吳建奇, 柴若楠, 木村吉延, 劉北星
(1.中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 神經(jīng)外科,遼寧 沈陽 110001;2.沈陽軍區(qū)總醫(yī)院 變態(tài)反應(yīng)科,遼寧 沈陽 110016;3.福井醫(yī)科大學(xué) 微生物學(xué)教研室,福井 日本 910-1193;4.中國醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 免疫學(xué)教研室,遼寧 沈陽 110122)
HSV Us3蛋白激酶對巨噬細(xì)胞生物學(xué)活性和凋亡的影響研究
吳建奇1, 柴若楠2, 木村吉延3, 劉北星4*
(1.中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 神經(jīng)外科,遼寧 沈陽 110001;2.沈陽軍區(qū)總醫(yī)院 變態(tài)反應(yīng)科,遼寧 沈陽 110016;3.福井醫(yī)科大學(xué) 微生物學(xué)教研室,福井 日本 910-1193;4.中國醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 免疫學(xué)教研室,遼寧 沈陽 110122)
為探討單純皰疹病毒Us3基因及其編碼產(chǎn)物對LPS活化的巨噬細(xì)胞生物學(xué)活性和凋亡的影響,小鼠巨噬細(xì)胞系RAW246.7細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染pcDNA3.1(+)-Us3重組質(zhì)粒并體外培養(yǎng)。利用免疫熒光技術(shù)檢測轉(zhuǎn)染率,ELISA方法檢測培養(yǎng)上清中TNF-α分泌水平,Annexin-V染色評價(jià)轉(zhuǎn)染細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn),pcDNA3.1(+)-Us3重組質(zhì)粒可成功轉(zhuǎn)染至RAW246.7細(xì)胞,轉(zhuǎn)染率為10.3%。與空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組相比,pcDNA3.1(+)-Us3轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)上清中TNF-α分泌水平明顯升高,但凋亡細(xì)胞數(shù)量略有下降,證實(shí)Us3基因及其編碼蛋白在調(diào)控巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子分泌活性及其活化細(xì)胞凋亡方面發(fā)揮一定作用。
Us3蛋白激酶基因;RAW246.7細(xì)胞;TNF-α;凋亡
單純皰疹病毒(herpes simplex virus,HSV)屬皰疹病毒科,有兩個血清型,可分別引起眼角膜炎、致死性腦炎及生殖器皰疹等嚴(yán)重危害人類健康的疾病[1]。HSV為約80個基因的DNA病毒,其基因的一半以上為與病毒復(fù)制無直接關(guān)系的附加基因[2]。Us3即為HSV的附加基因,其產(chǎn)物Us3蛋白激酶具有多功能性,其中Us3介導(dǎo)的病毒抗宿主細(xì)胞凋亡功能受到密切關(guān)注。……