中藥產后康防治奶牛產后癱對免疫機能的影響

弓素梅，郭紅斌

(1.河北農業大學科教興農中心，河北保定071001 ； 2.河北農業大學動物醫學院，河北保定071000)

中藥產后康防治奶牛產后癱對免疫機能的影響

弓素梅1，郭紅斌2

(1.河北農業大學科教興農中心，河北保定071001 ； 2.河北農業大學動物醫學院，河北保定071000)

為了研究“產后康”防治奶牛產后癱對免疫機能的影響，選擇了平均胎次為3，預產期為產前5 d的中國荷斯坦奶牛20頭，分為健康組，病理組，治療組和預防組4組，用試劑盒測定了血清中 IgM，IgA，IgG，IL-1β和TNF-α含量變化。結果表明,應用“產后康 ”防治奶牛產后癱，奶牛血清中IgA和IgG濃度逐漸升高，IgM濃度變化不明顯，可顯著降低血清中 IL-1β 和 TNF-α 水平。結論：“產后康 ”用于防治奶牛產后癱具有提高血清IgA和IgG濃度，下調血清 IL-1β 和 TNF-α 的作用，在產后癱反應過程中發揮著重要免疫調節作用。

中藥 ； 產后康 ； 奶牛 ； 產后癱 ； 免疫機能

產后癱是奶牛養殖中的常見病，其病因較多而復雜，主要由于母牛妊娠期間或分娩前后飼養管理不當，營養不全而導致，患產后癱的奶牛可使生產年限縮短四年左右，如得不到及時有效的治療，將導致機體多種功能減弱，生命活動嚴重障礙，甚至死亡，給養殖者造成極大損失[1-3]。奶牛分娩后，機體從妊娠和分娩應激中逐漸轉入高產應激狀態，卵巢上既無黃體又無卵泡，免疫系統暫時失去了性腺激素的調節，加上乳房開始泌乳，機體丟失大量免疫細胞和免疫球蛋白，可見，產后奶牛其天然的和獲得性的防御能力都被削弱[4]。在生產實踐中，通過辨證，應用相應中藥方劑治療奶牛產后癱，能夠發揮明顯的治療效果。本試驗是在臨床應用療效確切的基礎上，通過“產后康”防治奶牛產后癱，探討其對免疫機能的影響，為中藥防治奶牛產后癱探明機理。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 選擇河北省沽源縣九連城盛豐牧業有限責任公司，平均胎次為3，預產期為產前5 d的中國荷斯坦奶牛20頭。

1.2 藥品及試劑 “產后康 ”(益母生化散)，購自河北商宇有限責任公司 ，批號:獸藥字(2011)0305951480。

免疫球蛋白M (IgM)，免疫球蛋白A(IgA)，免疫球蛋白G(IgG)，白細胞介素1β(IL-1β)ELISA，腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒，均為南京森貝伽生物科技有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 分組 分為4組，每組5頭。

健康組：產前5 d，機能狀態、生產性能良好，無任何臨床癥狀。

病理組：有患病臨床癥狀(反芻停止，食欲減退，體溫正常或略有升高，后肢僵硬，站著時頻繁倒腿，走路步態不穩，有的患牛兩后肢向后移位而呈現出犬坐姿勢)。

治療組：產前5 d，有患病臨床癥狀，治療時間為產前1 d，產前2 d，產后1～7 d，每天早晚各灌藥1次，每次2袋，每袋350 g。

預防組：無臨床癥狀，預防用藥時間為產前1 d，產前2 d，產后1～7 d，每天早晚各灌藥1次，每次1袋。

1.3.2 血清的采集 按組分別于產前1天，產后第1天，第3天，第5天和第7天早晨空腹頸靜脈采血10 mL，室溫下靜置，自然析出血清，于離心機3 000 r/min離心10 min，分離血清標號后，-20 ℃冰箱冷凍保存。1.3.3 項目的測定及方法 酶聯免疫測定法(ELISA)試劑盒檢測血清中 IgM，IgA，IgG，IL-1β和TNF-α。

1.4 數據處理

采用 Excel 2003 進行數據統計，應用SAS-V8 軟件進行方差分析 。

2 結果與分析

2.1 血清IgM 含量 見表1。由表1可見，血清中IgM含量，病理組在各天與健康組和預防組比較，差異顯著(P<0.05)，與治療組比較，在產前1 d和產后第1、3、5天，差異不顯著(P>0.05)，在產后第7天，差異顯著(P<0.05)；預防組和健康組之間比較差異不顯著(P>0.05)。可見，“產后康”防治奶牛產后癱對IgM含量影響不太明顯。

2.2 血清IgA的含量 見表2。由表2可見，血清中IgA含量，病理組產前和產后均低于健康組和預防組，且在各天中與健康組和預防組比較，差異極顯著(P<0.01)；治療組與健康組比較，在產前1天，產后第1天差異極顯著(P<0.01)，在產后第3、5、7天，差異不顯著(P>0.05)，與預防組比較，在第1天差異極顯著(P<0.01)，在產后第3、5、7天，差異顯著(P<0.05)；預防組與健康組比較，在產前1天，產后第1天差異不顯著(P>0.05)，在產后第3、5、7天，差異顯著(P<0.05)。可見，中藥“產后康”預防和治療奶牛產后癱，可以升高血清中的IgA，發揮防治效果。

表1 血清IgM含量 (mg/mL)

注：同列數據肩標大小寫字母均不相同表示差異極顯著(P<0.01)，大寫字母相同小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)，字母完全相同表示差異不顯著(P>0.05)，下表同

表2 血清IgA含量 (μg/mL)

表3 血清IgG含量 (mg/mL)

2.3 血清IgG測定結果 見表3。由表3可見，血清中IgG含量，病理組產前和產后均低于健康組和預防組，且在各天中與健康組和預防組比較，差異極顯著(P<0.01)；預防組與健康組比較，在產前1 d，產后第1、3天差異不顯著(P>0.05)，在產后第5,7天，差異顯著(P<0.05)；治療組與健康組比較，在產前1 d，產后第1、3天差異極顯著(P<0.01)，在產后第5、7天，差異不顯著(P>0.05)，與預防組比較，在產前第1天和產后第1、3天，差異極顯著(P<0.01)，在產后第5、7天，差異顯著(P<0.05)。可見,“產后康”治療產后癱奶牛從產后第5天開始可以升高血清中IgG含量，并且應用“產后康”預防產后癱奶牛，血清中IgG含量高于健康組，說明 “產后康”防治奶牛產后癱能夠升高IgG，增加機體的免疫力。

2.4 血清IL-1β含量 見表4。由表4可見，血清中IL-1β含量，病理組在各天與健康組、預防組比較，差異極顯著(P<0.01)；預防組與健康組比較，各天均差異不顯著(P>0.05)，與治療組比較，在產前1 d，產后第1、3天，差異極顯著(P<0.01)，在產后第5、7天，差異不顯著(P>0.05))；治療組與病理組比較，在產前1天，差異不顯著(P>0.05)，在產后第1、3天，差異顯著(P<0.05)，在產后第5、7天，差異極顯著(P<0.01)。

表4 血清IL-1β含量 (ng/L)

表5 血清TNF-α含量 (ng/L)

2.5 血清TNF-α含量 見表5。由表5可見，血清中TNF-α含量，病理組比健康組和預防組均高，且差異極顯著(P<0.01)；預防組和健康組比較，在各天差異均不顯著(P>0.05)，與治療組比較，在產前1 d，產后第1、3天，差異極顯著(P<0.01)，在產后第5、7天，差異不顯著(P>0.05))；治療組與病理組比較，在產前1 d，差異不顯著(P>0.05)，在產后第1、3天，差異顯著(P<0.05)，在產后第5、7天，差異極顯著(P<0.01)。

3 討論

“產后康 ”(益母生化散)由益母草、當歸、 川芎、桃仁、炮干姜、炙甘草組成，主治奶牛產生惡露不行，血瘀腹痛，胎衣滯留，產后癱瘓[5]。據現代臨床及動物試驗證明，方中益母草含有多種微量元素，硒具有增強免疫細胞活力及提高機體防御疾病功能體系之作用；當歸中的當歸多糖對單核-巨噬細胞系統有明顯的刺激作用，對免疫功能低下的機體也有免疫調節和恢復作用。白術有影響非特異性免疫功能，增強巨噬細胞活力的作用，影響特異性免疫功能，促進細胞免疫功能，增強體液免疫的功能，能使血清IgG含量顯著上升[6]。

IgM在體內產生時間早，持續時間短，參與了機體免疫的第一道防御過程。IgA 其分子上含有多個抗原結合部位，是一種高效能的抗體，在免疫調節方面也起到重要作用。IgG 不僅是動物血清中含量最豐富的免疫球蛋白，而且持續時間長，是動物機體抗感染免疫和血清學診斷的主要抗體[7]。試驗中，應用“產后康 ”防治產后癱，奶牛血清中IgA和IgG濃度逐漸升高，且極顯著高于患病奶牛組，說明“產后康 ”用于防治奶牛產后癱可以提高血清中IgA和IgG濃度，提高機體的免疫力；“產后康 ”用于防治奶牛產后癱血清中IgM濃度變化不明顯，可能是由于IgM 在體內持續時間短，其機理尚待進一步研究。

細胞因子是免疫細胞分泌的一類具有調節活性的低分子量蛋白物質的統稱，其主要功能是介導免疫細胞間的相互作用。IL-1β 和 TNF-α 屬于前炎癥細胞因子，它們參與許多炎癥等相關的免疫過程中[8]。本研究中“產后康”防治奶牛產后癱可以顯著降低血清中 IL-1β 和 TNF-α 水平，說明“產后康 ”具有下調患有產后癱奶牛血清 IL-1β 和 TNF-α 的作用，在產后癱反應過程中發揮著重要免疫調節作用。

綜上，應用中藥“產后康 ”防治奶牛產后癱，能夠提高機體中的IgA和IgG濃度，從而提高機體的免疫力，能夠降低血清中 IL-1β 和 TNF-α 水平，減少骨質吸收和骨質破壞作用，調節機體的免疫功能，發揮良好的防治效果。

[1] 王素萍．奶牛產后癱病因分析及預防措施[J]．中國畜牧獸醫文摘，2014,30(12):83.

[2] 張海芹.奶牛產后癱瘓的綜合防治[J].中國畜禽種業，2015,11(12):108-110.

[3] 牛長營,楊祎,張玉琴.淺談奶牛產后癱的防治[J]．河南畜牧獸醫,2001,22(1):28.

[4] 黃群山，戴承勝，劉宇．八珍湯對乳牛產后免疫狀態的影響[J].中國獸醫科技,2005，35(11):912-916．

[5] 黃修奇. 中西醫結合治療牛產后癱瘓[J].中獸醫學雜志,2003(1):6-7.

[6] 張玉軍.益母生化散對奶牛產后疾病的治療[J].獸醫導刊，2003,4:71.

[7] 王連江,陳燕軍,魏永剛,等.圍產期奶牛免疫力的動態變化[J].中國乳業,2006(11):38-40.

[8] 呂建存,劉榮欣.四君子散與益母生化散對圍產期奶牛血漿IL-2、IFN-γ和TNF-α的影響[J]. 中國獸醫雜志,2011,47(6):45-46.

2016-07-07

弓素梅(1972-)，女，副教授，碩士，從事中獸醫學科研與教學工作，E-mail：hbndgsmgsm@126.com

S815.2

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0529-6005(2017)04-0059-03