魏杰

【摘 要】本試驗在一定條件下對魔芋多糖的抗氧化性進行研究,采用稀堿提取法提取魔芋多糖。采用DPPH法對其抗氧化能力進行檢測。研究結果顯示:魔芋具有抗氧化活性,對DPPH、羥基(·OH)自由基均有較高的清除作用。
【關鍵詞】魔芋;多糖;抗氧化
一、前言
魔芋是天南星科魔芋屬多年生草本植物的地下塊莖。魔芋在工業、醫藥、食品等方面之所以有廣泛的用途。魔芋含有多種氨基酸、多種礦物質微量元素和豐富的食物纖維,對防治糖尿病、高血壓有特效;魔芋低熱、低脂、低糖,對預防和治療結腸癌、乳腺癌、肥胖癥的人群可以說是一種上等的既飽口福、又治病健體的食品,還可以防治多種腸胃消化系統的多種常見慢性疾病,是有益的堿性食品,對食用動物性酸性食品過多的人,搭配吃魔芋,可以達到食品酸堿平衡。此外,魔芋還具有水平降血糖、降血脂、降壓、散毒、養顏、通脈、減肥、通便、開胃等多功能由此可見,魔芋是一種“天賜良藥”,食用起來有百利而無一害。總之,由于魔芋精粉具有多種營養、保健功能,逐漸引起了國內外醫藥、保健品、食品等各界及關心自身保健的人們的關注。我國的魔芋精粉,從十幾年前開始向日本出口,繼而發展到向日本、東南亞一帶及歐美國家吃口。出口量逐年加大,國際市場價格也不斷上揚。
研究表明多糖具有多種生物功能如:增強機體免疫功能、抗腫瘤、抗病毒、降血糖等,因此對多糖的研究愈來愈引起國內外生物學家、化學家和藥理學家的興趣,有關專家預言“21世紀將是多糖的時代”。多糖具有多種生物活性,某些多糖不但具有抗癌、抗病毒、抗衰老等作用,還是理想的免疫增強劑,因此,關于魔芋多糖的研究具有十分重要的意義。
二、試驗方法
(一)多糖提取方法
經過資料查詢與預實驗,提取結果以稀堿提取魔芋多糖結果最優。故選用稀堿提取法提取魔芋多糖。
新鮮魔芋經切片、烘干、粉碎(過40目篩),備用。
1g魔芋粉→加入100mL 0.5mol/L氫氧化鈉溶液→80℃熱水(料液比1:100)浸提→5000r/min4離心15min,合并上清液→濃縮5倍→Sevage法去蛋白質3次→脫蛋白堿提濃縮液→加入3倍體積濃度95%的乙醇→冷凍干燥→抽濾→收集醇沉淀物→依次用75%乙醇、無水乙醇、丙酮濾洗→魔芋粗多糖→真空冷凍干燥→稱重→測定多糖提取率。
(二)苯酚硫酸法測定多糖的方法
參照苯酚-硫酸法,測定多糖。
0.1%葡萄糖溶液:準確稱取干燥葡萄糖0.1000g,定容至100mL,再分配成10、20、40、60、80、100mg/L的系列標準溶液。
2g/L的蒽酮試劑:溶解蒽酮0.2g于100mL 95%硫酸中,置于棕色瓶中冷暗處保存。
分別吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL葡萄糖溶液并用蒸餾水補至2.0mL,然后加入1.0mL 6%苯酚及5.0mL濃硫酸,立即搖勻,室溫放置20min后再于490nm測光密度,以2.0mL水按同樣顯色操作空白對照,橫坐標為多糖微克數,縱坐標為光密度值,得標準曲線。結果表明,葡萄糖溶液在0.4mg/mL-1.2mg/mL范圍內呈線性關系。
吸取已定容的水解樣0.2mL置于10mL比色管中,加6%苯酚試劑1.0mL及濃硫酸5.0mL,搖勻后在室溫下靜置20min,每個樣品做三個平行樣,于490nm處用空白調零測吸光度,然后代入標準曲線算出其總糖含量。
(三)抗氧化活性的檢測方法
1.DPPH自由基清除能力測定
在10mL比色管中依次加入4mLDPPH溶液和4mL樣品溶液,再加入無水乙醇至刻度,混勻后在517nm波長處測吸光值(A),吸光值記為Ai,再在室溫避光保存30min后測吸光值,記為Aj,對照試驗為只加DPPH的乙醇溶液,吸光值記為Ac。(用無水乙醇調百分百)
按公式計算自由基清除率(K):K(%)=[1-(Ai-Aj)/Ac]×100%
其中Ai為樣液+DPPH的吸光值,Aj為樣液+蒸餾水的吸光值,Ac為蒸餾水+DPPH的吸光值。
2.OH清除能力的測定
在比色管中依次先加入2mL 3mmol/LFeSO4,2mL 3mmol/L乙醇-水楊酸,接著加入適量去離子水(蒸餾水代替),然后加入2mL3mmol/LH2O2,最后加入樣液,搖勻,37℃水浴加熱15min,取上清液,以維生素C為陽性對照于510nm測其吸光度。A0測定時,參比溶液為不加雙氧水的體系。Ax和Ax0測定時,參比溶液為去離子水。
按公式計算自由基清除率(K):K (%)=[1-(AX-AX0)/A0]×100%
其中A0 為空白對照的吸光值,AX為加樣品的吸光值,AX0為不加顯色劑H2O2,并測其吸光度值。
三、試驗結果
(一)抗氧化能力的檢測結果
通過對魔芋多糖提取物的抗氧化能力進行測定,試驗結果如表1所示:
表1結果顯示,兩種不同的方法全部顯示魔芋多糖物質具有很強的抗氧化能力。其中羥基(·OH)自由基清能力和DPPH自由基清除能力都很強。
四、總結
本試驗以魔芋為原料,通過稀堿法提取魔芋多糖。試驗中先對魔芋多糖提取物組分進行抗氧化活性的定性測定,研究結果顯示:
1.魔芋多糖具有一定的清除自由基能力,具有抗氧化性;
2.總抗氧化能力最強的提取條件下獲得的魔芋多糖提取物,對DPPH自由基清除率為71.73%,·OH自由基清除率為85.46%,抗氧化效果顯著。
我國魔芋資源豐富,長期以來我國民間就有栽培和食用魔芋的歷史。本試驗證明魔芋具有良好的抗氧化能力,將魔芋多糖添加至食品中,不僅可以增加食品的營養價值,還可起到一定的抗氧化的效果。在未來食品和化工等領域具有有廣泛的應用前景和價值。
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