超高效液相色譜質譜聯用法測定蔬菜中多殺霉素等4種農藥殘留研究

新的時代中，多種因素對植物產生了重要的影響，主要包括氣候、種植制度和生態環境等，植物的病蟲害發生的次數不斷增多，其危害的程度不斷加深，對于農業生產安全構成了嚴重的威脅。尤其是，在設施農業不斷發展的過程中，很多的新型的設施病蟲害不斷發生。目前，對于人們來說，食品安全是非常重要的一個問題，高效低毒低殘留農藥的推廣必定成為新的趨勢。

實驗部分

試劑與材料。標準品：多殺霉素、氟硅唑、茚蟲威（純度>99.0%）。

試劑：氯化鈉，甲醇、乙腈、甲酸，Milli-Q高純水，十八烷基鍵合硅膠吸附劑，N-丙基乙二胺吸附劑，石墨化炭黑吸附劑，無水硫酸鎂，石墨碳黑-氨基串聯固相萃取柱，氨基固相萃取柱，十八烷基鍵合硅膠固相萃取柱，弗羅里硅土固相萃取柱。

儀器。Agilent1290 UPLC-Agilent 6460 MS超高效液相色譜-三重四級桿串聯質譜聯用儀：配ESI源；T25DS25高速勻漿分散器；GB11240-89電熱恒溫水浴鍋；AC-40氮吹濃縮器；國華SHAC恒溫振蕩器；TDL-5-A離心機；Milli-Q制水機。

樣品前處理。對樣品進行定量選取，所選取的樣品的數量不能少于1000g，完成其中的雜質的去除工作，從中選取能夠食用的部分，將樣品進行相應的濃縮，使其濃縮至500g，經制樣機處理之后密封，使其在4℃冷藏保存。

（1）樣品提取。蔬菜樣品：對樣品進行稱取，基本的重量是10g，將其加入到100mL的離心管中，并且將20mL 的乙腈加入其中，高速勻漿1min，以5000r/min離心5min，上清液轉移至加入3-5g NaCl的50mL離心管中，劇烈振搖1分鐘，室溫下靜置1小時。

（2）樣品凈化。空心菜、芹菜、豇豆、黃瓜樣品：移取上清液5mL到50mL小燒杯中，在50℃水浴溫度下氮吹至大約1mL。在進行上樣之前，首先需要用5mL乙腈-甲苯預淋PC/NH2串聯柱，棄去；當液面到達填料頂部的時候，需要在最短的時間中將樣品濃縮液轉移到凈化柱上，然后再用5mL乙腈-甲苯洗滌樣液燒杯，同時，將洗滌液轉移到凈化柱中，重復4次洗滌轉移，收集上述25mL洗脫液于100mL燒杯中，50℃水浴溫度下氮吹至干。加入2.5mL乙腈混勻定容，經0.22?g微孔有機濾膜過濾后，供超高效液相色譜=質譜測定。

結果與討論

凈化條件的優化。蔬菜樣品基質中含有較多的有機酸、維生素以及脂肪等，這些物質帶來的基質效應將會嚴重影響檢測結果的準確性。為降低或消除基質效應，選擇合適的樣品前處理方法至關重要。本研究對固相萃取（SPE） 與基質固相分散萃取法兩種凈化技術進行了比較。

采用 SPE 柱進行凈化時，選擇了 NH2，Florisil，C18，PC /NH2 4 種固相萃柱，并選擇不同的淋洗液進行洗脫。NH2- SPE： 二氯甲烷 + 甲醇（ 95 + 5 ） 4 mL 預淋，10 mL 洗脫； Florisil-SPE： 丙酮 + 正己烷（ 10 + 90） 4 mL淋，10 mL 洗脫； C18- SPE： 乙腈 + 甲苯（ 3 + 1） 5 mL 預淋，10 mL 洗脫； PC /NH2- SPE： 乙腈 + 甲苯（ 3 + 1） 5 mL預淋，10 mL 洗脫，收集第 1 瓶（ 墨化碳易吸附農藥，所以洗脫液又增加 15 mL，收集第 2 瓶） ； 分別收集洗脫液，吹干，定容，待測。

采用基質固相分散萃取（ 類似 Qu ECh ERS） 凈化法時，選擇 3 種不同的凈化填料進行篩選： Qu E1（ 0.1g PSA-0. 3 g MgSO4） ； Qu E2（ 0.1g PSA-0.3g MgSO4-0.05 g Carb） ； Qu E3（ 0.3g MgSO4-0.1g C18- 0.1g PSA） 。

其他步驟參照文獻。

以基質較復雜、色素較深的空心菜為例，添加 100μg /kg 的混標至空心菜空白樣品中，重復測定 3次，以純標計算得到的回收率結果。

通過以上方法的比較，并綜合去除色素效果和回收率結果，發現淋洗液 10+15 mL既能保證方法回收率，又能除去色素等雜質，有利于保護色譜柱、離子源等，延長色譜柱、儀器的壽命。超高效液相色譜-質譜聯用法測定蔬菜中多殺霉素等 4 種農藥殘留，根據上述試驗，發現淋洗液用乙腈-甲苯混合溶劑，空心菜樣品中 5 種化合物的回收率和雜質的去除效果最佳。

對此種方法進行有效的應用。對市售多種蔬菜共100個樣品進行隨機抽檢。在空心菜、芹菜等12個樣品中檢出茚蟲威，茼蒿、莧菜和芹菜三個樣品中檢出噻蟲嗪，莧菜等2個樣品中檢出氟硅唑。對國標等對噻蟲嗪等4種農藥在相應蔬菜上最大的殘留限量值進行查詢和參照，在本次抽檢的100個蔬菜樣品中，有2個莧菜樣品超標，需要對其進行嚴格、謹慎的應用。

作者簡介：

鄒敏（1983-），女，江西南昌人，江西省食品檢驗檢測研究院工程師，主要從事食品檢驗檢測技術工作。