Luminal型乳腺癌中TBX3表達及其與P53、PS2表達的相關性

黃 燕 吳克瑾 姜 峰 楊 英 倪國英 丁 罡

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Luminal型乳腺癌中TBX3表達及其與P53、PS2表達的相關性

黃 燕 吳克瑾 姜 峰 楊 英 倪國英 丁 罡

目的 研究TBX3在Luminal型乳腺癌中表達的情況及其與P53、PS2表達的相關性，探討TBX3表達在Luminal型乳腺癌中的臨床意義。方法 采用免疫組化的方法,檢測Luminal型乳腺癌組織標本中TBX3的表達，并分析TBX3的表達與乳腺癌相關的臨床病理參數的關系。結果 ①TBX3在luminal型乳腺癌組織中的陽性率為82.19%；②TBX3表達與luminal型乳腺癌的年齡及有無絕經無關(P>0.05)，與乳腺癌腫塊大小、淋巴結轉移及分期有關(P<0.05)；③TBX3在luminal型乳腺癌中的表達與P53表達呈正相關關系(γ=0.36283，P<0.05)，與PS2表達無明顯相關性(γ=-0.1761，P>0.05)。結論 TBX3與luminal型乳腺癌的發生發展及侵襲過程有關，且與P53表達呈正相關關系。

乳腺癌；TBX3；P53；PS2

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:367～369)

乳腺癌是最常見的女性惡性腫瘤，嚴重威脅婦女的身心健康[1]，目前臨床上常用的乳腺癌分子分型是根據乳腺癌組織表達ER、PR、Her-2、Ki-67的情況，對乳腺癌進行分子分型，其中luminal型乳腺癌(包括luminal A型luminal B型)最為常見，大約占乳腺癌48～58%[2-3]。作者先前的研究[4]發現TBX3在luminal型乳腺癌中高表達，提示TBX3與luminal 型乳腺癌關系密切，它有可能是luminal型乳腺癌預后因子之一。本文通過進一步研究luminal 型乳腺癌組織中TBX3的表達，并分析它與臨床病理參數的關系及與P53、PS2表達的相關性。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集2011年1月至2013年12月在上海交通大學醫學院附屬新華醫院崇明分院施行手術切除的luminal型乳腺癌73例，要求病史資料完整，術前未行放化療或靶向治療，病理標本保存完好。73例患者均為女性，患者年齡39～93歲，平均年齡62.86歲，≤65歲42例，>65歲31例；月經情況：絕經56例，未絕經17例；腫塊大小：腫塊≤2 cm 34例，腫塊>2 cm 39例；有淋巴結轉移42例，無淋巴結轉移31例；分期：Ⅰ期25例，Ⅱ期32例，Ⅲ期16例；免疫組化結果：P53(+)34例，P53(-)39例；PS2(+)52例，PS2(-)21例；luminal A型40例、luminal B型33例。

1.2 主要試劑

人TBX3多克隆抗體：abcam公司生產，英國。

1.3 實驗方法

腫瘤標本均經過10%甲醛固定、石蠟包埋、并切片備用。免疫組化二步法染色嚴格按照試劑說明書操作步驟進行，采用高壓修復法抗原修復，陰性對照組：PBS磷酸緩沖液代替一抗作為陰性對照。

1.4 陽性結果判斷

免疫組化結果的評判標準參考許良中[5]的免疫組化評價標準，具體判別標準為：光鏡下隨機觀察4～5個不重疊的高倍(×200)視野，計數100～200個細胞，細胞染色陽性表達為境界清晰,突出于背景的棕黃色或棕褐色顆粒，根據陽性細胞數和著色強度進行半定量分析。陽性細胞數：無陽性細胞，計0分;陽性細胞數占1%～30%，計1分;陽性細胞數占31%～70%，計2分；陽性細胞數占71%～100%，計3分；著色強度：不著色為0分；淺棕色為1分；棕黃色為2分；棕揭色為3分。兩項分數之和累計：0分為陰性(-)，1、2分為弱陽性(+)，3、4分為陽性(++)，5、6分為強陽性(+++)。結果分為陰性(0分)及陽性(+～+++)兩組進行分析。

1.5 乳腺癌分子分型標準

分子分型標準為2013年第十三屆St.Gallen國際乳腺癌會議專家共識[6-7]，即:①luminal A型：免疫組織化檢測結果為ER陽性和(或)PR陽性，Her-2陰性，Ki-67<20%；②luminal B型：ER陽性或PR陽性，Her-2 陽性；或ER陽性和(或)PR陽性，Her-2陰性，Ki-67≥20%；③Her-2型：ER、PR陰性，Her-2陽性，Ki-67多為高表達；④Basical-like型：ER(-)和PR(-)/HER-2(-)。本組研究對象73例均為luminal型乳腺癌，其中luminal A型40例、luminal B型33例。

1.6 統計學方法

乳腺癌組織在不同的臨床病理因素(年齡、月經、腫塊大小、有無淋巴結轉移、分期)下TBX3表達率的差異均采用χ2檢驗，如出現個別因樣本數較少，不符合χ2檢驗條件，則采用確切概率分析法，相關性檢驗采用Spearman相關分析(χ2檢驗、確切概率分析法、Spearman相關分析均運用SAS 8.02軟件包對數據進行處理)，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 Luminal型乳腺癌中TBX3表達與其臨床病理參數的關系

TBX3表達主要定位于細胞核，陽性表達為境界清晰、突出于背景的黃色或棕黃色。73例luminal型乳腺癌組織中，TBX3表達陽性率為82.19%(60/73)；其與乳腺癌臨床病理參數的關系見表1。

表1 TBX3表達與luminal型乳腺癌臨床病理參數的關系/例

2.2 Luminal型乳腺癌組織中TBX3表達與P53、PS2、Her-2、Ki-67蛋白表達的相關性

Luminal型乳腺癌組織中，TBX3表達陽性率為82.19%，P53陽性表達率為46.58%(34/73)，兩者呈正相關關系(γ=0.36283，P=0.0016<0.05)；PS2陽性表達率為71.23%(52/73)，兩者無明顯相關性(γ=-0.1761，P=0.2457>0.05)，見表2。

表2 Luminal型乳腺癌組織中TBX3表達與P53、PS2蛋白表達的相關性/例

3 討論

3.1 TBX3與luminal型乳腺癌

乳腺癌是1個多基因突變驅動的疾病，TBX3基因是乳腺癌相關的癌基因之一[8]。TBX基因家族也稱T-box，它具有高度保守的DNA結合區-T區，T區具有回文結構的雙鏈DNA的兩個位點，其中的一個位點與靶基因的啟動子特點序列相結合形成半位結合體，并通過與不同的轉錄因子結合發揮不同的作用[9]。TBX3不但與生長發育有關，它與多種腫瘤的發生發展中關系密切，國內學者[10]研究發現TBX3基因在癌組織中的表達高于癌旁組織，作者單位先前研究提示TBX3在乳腺癌中的表達明顯高于良性腫瘤和癌旁組織，中晚期乳腺癌表達明顯高于早期乳腺癌，研究發現TBX3在乳腺癌在luminal A型、luminal B型乳腺癌中高表達，提示結果提示TBX3基因與乳腺癌的發生發展及預后因素有關，而且它與luminal A型、luminal B型乳腺癌的關系密切，可能是luminal型乳腺癌預后因子之一[4]。本研究結果顯示TBX3在luminal型乳腺癌組織中表達的陽性率為82.19%，TBX3的表達與患者的年齡及有無絕經無關，與乳腺癌腫塊的大小、淋巴結轉移及分期有關，它在腫塊大于2 cm、有淋巴結轉移、Ⅱ、Ⅲ期luminal型乳腺癌中呈高表達。這提示TBX3在luminal型乳腺癌的發生進展及侵襲過程中發揮了作用。

3.2 TBX3與P53

P53是1種促進凋亡的細胞因子，即野生型P53，在正常的情況下，它在細胞內的表達維持低水平，主要作用于受損的細胞，延緩細胞周期停滯在G1/S節點上以修復損傷DNA，而當DNA損傷超過細胞的修復能力時，就誘導細胞發生凋亡[11]。野生型P53是人體細胞內最有效的腫瘤抑制因子之一，但也是最容易發生突變的蛋白之一，突變型P53一方面喪失了野生型P53的抑癌活性，另一方面能產生獲得性功能，反而促進癌癥的發生與發展[12]。也就是說，突變型P53由原來的抑癌基因變成了癌基因，從而促進正常細胞的轉化或加速已經轉化的細胞進一步惡化[13]。研究表明，在乳腺癌、直腸癌、胃癌、子宮內膜癌等多種惡性腫瘤中均發現了突變型P53基因的高表達[14-17]。本研究結果顯示，P53在luminal型乳腺癌組織中的陽性表達率為46.58%，并且與TBX3的表達呈正相關關系，提示luminal型乳腺癌組織中TBX3表達上調可能與突變型P53基因的表達上調有關。

3.3 TBX3與PS2

PS2是雌激素誘導蛋白之一，由Masialowski于1982 年從激素依賴性乳腺癌MCF-7細胞株中提取出來的，在乳腺癌中陽性表達率約為43%～58%，它是一種雌性激素調節的基因產物，其表達反映ER功能，研究表明，PS2在反映腫瘤惡性程度上有重要價值，其陽性率越高，則腫瘤的惡性程度越低，患者預后越好[18]。本研究發現PS2在luminal型乳腺癌中的陽性表達率為71.23%，高于陳守菊等[19]報道的PS2在乳腺癌中陽性表達率45.6%，這考慮與本研究的對象為luminal型乳腺癌有關，luminal型乳腺癌ER為陽性，這正好了說明PS2是反映ER功能的指標。在TBX3與PS2在luminal型乳腺癌組織中表達的相關性分析方面，沒有發現兩者有相關性關系。

綜上所述，TBX3在luminal型乳腺癌中的表達患者的年齡及是否絕經無關；與乳腺癌腫塊的大小、淋巴結轉移及分期有關，它在腫塊大于2 cm、有淋巴結轉移、Ⅱ、Ⅲ期luminal型乳腺癌中呈高表達。這提示TBX3可能與乳腺癌的發生進展及侵襲過程有關；在luminal型乳腺癌中，TBX3與P53 蛋白表達呈正相關關系，提示TBX3與P53在luminal型乳腺癌的進展中可能具有協同作用；TBX3與Her-2及PS2無明顯的相關性關系。

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(編輯：吳小紅)

Expression of TBX3 and the Correlations with P53、PS2 in Luminal Breast Cancer

HUANG Yan,WU Kejin，JIANG Feng，et al.

Chongming branch of Xinhua Hospital Affiliated to Shanghai Jiaotong University School of Medicine,Shanghai,202150

Objective To study the expression of TBX3 and its clinical significance in luminal breast cancer.Methods Luminal breast cancer tissues were detected by immunohistochemistry for TBX3,and analyzed the relation between the expression of TBX3 and the clinical pathologic parameters.Results ①The positive rate of TBX3 express in the luminal breast cancer was 82.19%;②The expression of TBX3 was not correlated with the age of patient and menopause or not(P>0.05),but was correlated with the size of mass in the breast,the cancer lymph node metastasis and the clinical stage of breast cancer (P<0.05).③The expression of TBX3 was positively correlated with the expression of P53(γ=0.36283，P<0.05);There were no correlations between the expression of TBX3 and the expression of PS2(γ=-0.1761，P>0.05).Conclusion TBX3 associated with the progression and invasive process of luminal breast cancer，and is positively correlated with P53.

Breast cancer;TBX3;P53;PS2

上海崇明縣青年科技啟明星項目(編號：CQYL 2014-01)

202150 上海交通大學醫學院附屬新華醫院崇明分院(黃 燕，姜 峰，楊 英，倪國英，丁 罡)；200092 上海交通大學醫學院附屬新華醫院(吳克瑾)

丁 罡

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.03.006

R737.9

A

1001-5930(2017)03-0367-03

2016-06-02

2017-02-07)