終末期腎病患者高遷移率族蛋白-1與晚期氧化蛋白產物的研究①

滿中敏，劉艷姝，郭彩霞, 鮑江波

(佳木斯大學附屬第一醫院腎內科，黑龍江 佳木斯 154003)

終末期腎病患者高遷移率族蛋白-1與晚期氧化蛋白產物的研究①

滿中敏，劉艷姝，郭彩霞, 鮑江波

(佳木斯大學附屬第一醫院腎內科，黑龍江 佳木斯 154003)

目的:觀察終末期腎病(ESRD)患者血清高遷移率族蛋白-1 (HMGB-1)、超敏C反應蛋白(hs-CRP)、晚期氧化蛋白產物(AOPP)水平并評價其相關性。方法:選取ESRD患者60例(30例非血液透析和30例MHD治療患者：按透析齡分為長期組、短期組)和30例健康體檢者。酶聯免疫吸附分析法(ELISA)檢測HMGB-l、AOPP，并記錄一般臨床資料。結果:①ESRD非血液透析組、MHD組與對照組相比，HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平均增高，差異有統計學意義(P<0.05)。②MHD組與ESRD非血液透析組相比，HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平均增高，差異有統計學意義(P<0.05)。③MHD長期組與短期組相比，HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平均增高，差異有統計學意義(P<0.05)。④相關性分析，在ESRD組中，血清HMGB-1水平與hs-CRP水平(r=0.762,P<0.01)呈正相關；血清AOPP水平與hs-CRP水平(r=0.843 ,P<0.01)呈正相關。結論：終末期腎病患者體內存在微炎癥及氧化應激狀態，血液透析會加重這種狀態，并且隨著透析齡的增高這種狀態越來越嚴重。

終末期腎病;HMGB-1;hs-CRP;AOPP;血液透析

現代腎臟替代療法使ESRD患者的生活質量顯著提高,存活時間大大延長(可長達20余年)。MHD治療是ESRD患者最常見的替代治療方式之一，長期MHD治療所引起的并發癥十分常見[l]。微炎癥和高氧化應激均與ESRD的許多并發癥及其預后都緊密相關。因此，研究ESRD患者微炎癥及氧化應激水平并積極干預 ,對于延緩ESRD的進展及其并發癥的發生發展極為重要。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015-09～2016-09在佳木斯大學附屬第一醫院腎內科就診的終末期腎病患者60例，其中未行血液透析治療患者30例(男15例，女15例)及MHD治療患者30例(男14例，女16例)。未行血液透析治療患者的原發病為：慢性腎小球腎炎(13例)糖尿病腎病(10例)高血壓腎損害(5例)多囊腎(2例)，MHD治療患者，長期組15例原發病為：慢性腎小球腎炎(7例)糖尿病腎病(6例)高血壓腎損害(2例)；短期組15例原發病為：慢性腎小球腎炎(5例)糖尿病腎病(5例)高血壓腎損害(2例)間質性腎炎(1例)痛風性腎病(1例)病因未明(1例)。終末期腎病的診斷標準按照NKF—K/DOQI標準進行診斷和分期。排除近期發生過明顯感染或傳染性疾病；惡性腫瘤；結締組織疾病者；腎移植者；近期使用激素或免疫抑制劑；不愿參與研究者。正常對照組為30例在佳木斯大學附屬第一醫院健康體檢者。

1.2 方法

1.2.1 血液透析

所有MHD患者均在佳木斯大學附屬第一醫院腎內科血液透析室透析，MHD治療每周3次，MHD時間每次4～4.5h。

1.2.2 一般情況及標本的采集、檢測

記錄研究對象的一般情況：姓名、性別、年齡、體重及MHD患者的透析齡等。研究對象均在體檢時或者入院后次日晨空腹采外周靜脈血,離心后取血清保存待測HMGB-l、hs-CRP、AOPP水平。采用酶聯免疫吸附分析法(ELISA)檢測人高遷移率族蛋白B1 (HMGB-l)、晚期氧化蛋白產物AOPP。生化及血常規指標在佳木斯大學附屬第一醫院檢驗科檢測完成。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 各組一般情況的比較

ESRD未血液透析組，MHD組與正常健康對照組比較，年齡、性別、體重水平，差異無統計學意義(P>0.05)。未血液透析組與MHD組相比，年齡、性別、體重、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、胱抑素C水平，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組間一般請況的比較±s)

2.2 各組間血清HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平的比較

2.2.1MHD組、ESRD組(非血液透析組)與正常對照組相比，HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平均增高，差異具有統計學意義(P<0.05)。MHD組與非血液透析組相比，HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平均增高，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 各組血清HMGB-1、hs- CRP、AOPP水平的比較

注：與正常對照組比較，a1、a2P<0.05；與非血液透析組比較，bP<0.05。

2.2.2MHD組不同透析齡長期組與短期組相比，HMGB-1、hs-CRP、AOPP水平均增高，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 MHD組不同透析齡長期組與短期組HMGB-1、

2.3 各指標相關性的分析

在ESRD組中，血清HMGB-1水平與hs-CRP水平(r=0.762 ,P<0.01)呈正相關；血清AOPP水平與hs-CRP水平(r=0.843 ，P<0.01)呈正相關。

3 討論

目前普遍認為，各種原發及繼發性腎臟疾病本身就存在免疫功能的異常。腎間質纖維化是各種腎臟疾病慢性進展直至終末期的共同病理表現，同時也是所有腎臟疾病慢性發展的最終結果，涉及多種細胞、細胞因子、生長因子、細胞外基質及其相互作用[2]。ESRD是各種慢性腎臟病的終末期，在腎臟功能下降及腎臟自身損害為前提下，機體免疫應答已發生異常。2000年Schoming提出“微炎癥狀態”的概念以來，受到了廣泛關注。有研究表明，ESRD患者在未行MHD治療時，其腎臟病本身就能引起微炎癥狀態，主要因素是腎臟排泄及內分泌功能的衰竭。一些研究同時也表明，MHD治療與這種微炎癥狀態存在相關性，考慮可能與透析膜生物不相容性，透析液的污染，透析血管通路的類型及感染等有關，這些均會加重體內微炎癥反應。

C反應蛋白是一種正相急性反應蛋白，廣泛應用于感染狀態的臨床檢測，隨著檢測技術的高速發展，以高靈敏度著稱的超敏C反應蛋白(highsensitiveC-reactiveprotein，hs-CRP)出現，是公認的反映ESRD微炎癥狀態的最佳指標。Oetega等[3]研究結果表明慢性腎衰竭患者在行透析治療前血清CRP水平就已經升高，Yeun等[4]通過對MHD患者血清CRP的檢測，結果顯示其中30%高于正常。本試驗通過對MHD以及ESRD未性血液透析患者血清hs-CRP檢測同時于正常對照組對比，分別為(10.48±2.78)mg/L、(5.56±1.01)mg/L、(2.02±0.20)mg/L，與上訴試驗結果相符。本實驗還創新性的分析了長期透析組與短期透析組的hs-CRP分別為(12.90±1.65、8.07±0.89)mg/L，證實隨著透析齡的增加，微炎癥狀態逐漸加重。

高遷移率族蛋白-1(HMGB-1)廣泛存在于真核生物體細胞核和細胞質，可作為轉錄和生長因子的DNA結合蛋白，分子量為30kDa。近年來被作為組織損傷的促炎癥介質，HMGB-1可由固有免疫細胞如巨噬細胞和單核細胞主動分泌，當受到內毒素刺激時，HMGB-1可有受損及壞死的細胞被動釋放，去激活和誘導炎癥反應。2008年Bruchfeld[5]對未開始行血液透析的慢性腎臟病患者血清HMGB-1的檢測，并且與正常對照組相比,HMGB-1水平顯著升高，并且和hs-CRP呈顯著相關。本研究通過對ESRD患者包括(非血液透析和MHD)與正常健康對照組血清HMGB-1的對比，證明ESRD患者體內存在微炎癥反應，血液透析加重這種微炎癥狀態，隨著透析齡的增高更加明顯。與hs-CRP進行相關性的分析，兩者成顯著相關，同樣與上訴實驗結果相符，再次證明了HMGB-1可以作為評價MHD患者微炎癥狀態的新指標。

ESRD患者體內大量代謝產物的蓄積，導致內環境失衡，從而影響了氧自由基的清除。國內外研究表明，由于血液透析過程中多種因素的影響，MHD患者較未行血液透析治療的ESRD患者氧化應激狀態更為顯著。AOPP是 1996年Witko-Sarsat等[6]在慢性腎衰竭患者體內發現的蛋白質過氧化產物，隨后作為新型的尿毒癥毒素及評價氧化應激的可靠指標，受到廣泛關注。ESRD患者體內AOPP水平顯著升高，伴隨腎功能的減退，慢性腎臟病患者體內AOPP的潴留更加明顯，ESRD患者體內AOPP水平較正常人增加2倍[7]。1998年Witko-Sarsat[8]等的研究結果顯示,MHD患者血清AOPP顯著升高。國內研究同樣發現透析治療會升高ESRD血清AOPP的水平，相對于接受腹膜透析治療，MHD患者體內AOPP水平升高更為顯著。本實驗結果顯示，MHD患者、ESRD未行血液透析患者血清AOPP分別為(85.40±11.72、44.12±6.16)umol/L高于正常對照組(21.19±3.14)umol/L，和上訴實驗結論相符合。隨著透析齡的增加，AOPP的水平是增高的，MHD加重了氧化應激狀態。同時通過對其與hs-CRP相關性分析，得出兩者呈正相關,推測AOPP可能參與了炎癥反應的進程。

綜上所述，ESRD患者無論未行血液透析治療還是已接受MHD治療，HMGB-1、hs-CRP、AOPP均高于健康對照組，MHD會加重ESRD患者體內的微炎癥和氧化應激狀態，并且隨著透析齡的延長這種狀態越來越嚴重。因此，積極控制ESRD患者體內的微炎癥及高氧化應激的狀態可能為減輕及減少其并發癥提供一個重要途徑。而HMGB-1、AOPP作為重要的炎癥及氧化應激因子為這種可能提供了新的治療靶點。

[l]仇曉霜,蔡天蕊,趙春艷,等.維持性血液透析病人營養管理前后的比較[J]．黑龍江醫藥科學，2013，36( 3) : 88-89

[2]劉艷姝，劉中柱，史為伍，等．活性維生素D3對UUO模型大鼠腎間質骨形成蛋白 -7 表達的影響[J]． 黑龍江醫藥科學，2016，39(5):21-23

[3]OetegaO,RodriguezI,GallarP,etal.SignificanceofhighCreactiveproteinlevelsinpro-dialysispatients[J].NephrolDialTransplant, 2002, 17(6):1105-1109

[4]YeunJY,LevineRA,MantadilokN,etal.C-reactiveproteinpredictsallcauseandcardiovascularmortalityinhemodialysispatients[J].AmJKidneyDis, 2000, 35(3):469-476

[5]BruchfeldA,QureshiAR,LindholmB,etal.HighmobilitygroupBoxProtein-1correlateswithrenalfunctioninchronickidneydisease(CKD)[J].MolecularMedicine, 2008,14(3-4):109

[6]Witko-SarsatV,FriedlanderM,Capeillère-BlandinC,etal.Advancedoxidationproteinproductsasanovelmarkerofoxidativestressinuremia[J].KidneyInt, 1996, 49(5):1304-1313

[7]楊小兵，侯凡凡，武強，等．慢性腎臟病患者晚期氧化蛋白產物血癥及其與動脈粥樣硬化的關系[J]．中華內科雜志，2005，44(5)：342-346

[8]Witko-SarsatV,FriedlanderM,Guyen-KkotN,etal.Advancedoxidationproteinproductsasanovelmediatorofinflammationandmonocyteactivationinchronicrenalfailure[J].JIrnrnunal, 1998, 161(5):2524-2532

A study of high mobility group box - 1 protein and advanced oxidized protein products in end-stage renal disease

MANZhong-min,LIUYan-shu,GUOCai-xia,BAOjiang-bo

(Department of Nephrology，the First Affiliated Hospital of Jiamusi University，Jiamusi 154003，China)

Objective: To observe the level of HMGB-1，hs-CRP and AOPP in patients with end-stage renal disease, and to analyze their relevance. Methods: Sixty patients with end-stage renal disease were enrolled (including 30 non-hemodialysis patients and 30 maintenance hemodialysis patients. MHD group was divided into long-term and short-term groups according to dialysis ages. )and 30 cases accepted healthy physical examination. Serum HMGB-1 and AOPP were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).And the general clinical data of patients were recorded. Result:①The levels of HMGB-1, hs-CRP and AOPP in the ESRD group (non-hemodialysis group and hemodialysis group) were higher than those in the normal control group，and the difference was statistically significant (P<0.05).②MHDandESRDgrousp(non-hemodialysisgroup)werecompared,andHMGB-1,hs-CRP,AOPPlevelswereincreased;andthedifferencewasstatisticallysignificant(P<0.05). ③Comparedthelong-termandshort-termgroup,HMGB-1,hs-CRP,AOPPlevelsinhemodialysisgroupwereincreased,andthedifferencewasstatisticallysignificant(P<0.05). ④ThecorrelationAnalysisinESRDgroup,serumHMGB-1levelsandandhs-CRPlevels(r=0.762,P<0.01)werepositivelycorrelated;andserumAOPPlevelsandhs-CRPlevels(r=0.843,P<0.01)werepositivelycorrelated. Conclusion: The presence of a high end-stage in micro-inflammation and oxidative stress in patients with renal failure, hemodialysis could aggravate this state, and this state could get worse with the extension of the duration of dialysis.

ESRD；HMGB-1；hs-CRP；AOPP；hemodialysis

佳木斯大學研究生科技創新項目，編號：YM2016-049。

滿中敏(1988～) 女，山東滕州人，在讀碩士研究生。

劉艷姝(1971～) 女，黑龍江佳木斯人，碩士，副主任醫師，碩士研究生導師。E-mail：liuyanshu1015@sina.com。

R

B

1008-0104(2017)03-0050-03

2017-03-02)