AFP、AFU、GPC3及GP73聯合檢測對原發性肝癌的診斷意義

胡友明 張娟安 劉 軍 陳漢東

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AFP、AFU、GPC3及GP73聯合檢測對原發性肝癌的診斷意義

胡友明 張娟安 劉 軍 陳漢東

目的 探討AFP、AFU、GP73和GPC3聯合檢測對原發性肝癌(primary hepatic cancer，PHC)的診斷價值。方法 收集荊州市中心醫院2013年12月至2015年3月收治的PHC患者血清標本45例，肝硬化患者血清標本36例，乙型肝炎患者血清標本54例和健康體檢者血清標本50例，分別檢測各組研究對象血清AFP、AFU、GP73和GPC3水平，采用ROC曲線分析各標志物診斷PHC的價值。結果 PHC組患者血清AFP、AFU、GP73和GPC3表達水平均顯著高于肝硬化組、乙型肝炎組和健康體檢組(P<0.05)。肝硬化組和乙型肝炎組患者血清AFP、AFU水平顯著高于健康體檢組(P<0.05)。肝硬化組患者血清GP73水平顯著高于乙型肝炎組患者(P<0.05)，乙型肝炎組患者血清GP73水平顯著高于健康對照組。聯合AFP、AFU、GP73和GPC3檢測的ROC曲線下面積為0.922，大于任何單一標志物檢測。聯合AFP、AFU、GP73和GPC3檢測的敏感性、特異性和準確性分別為93.8%，81.5%和90.1%，其中敏感性和準確性明顯高于任何單一標志物。結論 聯合AFP、AFU、GP73和GPC3檢測可以顯著提高PHC的檢出率和準確性，為臨床早期診斷PHC提供可靠參考。

原發性肝癌；甲胎蛋白；高爾基體蛋白73；磷脂酰肌醇蛋白聚糖3；α-巖藻糖苷酶

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:375～377)

原發性肝癌(primary hepatic cancer，PHC)是我國常見惡性腫瘤之一，惡性程度高，5年生存率低。PHC起病較隱匿，早期臨床癥狀不典型，診斷難度較大，大多數患者確診時已是中晚期，失去最佳治療時機。因此，PHC的早期診斷對治療及預后至關重要。甲胎蛋白(alpha fetoprotein，AFP)是診斷肝癌的經典腫瘤標志物，但是單獨使用AFP達不到理想的特異度和靈敏度。近年來，薈萃分析顯示高爾基體蛋白73(golgi protein73，GP73)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican 3，GPC3)和α-巖藻糖苷酶(alpha fucosidase，AFU)在肝癌患者血清中出現高表達[1]。本研究聯合檢測AFP、GP73、GPC3和AFU 4種腫瘤標志物在PHC患者血清中的表達水平，旨在探討4種標志物聯合檢測對PHC的診斷價值。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集荊州市中心醫院2013年12月至2015年3月收治的PHC患者血清標本45例，肝硬化患者血清標本36例，乙型肝炎患者血清標本54例和健康體檢者血清標本50例。PHC組男性29例，女性16例；年齡32～69歲，平均(43.2±7.5)歲。肝硬化組男性21例，女性15例；年齡35～72歲，平均(45.3±7.2)歲。乙型肝炎組男性28例，女性26例；年齡24～75歲，平均(40.6±8.1)歲。健康體檢組男性26例，女性24例；年齡25～70歲，平均(42.9±8.0)歲。4組患者年齡，性別構成比無統計學差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

血清AFU試劑由寧波美康生物科技股份有限公司提供，儀器采用美國貝克曼庫爾特公司LX-20型全自動生化分析儀；血清AFP測定儀器采用美國貝克曼庫爾特公司DX1800全自動化學發光免疫分析系統，試劑和校準品采用其公司原裝配套試劑。血清GP73和GPC3采用美國RD Biosciences公司提供的酶聯免疫分析試劑盒檢測。嚴格按照說明書操作。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 各組患者4種腫瘤標志物的表達水平

PHC組患者血清AFP、AFU、GP73和GPC3表達水平均顯著高于肝硬化組、乙型肝炎組和健康體檢組(P<0.05)。肝硬化組和乙型肝炎組患者血清AFP、AFU水平顯著高于健康體檢組(P<0.05)，但肝硬化組和乙型肝炎組比較無統計學差異(P>0.05)。肝硬化組患者血清GP73水平顯著高于乙型肝炎組患者(P<0.05)，乙型肝炎組患者血清GP73水平顯著高于健康對照組患者。血清GPC3水平在肝硬化組、乙型肝炎組患者和健康體檢組患者間無統計學差異(P>0.05)。見表1。

表1 各組患者4種腫瘤標志物的表達水平

2.2 4種腫瘤標志物單獨檢測及聯合檢測的ROC曲線分析

聯合AFP、AFU、GP73和GPC3檢測的ROC曲線下面積為0.922，大于任何單一標志物檢測。見表2。

2.3 4種腫瘤標志物檢測對PHC診斷效能分析

聯合AFP、AFU、GP73和GPC3檢測的敏感性、特異性和準確性分別為93.8%、81.5%和90.1%，其中敏感性和準確性明顯高于任何單一標志物，但是特異性有所降低。見表3。

3 討論

肝癌是我國常見的消化系統惡性腫瘤，死亡率位居第二，并且近年來呈現出發病率和死亡率逐年上升的趨勢。PHC患者早期多不呈現典型的臨床表現，以致早期發現及診斷該病困難，因此對早期PHC患者尋求有效的檢測方法，提高診斷水平就成為臨床醫生關注的焦點。血清腫瘤標志物是腫瘤細胞或是腫瘤相關組織產生的可在血液中呈現高表達的物質，與腫瘤的生長、擴散和發展有關[2-3]。AFP是胚胎發育早期形成的一種糖蛋白，是目前臨床上診斷肝癌常用的腫瘤標志物，但是高分化或分化很差的肝癌細胞常不表達AFP，而在病毒性肝炎和肝硬化等慢性肝臟疾病中出現高表達，臨床診斷PHC的靈敏度較低[4]。本研究中AFP診斷PHC的敏感性為78.6%，準確性為80.5%，可見單獨的AFP檢測診斷PHC的漏診率和誤診率還是比較高的。AFU是存在于多種組織中的一種溶酶體酸性水解酶，幾乎在所有的哺乳動物細胞中表達[5]。研究顯示PHC患者中AFU呈現高表達，檢測PHC時，可以與AFP互補，提高診斷的敏感性和特異性[6]。GP73是高爾基Ⅱ型跨膜蛋白，在正常肝臟細胞中，GP73主要是在匯管區的膽管上皮細胞中進行表達，在其他肝細胞中低表達或不表達[7]，在疾病狀態時，GP73可從高爾基體順面膜囊尚循環出來并到達胞內體及細胞表面[8]，研究顯示GP73的特異度和靈敏度顯著高于AFP，且在肝轉移癌中尤其顯著[9]。GPC3通過磷脂酰肌醇錨定在細胞膜上，屬于分泌蛋白，介導多種信號傳導途徑，通過多聚陰離子GAG側鏈或核心蛋白，與Wnt、胰島素樣生長因子-Ⅱ、轉化酶等多種細胞因子發生作用，導致肝細胞增生與分化，參與肝細胞的癌變過程[10-11]。

表2 4種腫瘤標志物單獨檢測及聯合檢測的ROC曲線分析

表3 4種腫瘤標志物檢測對PHC診斷效能/%

單一標志物對于腫瘤的檢測往往存在敏感性和特異性的不足，而聯合檢測可以達到互補的作用。目前，對于PHC的診斷，眾多學者采用聯合檢測的方法研究，結果幾乎都顯示出聯合檢測較單一標志物檢測能獲得較高的檢出率和準確性。謝明水等[12]分析了AFP-L3、GP73和GPC3聯合檢測在PHC中的診斷價值，結果顯示聯合檢測的ROC曲線下面積可達到0.960，遠遠高于單獨檢測的ROC曲線下面積，明顯提高PHC的檢出率。葉宏[13]聯合AFP、AFU和β2-微球蛋白及透明質酸診斷PHC，結果顯示聯合這4種腫瘤標志物能顯著提高早期診斷PHC的敏感性和診斷率。本研究聯合AFP、AFU、GP73和GPC3 4種腫瘤標志物檢測PHC，結果顯示PHC患者血清中這4種腫瘤標志物均出現顯著升高，其中肝硬化和乙型肝炎患者的血清AFP、AFU和GP73水平與健康體檢者比較也出現了顯著升高，而GPC3只在PHC患者血清中出現顯著升高，可見GPC3診斷肝癌的特異性較高，可達到90.7%。ROC曲線分析的結果顯示聯合4種標志物檢測的曲線下面積為0.922，高于任何單一標志物和其他任意組合檢測，且聯合檢測的敏感性可達到93.8%，準確率可達到92.1%，相比于單獨檢測明顯升高，特異性略有所降低，為81.5%。由此可見聯合AFP、AFU、GP73和GPC3檢測可以顯著提高PHC的檢出率和準確性，降低假陽性和假陰性結果的發生率，為臨床早期診斷PHC提供可靠參考。

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(編輯：甘 艷)

The Significance of Combined Detection of AFP，AFU，GPC3 and GP73 in the Diagnosis of Primary Hepatocellular Carcinoma

HU Youming，ZHANG Juan'an，LIU Jun，et al.

Jingzhou Shashi District People's Hospital，Jingzhou，434000

Objective To investigate the value of combined detection of AFP，AFU，GP73 and GPC3 in the diagnosis of primary liver cancer.Methods Collected 45 cases of serum samples of PHC patients，36 patients with liver cirrhosis，54 patients with hepatitis B and 50 cases of healthy patients.Detected the levels of serum AFP，AFU，GP73 and GPC3 in each group respectively，and used ROC curve to analyze the diagnostic value of PHC.Results The expression levels of AFP，AFU，GP73 and GPC3 in the serum of patients with PHC were significantly higher than those in patients with cirrhosis，hepatitis B group and healthy control group (P<0.05).The serum AFP and AFU levels in liver cirrhosis group and hepatitis B patients were significantly higher than that in healthy control group(P<0.05).The serum level of GP73 in patients with liver cirrhosis was significantly higher than that of patients with hepatitis B(P<0.05)，the level of serum GP73 in patients with hepatitis B was significantly higher than that in healthy control group.The area under the ROC curve of the combination of AFP，AFU，GP73 and GPC3 was 0.922，larger than that of any single marker.The sensitivity，specificity and accuracy of the combined detection of AFP，AFU，GP73 and GPC3 were 93.8%，81.5% and 90.1%，respectively，and the sensitivity and accuracy were significantly higher than those of any of the markers.Conclusion Combined detection of AFP，AFU，GP73 and GPC3 can significantly improve the detection rate and accuracy of PHC，and provide a reliable reference for the early diagnosis of PHC.

Primary hepatic cancer；AFP；GP73；GPC3；AFU

434000 湖北省荊州市沙市區人民醫院(胡友明，陳漢東)；434000 湖北省荊州市中心醫院(張娟安，劉 軍)

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.03.008

R735.7

A

1001-5930(2017)03-0375-03

2016-05-04

2016-11-04)