肝癌切除術中不同程度低體溫對免疫功能影響的臨床研究

陳似霞，陳冬梅，李春蘭，李小娟，楊一蘭，彭 濤

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肝癌切除術中不同程度低體溫對免疫功能影響的臨床研究

陳似霞，陳冬梅，李春蘭，李小娟，楊一蘭，彭 濤

[目的]探討不同程度低體溫對肝癌部分切除術病人免疫功能的影響，為手術病人體溫護理提供依據。[方法]將160例術中低體溫肝癌部分切除術病人按不同低體溫分為A組(體溫<35.0 ℃，41例)、B組(體溫35.0 ℃～35.5 ℃，85例)和C組(體溫35.6 ℃～35.9 ℃，34例)。比較3組術前、術后第1天及第5天T細胞亞群及中性粒細胞絕對值(NEU)，比較術前、術后第1天及第2天白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-6(IL-6)水平。[結果]3組病人術后第1天CD3+，CD4+，CD8+，IL-2、IL-6水平及術后第2天IL-2，IL-6水平比較差異具有統計學意義(均P<0.05)，A組病人術后第1天CD3+，CD4+水平及IL-2水平低于B組、C組，CD8+水平及IL-6水平高于B組及C組。CD3+，CD4+，CD8+時間效應及交互效應具有統計學意義(均P<0.05)；IL-2，IL-6水平組間效應、時間效應及交互效應具有統計學意義(均P<0.05)。[結論]體溫<35.0 ℃對病人免疫功能影響較大，肝癌部分切除術病人應加強術中體溫保護，避免嚴重低體溫發生，以促進術后康復。

肝癌；術中；低體溫；免疫功能；T細胞亞群；中性粒細胞

原發性肝細胞癌(HCC)是我國常見的惡性腫瘤之一，尤其好發于廣西地區，以外科手術為主的綜合治療是肝癌的首選治療方案。機體核心溫度<36.0℃為低體溫，是外科手術常見的并發癥之一[1]。肝臟是機體靜息狀態下主要的產熱器官，肝部分切除直接減少機體產熱，同時在麻醉藥物作用下體溫調節功能異常，術野長時間暴露于低溫環境、術中肝門血管通路頻繁阻斷及大量補液等均使肝癌切除術病人更容易發生術中低體溫。免疫抑制是手術對免疫功能影響的主要表現，較多的研究表明：低體溫可直接損傷免疫功能，增加創面出血及感染的概率、延長病人住院時間[2-3]。但從低溫程度上對病人免疫功能的影響目前鮮有報道，因此，本研究擬探討不同低溫程度對病人免疫功能的影響，為手術病人體溫護理提供依據。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇我院肝膽外科2012年6月—2013年8月收治的行肝部分切除術的肝癌病人160例，其中男127例，女33例；年齡24歲～72歲(46.80歲±11.81歲)；腫瘤直徑5cm～10cm(6.80cm±1.78 cm)；手術時間3.0 h～6.8 h(4.42 h±1.30 h)。納入標準：①術前肝功能Child-Pugh分級均為A級，或B級經術前保肝治療后轉為A級；②術后肝組織病理診斷為肝細胞癌；③美國麻醉師協會(ASA)分級為Ⅰ級～Ⅱ級，采取靜吸復合麻醉方式；④術中及術后體溫<36.0 ℃。排除標準：①術畢體溫≥36.0 ℃者；②近期有發熱、感染未控制者；③采用腹腔鏡手術者；④有耳道疾病不宜測鼓膜溫度者。根據病人術中出現最低程度體溫分為A組(體溫<35.0 ℃，41例)、B組(體溫35.0 ℃～35.5 ℃，85例)、C組(體溫35.6 ℃～35.9 ℃，34例)。

1.2 方法

1.2.1 體溫測量方法 肺動脈體溫是測量體核溫度的金標準，但其創傷大且測量方法復雜。鼓膜溫度同樣可以反映體核溫度，因此采用安全、簡便的耳溫計(倍爾康 ET001)測量鼓膜溫度。病人在手術開始切皮至關腹結束后，每30 min測量記錄體溫1次。

1.2.2 標本采集與檢測 于麻醉前、術后第1天、第5天晨取病人外周靜脈血4 mL送本院檢驗科檢測，其中2 mL用于檢測CD3+、CD4+、CD8+，2 mL用于檢測中性粒細胞絕對值(NEU)。麻醉前(術前)、術后第1天、第2天取靜脈血2 mL，分離血清后置于-70 ℃冰箱保存，所有病例標本收集結束后采用酶聯免疫吸附法(ELISA)雙抗體夾心法統一檢測白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-6(IL-6)。ELISA試劑盒購于武漢博士德生物制品有限公司，特異性強，與其他細胞因子無交叉反應。

2 結果

2.1 3組病人一般情況比較(見表1)

表1 3組低體溫病人一般情況比較

2.2 3組病人免疫細胞水平比較 3組病人術后第1天CD3+，CD4+，CD8+水平比較差異均具有統計學意義(均P<0.05)，進一步兩兩比較，A組病人術后第1天CD3+，CD4+，CD8+水平與B組、C組比較差異具有統計學意義(均P<0.05)，B組與C組比較差異無統計學意義(P>0.05)。重復測量方差分析結果見表3。

表2 3組病人術前、術后免疫細胞含量及NEU計數比較±s)

表3 3組病人免疫細胞重復測量方差分析

2.3 3組病人細胞因子含量比較 3組病人術后第1天及第2天IL-2和IL-6水平比較差異均有統計學意義(均P<0.05)；進一步兩兩比較，A組病人術后第1天、第2天IL-2、IL-6水平與B組、C組比較差異具有統計學意義(均P<0.05)，B組與C組比較差異無統計學意義(P>0.05),見表4。重復測量方差分析結果見表5，其組間效應、時間效應、交互效應均具有統計學意義(均P<0.05)。

表4 3組病人細胞因子術前、術后含量比較±s) pg/mL

表5 3組病人細胞因子重復測量方差分析

3 討論

傳統意義上的免疫功能主要對機體發揮免疫監視等保護功能，但腫瘤細胞可通過一系列機制逃避宿主細胞的免疫攻擊。免疫微環境可直接或間接影響腫瘤的發生發展[4]。影響免疫功能的因素有很多，低體溫是其中之一，Gangjun等[5]研究表明：低體溫對病人免疫抑制微環境起決定性作用。

3.1 不同程度低體溫對病人細胞免疫功能有影響 肝癌病人多有病毒性肝炎背景，病毒性肝炎多存在免疫功能紊亂等狀況，常表現為T淋巴細胞亞群比例失調，容易并發嚴重感染，加重肝功能損害導致病情惡化或死亡[6]。T細胞亞群是評價機體細胞免疫功能的主要指標，在抗腫瘤免疫中發揮重要作用。CD3+T細胞、CD4+T細胞能直接或通過分泌細胞因子殺傷腫瘤細胞，抑制腫瘤生長；而CD8+T細胞包括抑制性T細胞和殺傷性T細胞，具有免疫抑制及殺傷靶細胞作用，不但不能清除腫瘤細胞，反而在腫瘤發生發展過程抑制其他效應細胞的抗腫瘤作用[7-8]。CD3+T細胞、CD4+T細胞數量降低及CD8+T細胞數量升高均提示機體免疫功能處于較低水平。本研究結果顯示：A組病人術后第1天CD3+及CD4+水平均低于B組和C組，CD8+水平高于B組及C組，經重復測量方差分析顯示，CD3+及CD4+水平的組間效應、時間效應及交互效應均有統計學意義(均P<0.05)，但在CD8+水平的重復測量方差分析中，其時間效應及交互效應均有統計學意義(均P<0.05)，而組間效應卻無統計學意義(P>0.05)，這在理論上是難以解釋的，可能與樣本量有關，在未來研究中應進一步增加樣本含量給予證實。因此認為，術中發生低體溫病人其T細胞亞群在術后第1天受抑制程度最大，且體溫下降程度越大，對T細胞介導的免疫抑制影響也越大。中性粒細胞是機體白細胞重要的組成部分，可以釋放多種細胞因子殺傷腫瘤細胞，對腫瘤細胞具有免疫監視作用[9]。低體溫主要通過抑制中性粒細胞的氧化殺傷作用抑制免疫功能。在本研究中中性粒細胞的絕對值重復測量方差分析中均無統計學意義，可能與麻醉藥物、手術創傷及術后積極應用抗生素等原因有關。

3.2 不同程度低體溫對病人細胞因子生成有影響 IL-2是由活化的T細胞產生，通過影響細胞因子有效促進免疫細胞增殖活化，介導免疫應答，參與抗體反應、造血及腫瘤監視，在機體抗腫瘤過程中發揮重要作用[10]。因此，各種原因導致的IL-2水平下降，將降低機體抗腫瘤免疫功能。Steven等[11]研究表明：輕微圍術期低體溫可通過誘導促炎到抗炎過程來減少IL-2生成。在腫瘤病人中，IL-6主要由腫瘤微環境內的炎性細胞及基質細胞產生[12]，能誘導B細胞增殖、分化、產生抗體，調節肝臟急性期蛋白合成，誘導急性期反應[13]。大量研究證實，肝癌病人血清IL-6水平均有顯著升高，為獨立的肝癌危險因素。在一定程度上，IL-6水平可反映肝癌發生發展、惡性程度及預后[14]。手術創傷會引起機體免疫防御功能下降及炎性反應增強，促炎因子IL-6水平增加是炎性反應增強的體現[15]。本研究結果顯示，A組病人術后第1天IL-2，IL-6含量分別與B組及C組比較，差異均有統計學意義(均P<0.05)，重復測量方差分析顯示其組間效應、時間效應及交互效應亦均有統計學意義(均P<0.05)。說明病人術中低溫程度越低，術后IL-2下降水平與IL-6上升水平越明顯。此與代永靜等[16]研究結果相符?？赡芘c機體內部各種酶的活性與溫度依賴性有關，體溫越低，酶的活性越容易受到抑制，從而影響細胞正常生理功能，進一步導致肝癌病人免疫功能低下，致使炎癥反應增強。

3.3 避免術中嚴重體低溫的發生有利于術后免疫功能恢復 低體溫抑制機體免疫功能的機制尚未明確，但有研究表明：圍術期保溫有利于保護病人免疫功能，促進術后康復[8]。大量體外實驗也證明：一定范圍內的溫度升高對T細胞介導的細胞免疫有明顯的促進作用，能加強特異性免疫防御功能[17]。本研究低體溫程度最輕的C組病人免疫抑制程度輕于其余兩組，術后免疫功能恢復較快。提示：肝癌切除術病人若術中發生不可避免的低體溫情況應采取積極保溫措施阻止低體溫發生。

4 小結

肝癌部分切除術病人術后均存在不同程度的免疫抑制，但術中不同程度的低體溫對機體T淋巴細胞亞群及細胞因子可產生不同程度影響，尤其體溫<35.0 ℃時，對機體的免疫功能抑制作用顯著，體溫35.6～35.9 ℃時病人免疫抑制程度較輕，術后免疫功能恢復較快。因此，臨床上應重視術中體溫的有效管理，避免機體嚴重低體溫的發生，以利于病人術后康復。

[1] 彭順平，謝艷麗，劉蔚.不同加溫液體放置在醫用恒溫箱內的實際溫度調查研究[J].護理研究，2016，30(10A)：3572-3573.

[2] Fry DE，Fry RV.Surgical site infection：the host factor[J].Aorn Journal，2007，86(5)：801-814.

[3] Horosz B，Malecmilewska M.Inadvertent intraoperative hypothermia[J].Anaesthesiology Intensive Therapy，2013，45(1)：38-43.

[4] 張百紅，岳紅云.免疫微環境促進腫瘤發生發展的機制研究進展[J].現代腫瘤醫學，2015，23(6)：862-864.

[5] Du Gangjun,Liu Yinghui,Li Jiahuan，etal.Hypothermic microenvironment plays a key role in tumor immune subversion[J].International Immunopharmacology，2013，17(2)：245-253.

[6] 李曉云，于曉輝，王維，等.肝細胞肝癌患者外周血中T細胞亞群和NK細胞的變化[J].肝臟，2016，21(5)：381-383.

[7] Yuan CH，Sun XM，Zhu CL，etal.Amphiregulin activates regulatory T lymphocytes and suppresses CD8+T cell-mediated anti-tumor response in hepatocellular carcinoma cells[J].Oncotarget，2015，6(31)：32138-32153.

[8] 章敏，謝言虎，周玲，等.充氣式保溫毯聯合輸液加溫對全麻食管癌手術蘇醒和免疫功能的影響[J].臨床麻醉學雜志，2016，32(4)：351-353.

[9] 孫楠.中性粒細胞與腫瘤的研究現狀[J].當代醫藥論叢，2014，12(8)：153-155.

[10] 龐婧，鄧志華.IL-2在原發性肝癌中的作用及潛在臨床應用價值[J].國際腫瘤學雜志，2015，42(12)：939-941.

[11] Steven L,Lee MD,Felix D,etal.Hypothermia induces T-cell production of immunosuppressive cytokines[J].Journal of Surgical Research，2001，100(2)：150-153.

[12] Bromberg J，Wang TC.Inflammation and cancer：IL-6 and stat 3 complete the link[J].Cancer Cell，2009，15(2)：79-80.

[13] Metwaly HA，Al-Gayyar MMH，Eletreby S，etal.Relevance of serum levels of interleukin-6 and syndecan-1 in patients with hepatocellular carcinoma[J].Scientia Pharmaceutica，2011，80(1)：179-188.

[14] 郭靈玲，林蘇.血清白細胞介素-6與原發性肝細胞癌[J].國際免疫學雜志，2015，38(5)：496-500.

[15] Russwurm S，Stonāns I，Schwerter K，etal.Direct influence of mild hypothermia on cytokine expression and release in cultures of human peripheral blood mononuclear cells[J].Journal of Interferon and Cytokine Research，2002，22(2)：215-221.

[16] 代永靜，王建榮，張明學，等.溫熱液體對人工關節置換患者術中低體溫及術后免疫應激反應的影響[J].護理管理雜志，2010，10(12)：845-847.

[17] 曾劍鋒.術中低體溫與免疫抑制的麻醉管理[C].南昌：江西省第十四次麻醉學學術年會論文匯編，2013：1.

(本文編輯范秋霞)

Clinical research on influence of varying degrees of hypothermia on immune function of patients during hepatectomy

Chen Sixia,Chen Dongmei,Li Chunlan,etal

(The First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, Guangxi 530021 China)

Objective:To probe into the effect of different degrees of hypothermia on immune function of patients with partial hepatectomy，and provide the basis for temperature care of surgical patients.Methods:A total of 160 cases of liver cancer patients with low temperature partial hepatectomy were divided into group A(T<35.0 ℃ 41 cases),group B(T35.0 ℃～35.5 ℃,85 cases) and group C(T35.6 ℃～35.9 ℃，34 cases).T cell subsets and neutrophil absolute value(NEU) were compared among 3 groups before operation and on 1st day and 5th day after operation.The levels of interleukin-2(IL-2) and interleukin-6(IL-6) were compared before operation and on 1st day and 2nd day after operation.Results:There was statistically significant difference in level of CD3+，CD4+，CD8+,IL-2,IL-6 on the 1st d after operation and level of IL-2 and IL-6 on the 2nd day after operation in three groups(allP<0.05).the level of CD3+and CD4+and IL-2 on 1st day after operation in group A were lower than those in group B and C,the level of CD8+and IL-6 were higher than those in group B and C.There was statistically significant difference in time effect and interaction effect of CD3+，CD4+，CD8+(allP<0.05).There was statistically significant difference in intergroup effect,time effect and interaction effect of IL-2 and IL-6 (allP<0.05).Conclusion:T<35.0 ℃ had a great influence on the immune function of patients,patients with partial hepatectomy for liver cancer,the body temperature should be strengthen to prevent severe hypothermia and promote postoperative recovery.

hepatocellular carcinoma;intraoperative;hypothermia;immune function;T lymphocyte subsets;neutrophils

廣西區域性高發腫瘤早期防治研究重點實驗室資助項目，編號：GK2013-13-A-01-04；廣西壯族自治區衛生廳自籌經費科研課題,編號：Z2013078。

陳似霞，副主任護師，本科，單位：530021，廣西醫科大學第一附屬醫院；陳冬梅、李春蘭、李小娟、楊一蘭、彭濤單位：530021，廣西醫科大學第一附屬醫院。

信息 陳似霞，陳冬梅，李春蘭，等.肝癌切除術中不同程度低體溫對免疫功能影響的臨床研究[J].護理研究，2017，31(20)：2477-2480.

R473.6

A

10.3969/j.issn.1009-6493.2017.20.013

1009-6493(2017)20-2477-04

2016-12-03；

2017-04-18)