東北漢族人群抵抗素基因rs1862513(G/C)多態性與2型糖尿病相關性研究

陳珍珍，曹振強，周廣宇，李 娜，王 茜*

(1．吉林大學中日聯誼醫院 腎病內科，吉林 長春130033；2．吉林大學第二醫院 超聲科，吉林 長春130041)

東北漢族人群抵抗素基因rs1862513(G/C)多態性與2型糖尿病相關性研究

陳珍珍1，曹振強2，周廣宇1，李 娜1，王 茜1*

(1．吉林大學中日聯誼醫院 腎病內科，吉林 長春130033；2．吉林大學第二醫院 超聲科，吉林 長春130041)

目的 探討東北漢族抵抗素基因rs1862513(G/C)位點與2型糖尿病發病及臨床表型相關性。方法 應用連接酶反應分型法檢測79例2型糖尿病患者及79例正常對照者rs1862513(G/C)多態性。結果 2型糖尿病組和對照組抵抗素rs1862513(G/C)位點基因型分布分別為GG49.5%、GC44.3%、CC6.2%和GG40.2%、GC47.4%、CC12.4%；等位基因頻率分別為G型71.6%、C 28.4%和G型63.9%、C型36.1%，該位點的基因型分布和等位基因頻率在兩組間分布均無統計學意義(P值均>0.05)。病例組CC基因型患者空腹血糖明顯低于GG基因型患者(P值<0.05)，體重指數、總膽固醇、甘油三酯、糖化血紅蛋白、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、胰島素以及胰島素敏感指數等臨床檢測指標在rs1862513(G/C)三種基因型患者之間沒有顯著差異(P值均>0.05)。結論 東北漢族人群抵抗素基因rs1862513(G/C)多態性與2型糖尿病發病無顯著相關性，但與患者空腹血糖值相關。

抵抗素;基因多態性;2型糖尿病

(ChinJLabDiagn,2017,21:1185)

我國糖尿病發病率逐漸升高，并呈年輕化趨勢。隨著人類基因組計劃完成，以及遺傳學理論與技術在醫學中的應用，糖尿病發病遺傳學因素成為闡述糖尿病發病機理及治療重要依據，特別是糖尿病發生易感性基因研究成為熱點[1，2]。

人抵抗素來源于單核-巨噬細胞系統，為炎性因子參與機體內多種病理過程[3]。小鼠糖尿病模型研究認為抵抗素與糖尿病發病過程中胰島素抵抗有關[4]，而人類抵抗素是否通過誘發胰島素抵抗引發2型糖尿病的發生還存在爭論[5，6]。近幾年發現抵抗素基因的單核苷酸多態性(SNP)位點可能影響血清中抵抗素的含量，并與2型糖尿病有密切關系。對rs1862513(G/C)位點研究較多[7-9]。研究結果表明抵抗素基因rs1862513(G/C)位點與我國2型糖尿病發病沒有相關性[10-12]。對我國南方人群基因多態性與疾病相關性研究結果和種族以及地區不同具有一定相關性[13，14]。本研究以我國東北地區人群為研究對象，探討抵抗素基因rs1862513(G/C)位點與本地區糖尿病發病相關性及臨床表型相關性。

1 材料與方法

1.1 對象

97例2型糖尿病患者均為吉林大學中日聯誼醫院內分泌科明確診斷者。資料包括年齡、性別、體重指數、總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖、空腹胰島素、糖化血紅蛋白、胰島素抵抗指數等。正常對照組97例為吉林大學中日聯誼醫院體檢中心體檢健康者。2型糖尿病患者平均年齡47.34±7.04(歲)，正常對照組平均年齡49.25±8.80(歲)，兩組間沒有顯著性差異(P值=0.097)。2型糖尿病患者男49名，女48名，正常對照組男57名，女40名，組間男女分布沒有顯著性差異(P值=0.325)。

1.2 DNA提取

抗凝靜脈血，2 000 g離心10 min，取血漿，血細胞用于DNA提取(試劑盒北京天根生物公司)。DNA用紫外分光光度計DNA含量與OD260/OD280比值，DNA分裝置-80℃保存。

1.3 基因分型

97例糖尿病患者與97例對照組DNA樣本用連接酶檢測反應分型法抵抗素基因rs1862513(G/C)位點基因型檢測。由上海捷瑞生物技術有限公司完成。

1.4 統計分析

抵抗素基因rs1862513位點在人群基因型、等位基因頻率分布及各組Hardy-Weinberg equilibrium統計應用Shesis軟件(http://analysis.bio-x.cn/SHEsisMain.htm)進行分析；rs1862513位點與糖尿病相關性模型(包括codominant model、dominant model、recessive model)統計應用SPSS13.0 軟件二分值Logit 回歸進行分析； 抵抗素基因的rs1862513位點基因型間臨床相關指標包括體重指數、總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖、糖化血紅蛋白、空腹胰島素、胰島素抵抗指數和胰島素敏感指數等的差異分析應用SPSS13.0 軟件方差分析方法進行分析。P值<0.05為有統計學意義。

2 結果

2.1 抵抗素基因rs1862513(G/C)基因型與等位基因人群分布頻率

Hardy-Weinberg遺傳平衡分析結果顯示rs1862513基因型在兩組人群中分布符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律。見表1。rs1862513基因型頻率分布在T2DM組與正常組人群差異無統計學意義(P=0.220),見表1。rs1862513等位基因頻率在T2DM組與正常組人群分布差異無統計學意義(P=0.103),見表2。

表1 rs1862513基因型在正常組與糖尿病組分布頻率

#基因型在各組分布差異性比較，*各組Hardy-Weinberg遺傳平衡檢測P值

表2 rs1862513等位基因在正常組與糖尿病組分布頻率

2.2 rs1862513位點與糖尿病相關性分析

通過分析rs1862513位點3種遺傳模式與糖尿病相關分析結果顯示：rs1862513位點3種遺傳模式與糖尿病沒有相關性，見表3。

表3 rs1862513位點與糖尿病相關性分析結果

*Codominant:GG vs.GC vs.CC;Dominant:CC+GC vs.GG;Recessive：CC vs.GC+GG

2.3 2型糖尿病患者rs1862513基因型與臨床生化指標相關性分析

病例組CC基因型患者空腹血糖明顯低于GG基因型患者(P值<0.05)，患者其他臨床生化指標在病例組中rs1862513 3種基因型患者間沒有顯著差異(P值均>0.05)，見表4。

3 討論

rs1862513(G/C)位點位于抵抗素基因啟動子區域-420位置，該位點基因型與血清抵抗素濃度高低相關，說明該基因型影響抵抗素基因啟動子的活性[7,15]。本研究檢測東北漢族人群97例2型糖尿病患者，97例正常對照者rs1862513(G/C)多態性。結果顯示rs1862513(G/C)基因型在人群中分布以GG型為主，等位基因CC為少數型，與其他幾個研究位點基因分布不同，上述人群rs1862513(G/C)位點分布GG為少數型[8，16-18]。同時本研究發現rs1862513(G/C)基因型與等位基因頻率在人群中分布無差異性，而與2型糖尿病相關性分析結果rs1862513(G/C)位點與2型糖尿病無相關性，這與國內研究結果相同[10，11]。

表4 rs1862513位點基因型間2型糖尿病患者相關生化指標的差異分析結果±SD)

*與GG相比P<0.05

通過分析臨床患者相關生化指標在rs1862513(G/C)基因型之間差異，發現糖尿病患者CC基因型空腹血糖(7.615±1.387 μmol/L)明顯低于GG基因型患者(9.656±2.296 μmol/L)(P值<0.05)。Makino H等在日本人群研究羅格列酮治療糖尿病有效性相關分子機制過程中發現rs1862513(G/C)不同基因型人群的空腹血糖沒有差異，給予羅格列酮后，通過相關性分析發現rs1862513(G/C)GG型與羅格列酮降糖效果密切相關[19]。病例組樣本體重指數、總膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、糖化血紅蛋白、胰島素敏感指數在rs1862513(G/C)中三種基因型間沒有顯著性差異(P值均>0.05)。

上述研究結果表明東北漢族人群抵抗素基因rs1862513(G/C)多態性與2型糖尿病無顯著相關性，但rs1862513(G/C)基因型與血糖的水平有關，說明該基因多態性可能通過調節抵抗素表達影響血糖代謝，具體分子機制需要進一步研究。

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The correlation of resistin gene rs1862513(G/C)polymorphism with type 2 diabetes in northeast Chinese Han population

CHENZhen-zhen,CAOZhen-qiang,ZHOUGuang-yu,etal.

(Nephrology,China-JapanUnionHospitalofJilinUniversity,Changchun130033,China)

Objective To explore the correlation of resistin gene rs1862513 (G/C) polymorphism with type 2 diabetes and its clinical phenotype in northeast Chinese Han population.Methods Seventy-nine type 2 diabetic patients and 79 normal controls were enrolled.The polymorphism of rs1862513 (G/C) was detected by ligase detection reaction.Results The genotype frequencies of rs1862513(G/C) in type 2 diabetes group and normal control group are GG 49.5%,GC44.3%,CC6.2% and GG 40.2%,GC 47.4%,CC 12.4% respectively.Allele frequency is G 63.9%,C 36.1% and G 71.6%,C 28.4% respectively.There was no difference of resistin gene polymorphism in disease group and normal control group (P>0.05).The level of fasting blood glucose in patients with genetype CC were significantly lower than that in patients with genetype GG (P<0.05).There was no difference in body mass index,total cholesterol ,triglyceride,sglycated hemoglobin,high density lipoprotein cholesterol,low density lipoprotein cholesterol,insulin and insulin sensitive index(P>0.05)between the two patient groups.Conclusion There is no significant correlation between resistin gene rs1862513(G/C) and type 2 diabetes in northeast Han population，but there is significant correlation with level of blood glucose.

Resistin gene;Polymorphism;Type2 diabetes

吉林省科技廳項目(編號：20150204065SF)

1007-4287(2017)07-1185-04

R587.1

A

2016-11-30)

*通訊作者