血清及胸水中MMP-9和CD147的檢測(cè)對(duì)肺癌惡性胸腔積液的診斷價(jià)值

李婷婷,鄭薇薇,韓曉琳,李小娟,劉 穎

(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院 腫瘤內(nèi)科,黑龍江 哈爾濱150086)

*通訊作者

血清及胸水中MMP-9和CD147的檢測(cè)對(duì)肺癌惡性胸腔積液的診斷價(jià)值

李婷婷*,鄭薇薇,韓曉琳,李小娟,劉 穎

(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院 腫瘤內(nèi)科,黑龍江 哈爾濱150086)

胸腔積液增多是各醫(yī)院呼吸內(nèi)科常見的并發(fā)癥，主要病因包括肺結(jié)核、胸膜炎和惡性肺部腫瘤等[1]。在所有的胸腔積液中，惡性胸腔積液所占的比例相對(duì)較大，有文獻(xiàn)報(bào)道顯示占比高達(dá)45%以上[2]。目前對(duì)于胸腔積液的良惡性的判斷主要還是通過胸膜活檢和胸腔鏡等方式[3]。本文通過對(duì)比惡性和非惡性胸腔積液患者血清和胸水的MMP-9和CD147兩種腫瘤標(biāo)志物中含量差異，分析兩種腫瘤標(biāo)志物對(duì)于鑒別良惡性胸腔積液的臨床意義。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

2015年1月-2016年6月期間在我院住院的胸腔積液患者82例作為本次研究的觀察對(duì)象，根據(jù)是否為由于肺癌引起的胸腔積液分組。其中觀察組42例：男/女：26/16；年齡45-68歲，平均年齡(51.2+14.6)歲；診斷標(biāo)準(zhǔn)：患者經(jīng)胸膜活檢和組織學(xué)鑒定胸腔積液中存在腫瘤細(xì)胞，并排除有細(xì)菌和結(jié)核感染等其他非惡性腫瘤因素引起的胸腔積液。其中腺癌、鱗癌、大細(xì)胞癌和腺鱗混合癌分別為：18、15、8和1例。經(jīng)超聲影像學(xué)證實(shí)其中出現(xiàn)肺組織周圍淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的12例，未轉(zhuǎn)移患者30例；對(duì)照組40例：男/女：23/17；年齡42-63歲，平均年齡(47.3±12.9)歲；其中結(jié)核性胸腔積液的患者26例，診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)臨床癥狀種有低熱盜汗，消瘦癥狀出現(xiàn)等，實(shí)驗(yàn)室血液結(jié)核菌鑒定陽性，胸水白細(xì)胞成分以淋巴細(xì)胞為主；(2)經(jīng)過結(jié)核藥物的治療，臨床癥狀減輕，同時(shí)胸水明顯吸收減少。肺炎胸腔積液9例，診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)臨床有發(fā)熱和胸痛典型的肺炎表現(xiàn)，同時(shí)胸水成分檢測(cè)白細(xì)胞以中性粒細(xì)胞為主，胸水細(xì)菌培養(yǎng)有非結(jié)核菌群生長(zhǎng)；(2)抗生素治療及介入性引流患者的病情具有明顯的改善。心臟功能不全患者5例，診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)具有明確的心臟功能不全的臨床癥狀和診斷依據(jù)[4]；(2)排除腫瘤和結(jié)核等因素引起的胸部積液。兩組患者在年齡和性別比例等一般資料不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

1.2 方法

血清樣本采集無菌采取兩組患者清晨空腹靜脈血3 ml,靜置30 min,離心(3 000 r/min,10 min),收集上層血清，然后分裝入無菌EP管,-80℃保存。抽取新鮮胸水3 ml進(jìn)行同血液血測(cè)定前的離心和上清液提取保存過程。樣本統(tǒng)一采用酶聯(lián)免疫雙抗體夾心法對(duì)血液和胸水中的MMP-9和CD147進(jìn)行測(cè)定，MMP-9和CD147試劑盒由北京中杉金橋生物制品有限公司提供，操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。使用儀器：高速低溫離心機(jī)(長(zhǎng)沙維爾康湘鷹離心機(jī)有限公司)，冷藏冰箱及微量加樣器(賽默飛公司)，酶標(biāo)儀(美國(guó)伯樂公司)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組患者M(jìn)MP-9和CD147在血清和胸水中的含量

觀察組中的血清及胸水中的MMP-9顯著的高于對(duì)照組，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；觀察組中的血清及胸水中的CD147顯著的高于對(duì)照組，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，見表1。

2.2 診斷臨界點(diǎn)確定及診斷效能

通過做血清MMP-9、胸水MMP-9、血清CD147和胸水中CD147水平的ROC曲線，曲線下的面積分別為0.75(靈敏度：67.8%；特異度：73.4%)，0.74(靈敏度為：64.2%；特異度：81.7%)，0.78(靈敏度：67.2%；特異度：72.5%)和0.79(靈敏度：79.5；特異度：88.1%)，見表2。通過對(duì)ROC曲線的觀察來確定MMP-9和CD147的最佳臨界點(diǎn)，血清和胸水中MMP-9的最佳臨界點(diǎn)分別為：18.6ng/ml和27.16ng/ml，血清及胸水中CD147最佳臨界點(diǎn)分別為11.42ng/ml和16.11ng/ml。在平行診斷中發(fā)現(xiàn)血清MMP-9聯(lián)合CD147的靈敏度和特異度為89.2%和55.1%；胸水MMP-9聯(lián)合CD147的靈敏度和特異度為92.5%和72.3%；在系列診斷實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)血清MMP-9聯(lián)合CD147的靈敏度和特異度為45.3%和93.2%；胸水中MMP-9聯(lián)合CD147的靈敏度和特異度為51.8%和96.7%。

表1 兩組患者M(jìn)MP-9和CD147在血清和胸水中的含量

表2 血清及胸水中MMP-9、CD147診斷臨界點(diǎn)及診斷效能

3 討論

腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移必須要經(jīng)過粘附和降解基底膜進(jìn)入基底膜的過程，其中最關(guān)鍵的步驟就是細(xì)胞基質(zhì)降解，MMP-9廣泛的表達(dá)于肺癌、前列腺癌和乳腺癌等惡性腫瘤細(xì)胞內(nèi)，它能降解除了多糖以外所有的細(xì)胞外基質(zhì)成分[4]。文獻(xiàn)報(bào)道MMPs-9無論是在體內(nèi)腫瘤組織還是體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞珠中都與腫瘤細(xì)胞的侵潤(rùn)和轉(zhuǎn)移能力具有較強(qiáng)相關(guān)性，主要是其能夠通過破壞膠原組織和層連蛋白等細(xì)胞間的組織來破壞細(xì)胞屏障，降解基質(zhì)破壞細(xì)胞間聯(lián)系在ECM中發(fā)揮重要作用[5]。CD147作為基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子中的一員在多種腫瘤組織具有高表達(dá)性。CD147在腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移過程中主要是通過促進(jìn)MMPs-9產(chǎn)生的過程間接參與。MMPs-9主要產(chǎn)生于腫瘤相關(guān)組織成纖維細(xì)胞，有文獻(xiàn)報(bào)道CD147可以通過自分泌和旁分泌的方式刺激成纖維細(xì)胞產(chǎn)生MMPs-9[6]。本文研究結(jié)果中顯示惡性胸腔積水組(觀察組)MMPs-9和CD147無論是在胸水中和血清中都要顯著高于良性胸腔積水(對(duì)照組)(P<0.05),同時(shí)還發(fā)現(xiàn)胸水中二者的水平要高于血清中,說明二者在胸水形成的過程中發(fā)揮了重要的作用。胸腔積液中的MMP-9和CD147可以作為鑒別診斷是否由于肺癌原因引起的胸腔積液重要指標(biāo)，具有較好的臨床價(jià)值。

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1007-4287(2017)07-1163-02

2016-08-30)