵胚胎的活力和妊娠率也直接影響著生產(chǎn)效益。在生產(chǎn)實(shí)踐中，為了加快優(yōu)良母馬的繁殖速率，提高優(yōu)秀種馬的利用率，除了保證良好的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件，進(jìn)行選種選配外，還要制定可行的超排方案，開展馬的超數(shù)排卵工作，為優(yōu)良品種的胚胎移植工作打下良好基礎(chǔ)。