仿生法制備氧化硅載體固定化蘇氨酸脫氨酶及其酶學(xué)性質(zhì)

李巧麗，趙 哲，徐建妙

(浙江工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院，浙江杭州310014)

?

仿生法制備氧化硅載體固定化蘇氨酸脫氨酶及其酶學(xué)性質(zhì)

李巧麗，趙 哲，徐建妙

(浙江工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院，浙江杭州310014)

通過共沉淀法制備無機氧化硅載體，然后將其應(yīng)用到蘇氨酸脫氨酶的固定化研究中。用掃描電子顯微鏡對氧化硅載體進行表征，優(yōu)化了固定化條件，當(dāng)n(Si)：n(N)為1∶ 1、偏硅酸濃度為0.03 mol/L、酶添加量為0.16 mg/mL 時，固定化的效率最高。接著對固定化酶和游離酶的酶學(xué)性質(zhì)進行了考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：固定化酶和游離酶的最適pH都是9.0，最適溫度都是45 ℃，而相對于游離酶，固定化酶在pH 9.0～10.0和溫度35～50 ℃范圍內(nèi)穩(wěn)定性更好。固定化酶的米氏常數(shù)為7.48 mmol/L，重復(fù)使用15次后，酶活力保持80%以上。說明仿生氧化硅制備的固定化蘇氨酸脫氨酶具有酶活回收率高、力學(xué)強度高和操作穩(wěn)定性好等優(yōu)勢。

氧化硅; 蘇氨酸脫氨酶; 固定化; 酶學(xué)性質(zhì)； 納米材料

酶的固定化技術(shù)在生物制藥領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用，由于其能有效地保持酶的活性，增加酶的穩(wěn)定性，許多藥物中間體都是利用固定化酶來制備生產(chǎn)的，如1-苯乙醇、6-氨基青霉烷酸和L-2-氨基丁酸等[1]。在工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)時，由于溫度、pH、穩(wěn)定性及力學(xué)強度的問題使得固定化酶的使用受到限制。近年來，納米材料因其良好的生物相容性、比表面積大、載酶量突出、顆粒直徑小和傳質(zhì)阻力小等優(yōu)點而廣泛應(yīng)用于酶的固定化研究，同時，它通過改善酶的適應(yīng)性和穩(wěn)定性，使酶能持續(xù)高效地進行催化反應(yīng)[2-3]。……