GC-MS法分析紅皮云杉針葉揮發油成分①

趙宏博，沈 宇，方洪壯

(1.佳木斯大學康復醫學院，黑龍江 佳木斯 154003；2佳木斯大學藥學院，黑龍江 佳木斯 154007)

GC-MS法分析紅皮云杉針葉揮發油成分①

趙宏博1，沈 宇2，方洪壯2

(1.佳木斯大學康復醫學院，黑龍江 佳木斯 154003；2佳木斯大學藥學院，黑龍江 佳木斯 154007)

目的：初步分析出紅皮云杉針葉揮發油中的化學成分。方法：以水蒸氣蒸餾法提取紅皮云杉針葉揮發油，用GC-MS技術，采用自動解卷積定性系統(AutomatedMassSpectralDeconvolutionandIndentificationSystem,AMDIS)結合色譜保留指數進行定性分析。結果：在紅皮云杉針葉揮發油中共得到74個色譜峰，最終確定了58種化學成分，峰面積總和占總含量的92.58%，其中含量最高的物質為乙酸龍腦酯。結論：用GC-MS方法，結合AMDIS和色譜保留指數能夠高效快捷的分析重疊峰體系，使定性更加準確。

紅皮云杉；GC-MS；水蒸氣蒸餾法；AMDIS；色譜保留指數

紅皮云杉(PiceakoraiensisNakai)為松科云杉屬植物，又名虎尾松，高麗云杉，其耐蔭，喜冷濕環境，抗病力強，主要分布在我國小興安嶺、長白山林區一帶。現已被證實松針揮發油具有重要的藥用價值，能夠發揮鎮痛、抗炎、抗菌、鎮咳、化痰、降血脂和降血壓等作用，同時也是香料、化妝品、食品及化學工業上的重要原料[1～6]。國內有學者研究發現，紅皮云杉揮發油中的化學成分在數量和含量上與其他幾種松科植物存在一定差異[7]，尚未有人將自動質譜解卷積定性系統(AMDIS)結合色譜保留指數對其揮發油樣本總離子流圖的重疊色譜峰進行解析，更加準確的對其化學成分進行定性分析。本研究首次采用GC-MS技術對黑龍江省蘿北產紅皮云杉針葉揮發油樣品進行測定，對比質譜數據庫，應用自動質譜解卷積系統并結合色譜保留指數，對紅皮云杉針葉揮發油成分進行解析，為紅皮云杉的開發和利用提供科學的理論依據。

1 儀器和材料

HP7890A-5975型氣相色譜-質譜聯用儀(美國安捷倫科技有限公司)；標準玻璃揮發油提取器(上海滿賢經貿有限公司)。正己烷(天津市大茂化學試劑廠，分析純)；無水硫酸鈉(上海綠源精細化工廠，色譜純)；正構烷烴混合對照品C8～C40(美國AccuStandard公司，編號：DRH-008S-R2)。紅皮云杉新鮮針葉于2015年8月采于黑龍江省蘿北市，經形態和顯微鑒定為松科、云杉屬植物紅皮云杉(PiceakoraiensisNakai)的針葉。

2 實驗方法

2.1 供試品溶液制備

取陰干粉碎后的紅皮云杉針葉約50g，置1000mL圓底燒瓶中，加入10倍量的蒸餾水及少許沸石，采用水蒸氣蒸餾法提取揮發油，加熱回流6h，分離油層，加適量無水硫酸鈉進行脫水，得淡黃色揮發油，即得。

2.2GC-MS條件

色譜柱為HP-5MS(30m×0.25mm×0.25μm)石英毛細管柱，進樣口溫度280℃，初始柱溫50 ℃，以3 ℃·min-1升至140℃，保持10min，以15℃·min-1升至215℃，以5℃·min-1升至260 ℃，保持2min。載氣為高純氦氣，分流比為40:1，進樣量1μL。EI溫度：230℃，接口溫度280℃，四級桿溫度150℃，掃描范圍30～500aum，溶劑延遲時間為：3.75min。

2.3 化學成分分析

取紅皮云杉針葉揮發油樣品，按照上述實驗條件進樣，獲得樣品的總離子流圖，利用AMDIS解析其中的重疊色譜峰并提取出每個成分的“純凈”質譜圖和相關色譜信息，并將這些信息與目標物譜庫中化合物進行比較，利用質譜工作站通過NIST08質譜庫結合色譜保留指數對各個色譜峰進行結構確定。采用峰面積歸一化法進行定量分析，計算紅皮云杉針葉揮發油中各揮發性成分的相對百分含量。

3 結果與討論

3.1 結果

在設定條件下對紅皮云杉針葉揮發油進行測定，獲得紅皮云杉針葉揮發油總離子流圖見圖1。通過GC-MS色譜工作站積分，采用AMDIS結合保留指數的方法，從供試品樣品中，共得到74個色譜峰，峰面積百分含量大于0.1的有69個化合物，占總含量的99.40%，最終確定了58個化合物見表1。其中，乙酸龍腦酯、龍腦、樟腦等成分的含量較高，分別占26.67%、11.68%和11.10%。所鑒定的化合物中，有40個化合物是采用質譜數據庫進行比對確定；有18個化合物經過AMDIS解析并結合保留指數輔助定性確定。

表1 紅皮云杉針葉揮發油化學成分

＊利用保留指數解析成分；#利用AMDIS辨別重疊峰。

圖1 紅皮云杉針葉揮發油的總離子流圖

3.2 討論

AMDIS軟件能夠高效、快捷的分析重疊峰體系，提取“純凈”的質譜圖，降低了質譜庫檢索的不確定性。同時結合保留指數，對揮發油中同分異構體的區分將更加方便、準確。本研究共確定了供試品中58個化合物，應用AMDIS解析出6個化合物；應用保留指數解析出12個化合物。實踐表明GC-

MS結合自動質譜解卷積定性系統和保留指數輔助定性方法可以提高對重疊色譜峰的辨別和鑒定能力，準確的分析出黑龍江蘿北產紅皮云杉針葉揮發油樣品中的化合物，促進了紅皮云杉的開發與利用。

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佳木斯大學科學技術研究項目，編號：S2014-011。

趙宏博(1986～)男，黑龍江佳木斯人，碩士，主管藥師。

沈宇(1986～)女，黑龍江佳木斯人，碩士，講師。E-mail:shenyu0406@126.com。

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