紅花黃色素聯(lián)合二甲雙胍對早期糖尿病腎病患者氧化應激、胰島素抵抗及腎功能的影響

鮑喜靜 李建英 彭一 董陸玲 唐宏霞 楊秀紅 王新婷 辛麗娟 張翠靜 吳嘉鳴

·論著·

紅花黃色素聯(lián)合二甲雙胍對早期糖尿病腎病患者氧化應激、胰島素抵抗及腎功能的影響

鮑喜靜 李建英 彭一 董陸玲 唐宏霞 楊秀紅 王新婷 辛麗娟 張翠靜 吳嘉鳴

目的 觀察紅花黃色素聯(lián)合二甲雙胍對早期糖尿病腎病(DN)患者氧化應激、胰島素抵抗及腎功能的影響。方法 選取2015年10月至2016年10月診治的DN患者80例，隨機分為對照組和觀察組，每組40例。2組均接受常規(guī)治療，對照組在常規(guī)治療基礎上口服鹽酸二甲雙胍治療，觀察組在對照組基礎上靜脈滴注紅花黃色素，療程均為2周。觀察2組血清空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、胰島素(FINS)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、8異前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)、胱抑素C(Cys C)、同型半胱氨酸(Hcy)、24 h尿蛋白量、尿白蛋白排泄率(UAER)變化，計算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)。結果 與治療前比較，2組治療后FBG、2 hPG、FINS、HOMA-IR、MDA、Cys C、Hcy水平均較治療前顯著降低(P<0.05)，GSH-Px、SOD水平均較治療前顯著升高(P<0.05)，且觀察組上述指標改善程度優(yōu)于對照組(P<0.05)。結論 紅花黃色素聯(lián)合二甲雙胍治療早期糖尿病腎病能夠顯著降低氧化應激水平，改善胰島素抵抗，從而發(fā)揮腎臟保護作用。

紅花黃色素；二甲雙胍；糖尿病腎病；氧化應激；胰島素抵抗；腎功能

糖尿病腎病(diabetic nephrology，DN)是以腎小球血管受損、細胞外基質積聚、腎小球硬化以及結節(jié)性病變?yōu)橹鞯奶悄虿∥⒀懿∽冎唬湟l(fā)的腎功能衰竭是導致糖尿病患者致死的重要原因[1,2]。因此，DN的早期診斷和治療對于延緩腎功能損傷、降低病死率至關重要。DN發(fā)病機制復雜，其中氧化應激在DN發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用，且與胰島素抵抗密切相關[3,4]。紅花黃色素是活血化瘀類中藥紅花的主要成分，主要含有羥基紅花黃色素A，具有通經(jīng)、活血、止痛的功效。現(xiàn)代藥理學研究表明，紅花黃色素具有擴張血管、抑制血小板聚集及血栓形成、增加局部血液灌注、改善微循環(huán)等作用，能夠從多靶點治療腎臟疾病[5]。本研究在二甲雙胍降低血糖基礎上加用紅花黃色素治療DN，觀察二者聯(lián)合治療的臨床療效及對患者血清氧化應激指標、胰島素抵抗及腎功能的影響，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年10月至2016年10月我院收治的DN患者80例，隨機分為對照組和觀察組，每組40例。對照組男22例，女18例；年齡35～71歲，平均(50.45±7.12)歲；病程6～17年，平均(8.26±1.13)年。觀察組男23例，女17例；年齡33～70歲，平均(49.74±7.03)歲；病程7～16年，平均(9.06±1.20)年。2組年齡、性別比、病程等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

組別年齡(歲)男/女(例)FBG(mmol/L)24h尿微量白蛋白(mg)病程(年)對照組50.45±7.1222/187.51±0.86140.25±23.578.26±1.13觀察組49.74±7.0323/177.49±0.82137.44±20.699.06±1.20

1.2 納入及排除標準

1.2.1 納入標準：①符合2010年美國糖尿病學會制定的2型糖尿病診斷標準；②符合2013年第八版《內科學》制定的早期DN診斷標準，即尿白蛋白排泄率持續(xù)性增加超過20～200 μg/min；③發(fā)病持續(xù)時間超過1年；④所有患者簽署知情同意書。

1.2.2 排除標準：①合并心﹑肝﹑肺﹑腎等重要臟器功能不全者；②高血壓、尿路結石等疾病引起的尿蛋白增加者；③自身免疫性疾病、惡性腫瘤患者；④藥物過敏患者。

1.3 治療方法 2組均進行糖尿病宣教、低蛋白飲食、適量運動等常規(guī)治療。對照組在常規(guī)治療基礎上口服鹽酸二甲雙胍片(中美上海施貴寶制藥有限公司， 國藥準字H20023370)，2 g/d，分次口服。觀察組在對照組基礎上加用紅花黃色素(浙江永寧藥業(yè)股份有限公司，批號 220050146)，100 mg紅花黃色素溶于250 ml 0.9%氯化鈉溶液中靜脈滴注，1次/d。療程均為2周。

1.4 觀察指標 觀察2組血清空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2hPG)、胰島素(FINS)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、8異前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)、胱抑素C(Cys C)、同型半胱氨酸(Hcy)、24 h尿蛋白量、尿白蛋白排泄率(UAER)變化，計算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)。

1.5 檢測方法

1.5.1 標本采集:分別于治療前后抽取患者清晨空腹靜脈血5 ml，3 000 r/min離心10 min，分離血清，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5.2 生化指標:采用酶法測定FBG、2 hPG 水平。

1.5.3 FINS、HOMA-IR:采用放射免疫法測定FINS水平。公式法計算HOMA-IR， HOMA-IR=FBG(mmol/L)×(mU/L)/22.5。

1.5.4 氧化應激指標:采用硫化巴比安酸法測定MDA水平，氮藍四唑法測定SOD水平，比色法測定GSH-Px水平。

1.5.5 8-iso-PGF2α:采用ELISA法測定血清8-iso-PGF2α水平，試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司。嚴格按照試劑盒說明書操作。在酶標儀450 nm波長處測定各孔吸光度值(OD值)，根據(jù)說明書提供的標準品濃度及測得的OD值得到標準曲線的直線回歸方程，即可計算出各樣品濃度。

1.5.6 腎功能指標:采用7080全自動生化分析儀測定BUN、Scr、Cys C、Hcy水平。同時留取患者隔夜尿，采用化學發(fā)光免疫分析儀測定24 h尿蛋白量、UAER。

2 結果

2.1 2組血糖、胰島素水平比較 2組治療前FBG、2hPG、FINS、HOMA-IR比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；2組治療后FBG、2hPG、FINS、HOMA-IR均較治療前顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，且觀察組降低程度優(yōu)于對照組(P<0.05)。見表2。

組別FBG(mmol/L)2hPG(mmol/L)FINS(mU/L)HOMA-IR對照組 治療前7.51±0.868.41±0.8513.48±2.114.77±0.52 治療后6.50±0.97*7.23±0.92*11.22±1.23*4.23±0.56*觀察組 治療前7.49±0.828.38±0.8213.90±2.134.81±0.53 治療后5.88±0.62*#6.61±0.63*#8.13±0.96*#3.62±0.47*#

注：與治療前比較,*P<0.05;與對照組比較,#P<0.05

2.2 2組氧化應激指標比較 2組治療前GSH-Px、SOD、MDA比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；2組治療后GSH-Px、SOD均較治療前顯著升高，MDA均較治療前顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，且觀察組改善程度優(yōu)于對照組(P<0.05)。見表3。

2.3 2組8-iso-PGF2α水平比較 2組治療前8-iso-PGF2α水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；2組治療后8-iso-PGF2α均較治療前顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，且觀察組降低程度優(yōu)于對照組(P<0.05)。見表4。

組別GSH-Px(U)SOD(U/ml)MDA(cB/μmol/L)對照組 治療前376.23±42.7558.42±8.366.99±0.83 治療后409.52±51.34*66.72±9.55*5.72±0.63*觀察組 治療前381.23±40.8460.27±9.457.12±0.90 治療后497.15±55.37*#79.21±10.45*#5.02±0.46*#

注：與治療前比較,*P<0.05;與對照組比較,#P<0.05

2.4 2組腎功能指標比較 2組治療前BUN、Scr、24 h 尿蛋白、UAER比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；2組治療后BUN、Scr、24 h尿蛋白、UAER均較治療前顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，且觀察組降低程度優(yōu)于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表5。

組別8-iso-PGF2α(ng/ml)對照組 治療前22.14±3.41 治療后15.06±2.23*觀察組 治療前21.89±3.32 治療后9.15±1.25*#

注：與治療前比較,*P<0.05;與對照組比較,#P<0.05

組別BUN(mmol/L)Scr(μmol/L)24h尿蛋白(g/24h)UAER(μg/min)對照組 治療前14.12±2.11246.24±25.212.51±0.3263.57±8.44 治療后10.33±1.35*206.53±18.67*1.79±0.26*45.58±6.39*觀察組 治療前13.78±2.04250.43±27.452.49±0.2862.84±8.35 治療后7.36±1.00*#154.48±12.69*#1.04±0.15*#20.61±3.68*#

注：與治療前比較,*P<0.05;與對照組比較,#P<0.05

2.5 2組Cys C、Hcy水平比較 2組治療前Cys C、Hcy水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；2組治療后Cys C、Hcy水平均較治療前顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，且觀察組降低程度優(yōu)于對照組(P<0.05)。見表6。

組別CysC(μmol/L)Hcy(mg/L)對照組 治療前20.34±2.671.78±0.27 治療后16.99±2.41*1.11±0.18*觀察組 治療前19.58±2.451.76±0.25 治療后11.78±1.91*#0.65±0.09*#

注：與治療前比較,*P<0.05;與對照組比較,#P<0.05

3 討論

近年來，氧化應激在DN發(fā)生發(fā)展中的作用越來越受到重視，其產(chǎn)生的活性氧(ROS)和活性氮(RNS)參與DN的多種病理機制[6,7]。高糖狀態(tài)極易誘發(fā)氧化應激反應，過多的ROS主要來源于線粒體氧化呼吸鏈、晚期糖基化終產(chǎn)物合成、PKC信號途徑、一氧化氮合酶等，而ROS生成增多又進一步激活以上通路從而造成氧化損傷不斷擴大[8,9]。研究顯示，ROS、RNS可對線粒體結構造成直接破壞，從而導致SOD、CTA、GPX等抗氧化酶缺失，進而使得機體清除氧自由基的能力降低。

本研究選用GSH-Px、SOD、MDA、8-iso-PGF2α反映機體氧化應激狀態(tài)。其中GSH-Px、SOD是線粒體產(chǎn)生的抗氧化酶，是機體主要抗氧化物質之一，其水平高低直接反映機體抗氧化能力強弱。MDA是脂質過氧化產(chǎn)物，間接反映機體過氧化反應程度。8-iso-PGF2α是DNA氧化應激損傷的特異性指標，反映機體DNA過氧化反應程度[10,11]。本研究結果顯示，兩組治療前GSH-Px、SOD、MDA、8-iso-PGF2α比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；2組治療后GSH-Px、SOD均較治療前顯著升高，MDA、8-iso-PGF2α均較治療前顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，且觀察組改善程度優(yōu)于對照組(P<0.05)。提示紅花黃色素聯(lián)合二甲雙胍能夠明顯降低機體氧化應激水平，增強抗氧化能力。

此外，已有研究證實氧化應激不僅能夠直接損傷胰島β細胞，促進其凋亡，還通過多個途徑干擾胰島素信號傳導，從而導致胰島素抵抗狀態(tài)。本研究結果表明，2組治療前FBG、2 hPG、FINS、HOMA-IR比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；2組治療后FBG、2 hPG、FINS、HOMA-IR均較治療前顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，且觀察組降低程度優(yōu)于對照組(P<0.05)。說明紅花黃色素聯(lián)合二甲雙胍能夠明顯改善DN患者胰島素抵抗，從而發(fā)揮降糖作用。

Cys C是評價腎小球濾過功能的內源性標志物，是檢測早期腎功能損害的可靠指標，且其生成不受性別、年齡、疾病等因素影響[12,13]。Hcy作為蛋氨酸代謝的中間產(chǎn)物，通過細胞毒性作用、誘導氧化應激等途徑損傷血管內皮，與糖尿病微血管病的發(fā)生發(fā)展密切相關[14,15]。本研究結果顯示，2組治療前Cys C、Hcy、BUN、Scr、24 h尿蛋白、UAER水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；2組治療后Cys C、Hcy、BUN、Scr、24 h 尿蛋白、UAER水平均較治療前顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，且觀察組降低程度優(yōu)于對照組(P<0.05)。提示紅花黃色素聯(lián)合二甲雙胍能夠明顯改善DN患者受損的腎功能，與他人研究結果[16,17]一致。

綜上所述，紅花黃色素聯(lián)合二甲雙胍治療早期糖尿病腎病能夠有效延緩腎小球硬化及腎間質纖維化進程，降低尿蛋白，從而發(fā)揮腎臟保護作用，效果優(yōu)于單純二甲雙胍治療，具有一定臨床應用價值。其機制與抑制氧化應激、改善胰島素抵抗有關。本研究為紅花黃色素應用于糖尿病腎病的臨床治療中提供了實驗依據(jù)。

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Effects of safflower yellow combined with metformin hydrochloride on oxidative stress,insulin resistance and renal function in patients with early diabetic nephropathy

BAOXijing*,LIJianying,PENGYi*,etal.

*DepartmentofEndocrinology,TheFirstHospitalofZhangjiakouCity,Hebei,Zhangjiakou075000,China

Objective To observe the effects of safflower yellow combined with metformin hydrochloride on oxidative stress,insulin resistance and renal function in patients with early diabetic nephropathy (DN).Methods A total of 80 patients with DN who were admitted and treated in our hospital from October 2015 to October 2016 were enrolled in the study.These patients were randomly divided into observation group (n=40) and control group (n=40).The patients in both groups were treated by conventional therapy,in addition to that,the patients in control group were treated by oral metformin hydrochloride,however,the patients in observation group,on the basis of control group,were given safflower yellow by intravenous drip,with a treatment course of 2 weeks for both groups. The changes of levels of FBG, 2hPG,FINS,GSH-Px,SOD,MDA,8-iso-PGF2α,Cys C,Hcy,24h urine protein,UAER and HOMA-IR before and after treatment were observed and compared between two groups.Results As compared with those before treatment,the levels of FBG, 2hPG, FINS,HOMA-IR,MDA,8-iso-PGF2α,Cys C,Hcy,24h urine protein and UAER were significantly decreased after treatment in both groups (P<0.05), however, the levels of GSH-Px, SOD were significantly increased in both groups (P<0.05),moreover, the improvement degree in observation group was suprior to that in control group (P<0.05).Conclusion The safflower yellow combined with metformin hydrochloride in treatment of early DN can obviously reduce oxidative stress and improve insulin resistance to bring into play a protective effect on renal function of patients.

safflower yellow; metformin hydrochloride; diabetic nephropathy; oxidative stress; insulin resistance; renal function

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.12.005

075000 河北省張家口市第一醫(yī)院內分泌科(鮑喜靜、彭一、董陸玲、唐宏霞、楊秀紅、王新婷、辛麗娟、張翠靜、吳嘉鳴)，重癥監(jiān)護科(李建英)

R 587.24

A

1002-7386(2017)12-1780-04

2016-12-08)