日糧添加屎腸球菌制劑對泌乳中期奶牛泌乳和消化性能的影響

袁霞 徐巧云 王夢芝 霍永久 羅昱宏

摘要[目的]研究飼糧中添加屎腸球菌制劑對泌乳中期奶牛泌乳量和表觀消化率的影響。[方法]選取24頭體重、胎次、泌乳量、泌乳期、體況等基本一致的荷斯坦奶牛，隨機分為3組：對照組、低劑量組（30 g/d屎腸球菌）、高劑量組（60 g/d屎腸球菌），測定泌乳量和第0、14、28天的表觀消化率。[結果]泌乳量在時間上無顯著差異（P>0.05）；高劑量組泌乳量最高，且顯著高于低劑量組（P<0.05），并高于對照組8.00%。高劑量屎腸球菌組干物質采食量顯著低于低劑量屎腸球菌組（P<0.05）。第28天，奶牛粗蛋白消化率顯著低于第14天（P<0.05），但粗脂肪消化率顯著高于第14天（P<0.05）。此外，高劑量屎腸球菌組粗脂肪消化率顯著高于低劑量屎腸球菌組。[結論]奶牛泌乳中期飼糧中添加60 g/d屎腸球菌制劑能夠提高泌乳量及飼料粗脂肪的表觀消化率，有利于飼料的轉化和利用。

關鍵詞屎腸球菌；泌乳量；表觀消化率

中圖分類號S816.7文獻標識碼A文章編號0517-6611（2017）17-0085-03

Abstract[Objective] To study the effects of adding Enterococcus faecium preparation in the diet on milk yield and apparent digestibility of dairy cows in the middle lactation stage. [Method] Twentyfour Holstein cows with similar body weight， fetal times， milk yield， lactating period， body condition and other status were selected and randomly divided into three groups： control group， lowdose group （30 g/d E. faecium）， highdose group （60 g/d E. faecium）. The milk yield and apparent digestibility on the 0th ， 14th ， 28th d were determined. [Result] There was no significant difference of milk yield at different time （P > 0.05）. The milk yield in highdose group was the highest， which was significantly higher than that in lowdose group（P < 0.05 ）. The dry matter intake in highdose group was significantly lower than that in low dose group （P < 0.05 ）. The crude protein digestibility on the 28th day was significantly lower than that on the 14th day（P < 0.05）， but the crude fat digestibility on the 28th day was significantly higher that on the 14th day （P < 0.05 ）. Additionally， the crude fat digestibility in highdose group was significantly higher than that in lowdose group （P < 0.05 ）. [Conclusion] Adding 60 g/d E. faecium preparation in the diet of Holstein cows in the middle lactation stage can enhance the milk yield and apparent digestibility of crude fat.

Key wordsEnterococcus faecium；Milk yield；Apparent digestibility

基金項目揚州大學大學生創新訓練項目（X20160668）；江蘇省自然科學基金基礎研究項目（BK20141270，BK20151312）；江蘇省優勢學科項目（PAPD）。

作者簡介袁霞（1997—），女，江西九江人，本科生，專業：動物科學。

*通訊作者：王夢芝，副教授，博士，碩士生導師，從事動物營養與飼料科學研究；霍永久，副教授，博士，碩士生導師，從事動物生產、營養與環境以及分子營養學研究。

收稿日期2017-04-21

近年來，微生態制劑被越來越多地應用于畜牧生產，微生態制劑中的有益菌在動物腸道內生長繁殖產生多種消化酶，并且合成B族維生素、氨基酸以及未知促生長因子等營養物質，提高飼料轉化率、促進動物生長，參與動物機體的新陳代謝及某些重要的代謝反應[1-2]。同時，微生態制劑具有環境友好、無殘留等優點，對于保護養殖生態環境和養殖業可持續發展具有重要意義。屎腸球菌屬于腸球菌屬，具有優良的生物學特性，在腸道中可形成優勢菌群，增加有益菌數量，抑制有害菌，能夠維持腸道菌群平衡，提高免疫力，并且對動物生產有一定的促進作用[3]。研究表明，在斷奶仔豬飼糧中添加屎腸球菌能夠顯著提高仔豬機體的免疫功能，并改善斷奶仔豬腸道菌群結構，能夠顯著促進斷奶仔豬的生長[4-5]，同時，能夠顯著降低料重比和提高部分免疫指標水平[6]。Awad等[7]發現添加含屎腸球菌和寡糖可以顯著改善肉仔雞日增重以及飼料轉化效率。曲鵬等[8]通過試驗發現在蛋雞飼糧中添加復合微生態制劑，其中的屎腸球菌、嗜酸乳桿菌可產生能增強腸道活力，增強腸道蠕動的乳酸、過氧化氫、細菌素等物質，提高飼料消化率。劉光輝[9]研究表明在肉雞免疫前后使用anpu01屎腸球菌，能提高雞的成活率和降低疾病發生率。分離魚體內屎腸球菌進行抑菌特性研究發現，其能夠很好地抑制如金黃色皮葡萄球菌、哈維氏弧菌和梅氏弧菌等細菌生長[10]。進一步將含有屎腸球菌的飼料投喂給六須鯰后發現，腸道內有害菌群如致病性大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等的數量有所下降[11]。桂藝方等[12]研究發現枯草桿菌屎腸球菌二聯活菌制劑能夠直接調節大鼠的腸道微生態失調，并且間接起到保肝護肝的作用，對大鼠的急性肝衰竭有一定的治療作用。綜上所述，屎腸球菌在動物生產影響的研究主要集中在豬、家禽和水產動物等方面，但對反芻動物生產性能方面的研究相對較少。筆者采用在泌乳中期奶牛的飼糧中添加不同水平的屎腸球菌，以探討屎腸球菌對泌乳中期奶牛泌乳量和表觀消化率的影響，旨在為屎腸球菌制劑在奶牛飼料中的應用技術研究提供一些試驗參考。

1材料與方法

1.1試驗設計

在揚州大學實驗農牧場選擇24頭體重、胎次（1～2胎）、泌乳期[（40±2） d]、泌乳量[（21.0±1.0） kg]、體況（3.0分）等性狀相對一致的荷斯坦奶牛作為試驗動物。根據揚州大學實驗農牧場提供并參照NRC（2001）[13]奶牛飼養標準配制試驗基礎飼糧，飼糧采用TMR混合機混合（基礎飼糧的組成及營養水平見表1）。同舍分單圈飼養試驗牛，每天早晚2次適量飼喂（添加劑先與部分飼糧混合，再混合），分早、中、晚3次擠奶。保證試驗奶牛均固定槽位，自由飲水，適當運動，飼養管理皆保持一致。試驗隨機分為3組，每組8個重復。3組奶牛分別為對照組（飼喂基礎飼糧）、低劑量組（飼喂基礎飼糧+ 30 g/d 屎腸球菌）、高劑量組（飼喂基礎飼糧+ 60 g/d屎腸球菌）。試驗期為42 d，其中預試期14 d，正試期 28 d。屎腸球菌由濱海普潤生物科技有限公司提供，為粉狀，白色，使用石灰粉攪拌稀釋，細菌數含量為 1010 個/g。

1.2樣品采集與測定

記錄試驗期奶牛的泌乳量。記錄第1天中午、晚上和第2天早加料重量和第2天中午剩料重量，計算干物質的采食量（DMI）。

在試驗第0、14、28天連續3 d收集糞樣（每天收集200 g左右糞樣），10%硫酸固定，混合3 d糞樣；同時，采集飼料樣品。用鹽酸不溶灰分法測定各養分表觀消化率。

1.3數據統計與分析

使用Excel軟件對試驗數據進行整理，使用SPSS 18.0統計軟件進行方差分析和鄧肯氏多重比較。P<0.05表示差異。

2結果與分析

2.1對泌乳量的影響

由表2可知，泌乳量和干物質采食量在時間上無顯著差異（P>0.05）。高劑量組在泌乳量顯著高于低劑量組（P<0.05），與對照組差異不顯著（P > 005），但高劑量組產奶量較對照組提高了8.00%。低劑量組干物質采食量顯著高于高劑量組（P<0.05），與對照組相比差異不顯著（P>0.05）；高劑量組每公斤干物質泌乳量顯著高于低劑量組（P<0.05），與對照組相比差異不顯著（P>005）。

2.2對表觀消化率的影響

由表3可知，干物質消化率、有機物消化率和ADF消化率在各處理和時間上無顯著差異（P>0.05）。粗蛋白消化率在各組間無顯著差異（P>005），但第28天的粗蛋白質消化率顯著低于第14天（P<0.05）。第14天的粗脂肪消化率顯著低于第0、28天（P<0.05），高劑量屎腸球菌組的粗脂肪消化率顯著高于低劑量屎腸球菌組（P<0.05）。高劑量屎腸球菌組的NDF消化率顯著低于對照組（P<0.05），與低劑量屎腸球菌組的差異不顯著（P>0.05）。

3討論

3.1屎腸球菌對奶牛泌乳量的影響

該研究結果表明，添加高劑量屎場球菌能提高奶牛的產奶量和其每公斤干物質的產奶量。Nocek等[14]研究表明，奶牛產犢前后在其飼糧中補充含有屎腸球菌和酵母菌的復合微生態制劑能夠提高采食量和產奶量，與該研究結果相一致。研究表明，屎腸球菌在代謝過程成中可以產生乳酸，而瘤胃內的埃氏巨球形菌可以利用乳酸來產生揮發性脂肪酸，其中的乙酸是乳脂合成的前體物質[15]。另外，丙酸桿菌可將乳酸發酵成丙酸，由于丙酸是早期泌乳奶牛糖異生作用的主要前體物[16]，丙酸生成量增高可使肝葡萄糖生成量增高[17]，這將為乳糖的合成提供更多原料[18]。增加瘤胃丙酸產量或增加瘤胃內可吸收葡萄糖含量均可提高對動物的葡萄糖供給量[19-20]，葡萄糖是乳糖合成的前體，而乳糖是乳的主要滲透壓物質，增加對泌乳動物的葡萄糖供給可以通過促進乳糖合成而提高泌乳量[21]。姜艷美等[22]在奶牛試驗中發現，屎腸球菌液添加組比對照組顯著提高了瘤胃液的乙酸與總揮發性脂肪酸濃度。龐德公等[23]研究表明，當奶牛瘤胃總揮發性脂肪酸生成量增加，其泌乳量及乳脂含量上升。由此可見，屎腸球菌可能是通過調節瘤胃發酵、促進揮發性脂肪酸生成而提高泌乳量的。

3.2屎腸球菌對奶牛表觀消化率的影響

對單胃動物的研究表明，屎腸球菌能夠快速黏附腸道黏膜并在動物腸道內大量定殖，產生乳酸、細菌素、過氧化氫等物質降低腸道pH、抑制病原菌、改善胃腸內環境，維持微生態平衡[24]。Srensen等[25]將耐藥性的動物源屎腸球菌喂給雞和豬，14 d后能夠在糞樣中檢測到耐藥菌株的濃度，表明其能夠在動物的胃部生存和繁殖。王永等[26]研究表明，與對照組相比，飼糧中添加屎腸球菌對仔豬平均日采食量、料重比無顯著影響，但添加高劑量的屎腸球菌有降低仔豬料重比的趨勢。華均超等[27]發現益生菌制劑能夠幫助機體修復腸道功能，維持腸道內微生態平衡，并且益生菌的使用能夠增加小腸絨毛長度和隱窩深度，從而促進機體對營養物質的消化吸收。由此可見，活菌制劑進入胃腸道后定殖和生長使腸道有菌群的數量得到增加，平衡了消化道菌群和微生態環境，從而提高了宿主的飼料消化率。該研究結果表明，日糧添加屎腸球菌能夠提高日糧粗脂肪的消化率。其可能的原因包括：有益菌在瘤胃內生長繁殖能夠促進維生素、氨基酸及促生長因子等營養物質的產生，刺激瘤胃內微生物分泌各種消化酶，進而有利于飼料脂肪的消化[28]。此外，有益菌群在腸道所造成的酸性環境與一般腸道內消化酶的最適pH相符合，產生的有機酸還可促進腸道分泌消化液和腸道的蠕動，也可能因此有利于養分的消化吸收而提高其消化率[29]。然而，其對粗脂肪消化率提高的機理尚需進一步闡明。

4結論

泌乳奶牛的飼糧中添加60 g/d屎腸球菌制劑能夠提高泌乳量以及飼料粗脂肪表觀消化率，可提高奶牛的生產性能。

45卷17期袁 霞等日糧添加屎腸球菌制劑對泌乳中期奶牛泌乳和消化性能的影響

參考文獻

[1] 周利梅.微生態制劑在飼料中的應用[J].糧食與飼料工業，2000（11）：29-31.

[2] 劉艷，明雙喜，王沂蒙，等.關注益生菌[J].中國家禽，2007，29（3）：43-48.

[3] 王前光，高惠林，劉秋.微生態制劑的研究進展及其在養豬生產上的應用[J].飼料廣角，2010（24）：45-47.

[4] 文靜，孫建安，周緒霞，等.屎腸球菌對仔豬生長性能、免疫和抗氧化功能的影響[J].浙江農業學報，2011，23（1）：70-73.

[5] 劉揚科，李希.日糧中添加屎腸球菌對斷奶仔豬生產性能及腹瀉率的影響[J].飼料與畜牧（新飼料），2013（4）：65-66.

[6] 劉虎傳，張敏紅，馮京海，等.益生菌制劑對早期斷奶仔豬生長性能和免疫指標的影響[J].動物營養學報，2012，24（6）：1124-1131.

[7] AWAD W，GHAREEB K，BHM J.Intestinal structure and function of broiler chickens on diets supplemented with a synbiotic containing Enterococcus faecium and oligosaccharides[J].International journal of molecular sciences，2008，9（11）：2205-2216.

[8] 曲鵬，馬明穎，王恩成，等.復合微生態制劑對蛋雞生產性能及雞蛋品質的影響[J].糧食與飼料工業，2012（12）：51-53.

[9] 劉光輝.anpu01屎腸球菌對肉雞生產性能和免疫效果的影響[J].山東畜牧獸醫，2013（4）：14-15.

[10] 楊紅玲，孫云章，馬如龍，等.斜帶石斑魚（Epinephelus coioides）腸道乳酸菌MM1和MM4抑菌特性研究[J].海洋與湖沼，2010，41（4）：543-548.

[11] BOGUT I，MILAKOVIC' Z，BRKIC' S et al.Effects of enterococcus faecium on the growth rate and content of intestinal microflora in sheat fish（Silurus glanis）[J].Veterinrní Medicíne，2000，45（4）：107-109.

[12] 桂藝方，李彥偉，韓鵬飛，等.枯草桿菌屎腸球菌二聯活菌制劑對急性肝衰竭大鼠腸道微生態失調的調節作用[J].微量元素與健康研究，2013，30（2）：4-5.

[13] NRC.Nutrient Requirements of Dairy Cattle [M].Seventh Revised Edition.Washington，DC：The National Academies Press，2001.

[14] NOCEK J E，KAUTZ W P.Directfed microbial supplementation on ruminal digestion，health，and performance of preand postpartum dairy cattle [J].Journal of dairy science，2006，89（1）：260-266.

[15] KANKAANP P，YANG B，KALLIO H，et al.Effects of polyunsaturated fatty acids in growth medium on lipid composition and on physicochemical surface properties of lactobacilli[J].Applied and environmental microbiology，2004，70（1）：129-136.

[16] REYNOLDS C K，AIKMAN P C，LUPOLI B，et al.Splanchnic metabolism of dairy cows during the transition from late gestation through early lactation[J].Journal of dairy science，2003，86（4）：1201-1217.

[17] STEIN D R，ALLEN D T，PERRY E B，et al.Effects of feeding propionibacteria to dairy cows on milk yield，milk components，and reproduction[J].Journal of dairy sience，2006，89（1）：111-125.

[18] REYNOLDS C K，AIKMAN P C，LUPOLI B，et al.Splanchnic metabolism of dairy cows during the transition from late gestation through early lactation[J].Journal of dairy science，2003，86（4）：1201-1217.

[19] RULQUIN H S，RIGOUT S，LEMOSQUET S，et al.Infusion of glucose directs circulating amino acids to the mammary gland in wellfed dairy cows[J].Journal of dairy science，2004，87（2）：340-349.

[20] MACKLE T R，DWYER D A，INGVARTSEN K L，et al.Effects of insulin and postruminall supply of protein on use of amino acids by the mammary gland for milk protein synthesis[J].Journal of dairy science，2000，83（1）：93-105.

[21] 程光民，林雪彥，李福昌，等.瘤胃灌注乙丙酸不同摩爾比混合揮發性脂肪酸對奶山羊乳脂合成的影響[J].畜牧獸醫學報，2009，40（7）：1028-1036.

[22] 姜艷美，王加啟，鄧露芳，等.人工瘤胃評價屎腸球菌對瘤胃發酵的影響[J].西北農林科技大學學報（自然科學版），2008，36（6）：29-33.

[23] 龐德公.枯草芽孢桿菌、產朊假絲酵母與屎腸球菌對奶牛瘤胃微生物消化代謝和甲烷排放的影響[D].烏魯木齊：新疆農業大學，2014.

[24] 葛龍，李波.屎腸球菌在飼用微生態制劑中的研究與應用[J].飼料與畜牧（新飼料），2013（6）：57-59.

[25] SRENSEN T L，BLOM M，MONNET D L，et al.Transient intestinal carriage after ingestion of antibioticresistant Enterococcus faecium from chicken and pork[J].The new england journal of medicine，2001，345（16）：1161-1166.

[26] 王永，楊維仁，張桂國.飼糧中添加屎腸球菌對斷奶仔豬生長性能、腸道菌群和免疫功能的影響[J].動物營養學報，2013，25（5）：1069-1076.

[27] 華均超，張邦輝，周明，等.屎腸球菌T013復合制劑在斷奶仔豬生產中的應用研究[J].安徽農業科學，2012，40（11）：6519-6523.

[28] 麻延峰，傅春泉，王宏艷，等.益生素對奶牛泌乳性能及乳品質影響的研究[J].浙江農業科學，2008（4）：493-495.

[29] COLLINGTON G K，PARKER D S，ARMSTRONG D G.The influence of inclusion of either an antibiotic or a probiotic in the diet on the development of digestive enzyme activity in the pig[J].British journal of nutrition，1990，64（1）：59-70.