新鄉市某羊場球蟲感染情況調查及藥物治療試驗

陳金山 朱惠麗 王憲文 劉俊偉 李金輝 李英 杜少甫

摘要[目的]了解新鄉地區規模化羊場球蟲感染情況。[方法]采用糞便壓片法、飽和鹽水漂浮法和卵囊培養法對新鄉市某羊場的球蟲感染情況進行調查和鑒定，并開展了幾種寄生蟲藥物的治療試驗。[結果]該羊場球蟲感染率為25%，其中夏季的感染率最高，且1～3月齡的羔羊感染最嚴重。形態學分析表明，該場羊群體內存在2種球蟲，分別為錯亂艾美耳球蟲和和雅氏艾美耳球蟲。藥物治療試驗結果表明，磺胺喹噁啉片對艾美耳球蟲的防治有良好效果，其價格便宜，用藥方便。[結論]研究結果可為規模化羊場寄生蟲的防治工作提供理論基礎和技術支撐。

關鍵詞羊場；球蟲感染；防治；新鄉市

中圖分類號S852.72文獻標識碼A文章編號0517-6611（2017）21-0113-02

Investigation on the Infection of Coccidian and Its Drug Treatment Experiment in a Sheep Farm in Xinxiang City

CHEN Jinshan1 ， ZHU Huili1 ， WANG Xianwen1， LI Ying2* et al

（1.College of Animal Science and Veterinary Medicine， Henan Institute of Science and Technology， Xinxiang，Henan 453003；2.College of Agriculture and Animal Husbandry of Qinghai University， Xining，Qinghai 810016）

Abstract[Objective]To understand the infection conditions of coccidian of largescale sheep farms in Xinxiang City. [Method]The infection conditions of coccidian in a sheep farm in Xinxiang City were investigated and identified by fecal compression method，the method of saturated solution floating and method of oocysts cultivating， and treatment experiment of several kinds of parasite drugs was carried out in the farm. [Result]The overall prevalence of coccidial infection in the farm was 25%， the infection rate of sheep in summer was the highest， and the infection of 1-3 monthold lamb was the most serious. Two species of Eimeria were identified in the body of sheep by morphological analysis. They were E. intricata and E. ninakohlyakimovae respectively. The results of medicine treatment trial showed that sulfaquinoxaline had a good effect in treatment of Eimeria， and it was cheaper and more convenient in use. [Conclusion]The research results can provide theoretical basis and technical support for the prevention and control of parasites in the farms.

Key wordsSheep farm；Coccidial infection；Prevention and control；Xinxiang City

羊球蟲病是由原生動物門的球蟲寄生于綿羊或山羊腸道引起的以下痢、消瘦、貧血為主要癥狀的寄生性原蟲病[1]。該病對羔羊的危害尤為嚴重，可使其生長發育停滯，青年羊和成年羊通常為帶蟲者，羊患病后沒有明顯的臨床癥狀，但一般呈慢性消耗性通過，導致飼料轉化率降低，畜產品質量下降，從而影響養羊業的發展。為了解新鄉地區規模化羊場球蟲的感染情況，制訂有效的防治方案，筆者于2016年1—12月對新鄉市某規模化羊場進行球蟲感染情況調查與鑒定，并進行藥物治療試驗，旨在為規模化羊場寄生蟲的防治工作提供理論基礎和技術支撐。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1羊場飼養管理。

該羊場存欄量870只，平時以人工圈養為主，每年普防羊三聯四防、羊痘、口蹄疫等疫苗。該羊場實行嚴格的防疫制度，非工作人員進入生產區前，必須通過紫外線消毒通道，車輛進出要經過消毒池。該羊場對寄生蟲的防治工作采取以下措施：每年春秋兩季各進行1次計劃性驅蟲，發現羊只患有寄生蟲病時，對該羊只依據具體情況單獨用藥。

1.1.2樣品的采集與保存。

在一年四季采集不同年齡段羊群（1～3月齡、6～12月齡和12月齡以上）的新鮮糞便20～30 g，分別裝入潔凈的封口袋內，標上年齡、性別、耳號及臨床情況，帶回實驗室置于4 ℃冰箱中保存待檢。

1.1.3主要試劑與儀器。

食鹽購自河南制鹽有限責任公司；重鉻酸鉀購自天津市福晨化學試劑廠；鹽酸丙硫咪唑片，200 mg/片，購自龍暉藥業有限公司生產，批號為H23021888；鹽酸氯苯胍片，購自重慶桂花獸藥有限公司，批號為20151006；磺胺喹噁啉片，購自青州奧星化工有限公司生產，批號為20150514179；數碼顯微鏡（麥克奧迪實業集團有限公司）；電熱恒溫培養箱（上海一恒科學儀器有限公司，型號DHP-9162）。

1.2方法

采取糞便壓片法和飽和鹽水漂浮法相結合的方法檢查糞便樣品中的球蟲卵囊，計算感染率；采用斯陶爾計數法測定每克糞便中球蟲卵囊數（OPG），計算感染強度。

1.2.1糞便壓片法。

首先在載玻片上加自來水1滴，然后再用鑷子取糞便少許，并與載玻片上的自來水混合均勻，用鑷子將大塊的糞渣去掉，蓋上蓋玻片輕壓，用吸水紙吸取多余水分，置于400倍光學顯微鏡下進行觀察。

1.2.2飽和鹽水漂浮法。

取保存在4 ℃冰箱中的糞樣，用分析天平稱取2 g糞便，放入50 mL燒杯中，加入30 mL飽和食鹽水，振蕩，使糞便充分溶解，用糞篩將糞液篩入另一個50 mL燒杯中，靜置漂浮約20 min后，用銅環蘸取浮膜，抖落在載玻片，蓋上蓋玻片，置于400倍光學顯微鏡下觀察，并測量球蟲卵囊的大小。

1.2.3斯陶爾計數法。

斯陶爾計數法參考文獻[2]，在顯微鏡下進行蟲卵計數，所得球蟲卵囊總數乘以100，即為每克糞便中的球蟲卵囊數。為減小試驗誤差，在同一天同一時間段對采集樣品進行了3次重復試驗。

1.2.4卵囊的收集與培養。

將陽性糞樣采用飽和鹽水漂浮法收集卵囊，加入2.5%重鉻酸鉀溶液混勻，在26～28 ℃恒溫箱中培養至卵囊孢子化，孢子化程度達到85%以上，并在數碼顯微鏡下進行形態觀察。

1.2.5卵囊種類鑒定。

觀察卵囊大小、顏色和形態結構，用顯微鏡圖像分析處理系統進行拍照，測量50個孢子化卵囊大小，采用斯陶爾計數法對陽性糞樣進行計數。用裝有測微尺的顯微鏡先觀察卵囊形態、大小、極帽、卵膜孔和外殘體的有無、孢子囊大小、內殘體和斯氏體的有無等，再測量卵囊長和寬，與文獻[3]所述的卵囊大小進行比較，判斷卵囊類別。

1.2.6藥物治療試驗。

隨機抽取經糞便檢查有球蟲卵囊自然感染的不同年齡羊40只，分為4組，每組10只，分飼于4個圈舍中。其中1組為空白對照組（Ⅰ），另外3組（Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ）分別使用鹽酸丙硫咪唑片、鹽酸氯苯胍片和磺胺喹噁啉片進行治療。用藥方法如下：①鹽酸丙硫咪唑片，0.33～1.00 mg/kg體重，口服每日1次，連服5 d。②鹽酸氯苯胍片，20 mg/kg體重，口服每日1次，連用5 d。③磺胺喹噁啉片，100 mg/kg體重，每日1次，連用5 d。④空白對照組不予用藥，自由飲用口服補液鹽。治療組喂藥期間自由飲用口服補液鹽。

投藥后從第2天開始每天直腸取糞便帶回實驗室，進行蟲體檢測，同時觀察各試驗組羊的精神、食欲、飲水、糞便等情況及臨床表現，并做好記錄。

1.2.7療效判定。

根據用藥前后羊只卵囊轉陰率，來判定驅蟲效果。按照以下公式計算卵囊轉陰率：

卵囊轉陰率=[（驅蟲前動物感染數-驅蟲后動物感染數）/驅蟲前動物感染數]×100%。

2結果與分析

2.1羊場球蟲感染狀況

由表1可知，在4個季節共采集480份糞樣，檢出陽性樣品120份，總體感染率為25%。其中，夏季感染率最高，為41.7%；冬季感染率最低，為6.7%。此外，飼養環境和場內是否定期驅蟲對球蟲在羊場的蔓延流行起著至關重要作用，在缺乏良好飼養管理的情況下球蟲感染率為62.5%（75/120）；當沒有進行定期驅蟲時，球蟲感染率則高達80%（96/120）。

由表2可知，全年采集的480份羊糞便樣品，包括1～3月齡羊樣品120份、6～12月齡羊樣品120份和12月齡以上的羊樣品240份。陽性樣品共120份，總感染率為25%，其中感染率最高的是1～3月齡的羔羊，為75%，而12月齡以上的羊感染率僅為5%。1～3月齡、6～12月齡、12月齡以上3個年齡段羊感染卵囊的平均OPG值分別為4 286、1 883和500個/g。

2.2場球蟲感染種類及形態特征

經形態學鑒定，該羊場感染2種球蟲，分別為錯亂艾美爾球蟲（Eimeria intricate）和雅氏艾美耳球蟲（Eimeria ninakohlyakimovae）。

錯亂艾美爾球蟲（E.intricate）卵囊的形態結構特征如下：大型卵囊，呈橢圓形或稍呈卵圓形，黃褐色，平均大小為33.7 μm×24.1 μm，平均形狀指數1.4；卵囊壁2層，呈黃褐色，內層褐色，卵膜孔極帽明顯；孢子囊呈長卵圓形，平均大小為12.469 μm×7.895 μm，平均形狀指數1.6；無外殘體，有內殘體，極粒多，斯氏體不顯著；子孢子呈豆莢狀，頭尾相鄰并

列于孢子囊內，含有2個折光球；孢子化時間為84～120 h。

雅氏艾美耳球蟲（E.ninakohlyakimovae）卵囊的形態結構特征如下：卵囊呈橢圓形或亞球形，平均大小為24.9 μm×20.4 μm，形狀指數1.2；黃褐色，無極帽，卵膜孔不明顯，孢子囊呈卵圓形，平均大小為139 μm×7.6 μm，平均形狀指數1.6；內殘體由顆粒狀物組成，多個極粒，有斯氏體，孢子化時間為57 h。

2.3藥物治療試驗結果

經糞便卵囊檢查，藥物驅蟲試驗羊投藥前Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅰ組球蟲感染率分別為85%（17/20）、80%（16/20）、90%（18/20）和85%（17/20）。使用3種藥物驅蟲后，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組球蟲卵囊轉陰率分別為5.88%、12.50%和8889%，其中磺胺喹噁啉試驗組的卵囊轉陰率最高，為8889%，藥物使用前后各組羊感染情況變化見表3。

通過臨床觀察發現，試驗組羊病羊經過試驗藥物驅蟲后，精神有所好轉。磺胺喹噁啉試驗組羊只體溫趨于正常，采食量增加，無腹瀉現象，且皮毛光亮，驅蟲前后羊只狀態差異顯著。

3討論

糞便直接壓片法是檢查羊球蟲病簡單快捷的方法，可將其作為羊場日常球蟲檢測方法，由于其檢出率相對較低，對于輕度或隱性感染的病羊容易漏診。飽和鹽水漂浮法通過比重大的飽和鹽水濃集卵囊，可提高檢出率。通過斯陶爾計數法計算出羊群的感染強度，為畜群用藥治療提供理論依據。

從羊場的球蟲感染率來看，該羊場羊只感染存在季節差異性，夏季感染率最高，冬季最低。這是由于球蟲感染多流行于溫暖濕潤的季節。夏季氣候以濕熱為主，便于球蟲卵囊發育到感染階段而大量感染，加上舍飼羊群活動范圍小，飼養密度大，較為擁擠，環境潮濕，有利于球蟲的傳播和感染。

該試驗結果表明，該羊場1月齡羔羊的感染率為75%，而12月齡以上的羊感染率降至5%，呈現幼齡羔羊的感染率最高，隨年齡的增長呈遞減的趨勢。這與前人研究報道[4-7]相一致，由于羔羊尚未建立較為完善的免疫應答機制，所以羔羊易感且呈高強度感染。隨著年齡的增長，機體發育逐漸完善，經多次啟動細胞和體液免疫來抵抗球蟲的侵襲，在生產實際中應重點加強對羔羊球蟲病的防治。

磺胺喹噁啉為磺胺類廣譜抗球蟲藥，具有高效、低毒的特點，是目前用藥濃度最低的一種抗球蟲藥。該藥物藥效期短，必須連續用藥，以防止球蟲病的再度暴發，由于用藥濃度極低，長期用藥可能出現耐藥性，不宜長期使用，可結合其他抗球蟲藥，如氨丙啉配伍使用。探討磺胺喹噁啉的用藥程序和方法或研發療效更為持久的抗球蟲藥，仍是今后研究的方向。

此次試驗由于現場條件所限，僅從觀察羊只治療前后的臨床狀況和卵囊轉陰率來評價藥物的效果，因此存在一定的局限性。在進行抗球蟲藥的療效評價時，若能結合糞便記分、病變記分及病變值、OPG、卵囊比較、卵囊值、抗球蟲指數（ACI）等指標進行綜合評價，可能會更科學可靠地反映藥物的療效[8-9]。因此，在今后的工作中有必要做進一步研究。

4結論

通過此次調查了解到新鄉地區某規模化羊場的球蟲感染率為25%，其中夏季的感染率最高，且1～3月齡的羔羊感染率最高；磺胺喹噁啉片對于防治艾美耳球蟲具有良好的效果，可為規模化羊場寄生蟲的防治工作提供理論基礎和技術支撐。

參考文獻

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