微小核糖核酸592調控神經膠質瘤細胞株U251細胞凋亡

陳照亮劉紅楊會利高玉凱張娟吉文玉

·論著·

微小核糖核酸592調控神經膠質瘤細胞株U251細胞凋亡

陳照亮*○☆劉紅*楊會利*高玉凱*張娟*吉文玉△

目的研究微小核糖核酸592（miR-592）對神經膠質瘤細胞株U251凋亡的影響。方法首先通過定量聚合酶鏈反應分析miR-592在神經膠質瘤組織和癌旁組織中的表達變化；隨后向U251細胞轉染miR-592的擬合物，并通過流式細胞技術分析miR-592過表達對U251細胞凋亡的影響；通過生物信息學分析，找到miR-592的潛在靶分子，并通過熒光素酶雙報告實驗以及蛋白免疫印跡法等進行驗證；進一步，轉染U251細胞Runx2的下調siRNA，繪制細胞的生長曲線，并對U251細胞的凋亡進行分析。結果定量PCR結果分析發現，miR-592在腫瘤組織中明顯低表達（t=2.752，P=0.013）；miR-592過表達能明顯抑制U251細胞的生長，與對照組比較，培養36 h、48 h后存在統計學差異（t=2.127，P=0.031;t=2.284，P=0.026）；流式細胞分析結果顯示，miR-592顯著促進U251細胞凋亡：對照組晚期凋亡率為7.2％±0.68％，而轉染miR-592組晚期凋亡率為17.47％±1.45％，存在統計學差異（t= 3.294，P=0.007）；熒光素酶雙報告實驗以及蛋白免疫印跡法實驗結果發現miR-592直接靶向Runx2的3’-UTR來抑制Runx2蛋白的水平；檢測下調Runx2對U251細胞生長的影響，結果顯示轉染了Runx2 siRNA的細胞生長明顯比對照組低（t=3.124，P=0.011），流式細胞技術對周期的檢測顯示，Runx2下調表達上調U251細胞的凋亡率。通過繪制腫瘤生長曲線，發現miR-592過表達明顯抑制腫瘤的生長。同時，Runx2的下調表達也明顯抑制腫瘤的生長。結論miR-592通過直接靶向Runx2來誘導神經膠質瘤細胞凋亡，進而抑制細胞的生長。

神經膠質瘤U251 miR-592凋亡Runx2

神經膠質瘤是最為常見的原發性中樞神經系統腫瘤。……