急性胃出血患者早期血液CD4+CD25+T細胞及其細胞因子的變化

馬金環

(昌邑市婦幼保健院 檢驗科，山東 昌邑261300)

急性胃出血患者早期血液CD4+CD25+T細胞及其細胞因子的變化

馬金環

(昌邑市婦幼保健院 檢驗科，山東 昌邑261300)

急性胃出血是消化內科常見的急性疾病，主要由于胃部及十二指腸潰瘍、口服阿司匹林、胃癌、燒傷等原因引起的活動性出血[1]。近年研究發現[2]，免疫系統紊亂會加重原發病灶病變程度，進而加重出血的發生。CD4+CD25+T細胞是具有免疫增強及抑制的雙重T細胞，是一群能同時表達CD4及CD25分子的T細胞，能減輕過度免疫反應，從而減輕對器官及組織的損害，但當其水平過度升高時不僅不能有效抑制機體過強的炎癥反應，反而會加重炎癥損傷，進而加重患者病情[3,4]。本研究將探討急性胃出血患者早期血液CD4+CD25+T細胞及其細胞因子的變化及其與患者貧血程度的關系，旨在為急性胃出血患者早期診斷及預后評價提供指導。

1 資料及方法

1.1 臨床資料

2014年6月至2015年6月收治急性胃出血患者38例，患者符合中華醫學會消化內科學會對急性胃出血的診斷標準，臨床表現為血壓下降、腹痛、嘔血、黑便等，患者均經胃鏡檢查確診，男 18例，女20例，年齡18-68歲，平均(42.3±4.9)歲；另選取同期就診的35例經胃鏡診斷為消化潰瘍但未發生出血的患者為潰瘍組，男 18例，女17例，年齡18-66歲，平均(41.9±5.2)歲；選取同期行常規身體檢查的30例健康體檢者為對照組，男 16例，女14例，年齡18-67歲，平均(42.2±4.9)歲，3組性別、年齡無統計學差異(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 急性胃出血患者入院后禁食、禁水，同時留置胃管接引流觀察胃部內容物性狀，并從胃部注入止血藥物，同時給予保護胃黏膜、抑酸等治療，對于Hb<70 g/L的患者則輸注紅細胞直至恢復正常血壓水平。治療72 h后再次采集靜脈血測量相關指標。

1.2.2 CD4+CD25+T細胞測定 潰瘍組及對照組于檢查當天清晨8-9點空腹抽取靜脈血5 ml，急性胃出血組于入院當天及治療第3 d后分別抽取靜脈血5 ml，加入肝素鈉抗凝后離心處理10 min，留取血漿，并置于-80℃中待測。取上述樣品恢復至常溫后，調整樣品濃度至2×106/ml，并將樣品接種在6孔培養板中培養，收集對數生長期的細胞于測定管中，采用PBS洗滌2次后，分別加入IL-17A-FTTC及IFN-γ-FTTC染色劑對細胞漿進行染色，并采用美國貝克曼公司提供的Beckm Epics流式細胞儀測定外周血CD4+CD25+T細胞比例。

1.2.3 CD4+CD25+細胞因子測定 采用ELISA法測定3組IL-10、TGF-β水平，IL-10試劑盒由上海博研生物工程研究中心提供，TGF-β試劑盒由上海常斤生物科技有限公司提供，操作過程嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.2.4 Hb、RBC水平測定 采用日本Sysnex公司提供的SYSMEX1000型全自動化血液分析儀測定患者血紅蛋白含量(Hb)及紅細胞水平。

1.3 貧血判斷標準

血紅蛋白濃度(Hb)水平120-160 g/L為正常；90 g/L

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 3組CD4+CD25+、IL-10、TGF-β、Hb、RBC水平對比

急性胃出血組CD4+CD25+、IL-10、TGF-β水平顯著高于潰瘍組及對照組(P<0.05)，而Hb、RBC平顯著低于慢性胃潰瘍組及對照組(P<0.05)。潰瘍組與對照相比，CD4+CD25+、IL-10、TGF-β、Hb、RBC水平無統計學差異(P>0.05)，見表1。

表1 三組CD4+CD25+、IL-10、TGF-β、Hb、RBC水平對比

注：與對照組相比，aP<0.05；與胃潰瘍組相比，bP<0.05.

2.2 急性胃出血組患者治療前后CD4+CD25+、IL-10、TGF-β、Hb、RBC水平對比

急性胃潰瘍組治療后CD4+CD25+、IL-10、TGF-β水平較治療前顯著下降，而Hb、RBC較治療前顯著升高(P<0.05)，見表2。

表2 急性胃出血組治療前后CD4+CD25+、IL-10、TGF-β、Hb、RBC水平對比

2.3 CD4+CD25+、IL-10、TGF-β與貧血程度的關系

與輕度及中度貧血組相比，重度貧血組CD4+CD25+、IL-10、TGF-β水平顯著升高(P<0.05)，見表3。

表3 CD4+CD25+、IL-10、TGF-β與貧血程度的關系

注：與輕度組相比，aP<0.05；與中度組相比，bP<0.05.

3 討論

CD4+CD25+是重要的輔助性T細胞，可分泌IL-10、TGF-β等重要細胞因子，同時具有免疫調節的重要作用。與免疫增強作用相比，CD4+CD25+T細胞往往起到重要的免疫抑制作用[5,6]。研究表明[7]，免疫細胞功能異常尤其是T細胞異常會引發胃腸道疾病并會導致消化道出血如炎癥性腸病、消化性潰瘍、惡性腫瘤等。有研究指出[8]，胃腸疾病患者腸細胞壁免疫性損傷是導致胃部大出血的重要原因，而其主要作用機制可能與CD4+CD25+T細胞不能有效抑制血管壁內過強的炎癥反應，從而加重胃腸血管壁內膜損傷，并最終導致血管破裂有關。

本研究結果顯示，急性胃出血組患者外周血CD4+CD25+、IL-10、TGF-β水平顯著高于潰瘍組及對照組，而潰瘍組與對照組外周血CD4+CD25+、IL-10、TGF-β水平差異無統計學意義，這表明在急性胃出血患者中存在免疫功能失調現象，CD4+CD25+比例上調、IL-10、TGF-β表達水平增多與胃出血發病有密切的關系。因此通過測定CD4+CD25+、IL-10、TGF-β水平有助于早期急性胃出血診斷，結果與Thanh等[9]一致。本研究發現，急性胃出血患者Hb、RBC水平顯著低于潰瘍組及對照組，從而提示急性胃出血患者容易由于失血過多而發生貧血。此外，本研究發現急性胃出血患者經積極的治療后，外周血CD4+CD25+、IL-10、TGF-β水平顯著低于治療前，從而提示外周血CD4+CD25+、IL-10、TGF-β水平可作為急性胃出血患者預后的評價指標。與治療前相比，治療后患者Hb、RBC水平較明顯升高，這提示急性胃出血患者入院后經止血、保護胃黏膜等措施治療后能有效減輕胃腸道黏膜免疫性損害，從而有效改善患者病情。本研究發現，與輕度及中度貧血組相比，重度貧血組CD4+CD25+、IL-10、TGF-β水平顯著升高，這提示急性胃出血患者免疫功能失調與貧血存在一定的關系，即CD4+CD25+T細胞水平越高，患者出血程度越重，Hb水平越低，其可能機制可能與CD4+CD25+T細胞表達水平過高會導致消化黏膜免疫屏障功能障礙，從而表現為黏膜下血管通透性升高，增加患者出血量[11,12]。

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