生物補(bǔ)片在腹壁不同層面組織相容性差異的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究

菅鳳國(guó)，孫宏杰，劉國(guó)正，王秀芹，王海亮

(山東省昌邑市人民醫(yī)院普外科， 山東 濰坊 261300)

生物補(bǔ)片在腹壁不同層面組織相容性差異的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究

菅鳳國(guó)，孫宏杰，劉國(guó)正，王秀芹，王海亮

(山東省昌邑市人民醫(yī)院普外科， 山東 濰坊 261300)

目的研究生物補(bǔ)片在SD大鼠腹壁不同層面組織相容性差異。方法選取90只成年雄性SD大鼠隨機(jī)分成三組，，三組各30只成年雄性SD大鼠。根據(jù)大鼠腹壁層面，于大鼠腹直肌筋膜前鞘、腹膜內(nèi)層以及腹直肌后鞘植入生物補(bǔ)片并予以固定。結(jié)果三組成年雄性SD大鼠在不同時(shí)間點(diǎn)均未發(fā)生皮下血清腫、腸瘺以及切口感染狀況，所有切口均Ⅰ期愈合。Onlay組與Sublay組補(bǔ)片與腹壁整合優(yōu)于IPOM組；OnLy組的CD68表達(dá)情況優(yōu)于Sublay組與IPOM組。結(jié)論 大鼠腹壁肌筋膜前層植入Allomax補(bǔ)片的組織相容性?xún)?yōu)于腹膜內(nèi)層與肌筋膜后層。

大鼠；腹壁；生物補(bǔ)片

腫瘤切除、感染、外傷、手術(shù)以及腹壁疝等一系列因素引起的腹壁缺損是外科主治意識(shí)經(jīng)常需要應(yīng)對(duì)的問(wèn)題，如果無(wú)法在第一時(shí)間予以有效處理，極易造成嚴(yán)重的功能、生理缺陷，對(duì)于患者的身心健康與生活質(zhì)量有嚴(yán)重影響[1-2]。本文主要針對(duì)SD大鼠腹壁不同層面放置生物補(bǔ)片，通過(guò)組織學(xué)、大體解剖等多種方法對(duì)其置入腹壁不同層面之后的組織相容性予以動(dòng)態(tài)觀察與分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選取90只清潔級(jí)SD健康雄性大鼠，295±2.2 g，以清潔級(jí)予以喂養(yǎng)，使其自由的飲水、進(jìn)食，選取架式籠養(yǎng)，將房間的溫度控制在22～25℃范圍內(nèi)，同時(shí)予以集中通風(fēng)。生物補(bǔ)片AlloMax?Surgical Graft由美國(guó)CR Bard Davol公司生產(chǎn)制造；縫合線選取4-0 Prolene線，由美國(guó)強(qiáng)生公司生產(chǎn)制造。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1動(dòng)物分組

本組90只成年雄性SD大鼠，將其隨機(jī)劃分為IPOM組、Sublay組以及Onlay組，三組各30只成年雄性SD大鼠。

1.2.2動(dòng)物模型制備

10%水合氯醛腹腔注射麻醉(4 mL∕kg)，呼吸心跳存在、痛覺(jué)刺激消失以及角膜反射消失代表麻醉完成，麻醉之后對(duì)大鼠予以常規(guī)消毒、剃毛以及固定，選取橡皮筋固定，對(duì)門(mén)齒與四肢予以固定，固定達(dá)到暴露手術(shù)視野即可。

Olay組：選取上腹正中切口，長(zhǎng)度控制在3～4 cm范圍內(nèi)，將皮膚切開(kāi)至深筋膜，分離深筋膜層與肌層，置入生物補(bǔ)片，選取4-0 Prolene縫合線于腹直肌淺層固定生物補(bǔ)片四角。

Sublay組：選取上腹正中切口，長(zhǎng)度控制在3～4 cm范圍內(nèi)，將皮膚切口至深筋膜，對(duì)大鼠腹直肌予以鈍性分離，分離腹直肌與腹直肌后鞘，于腹直肌與腹直肌后鞘之間植入生物補(bǔ)片，選取4-0 Prolene縫合線關(guān)閉肌囊。

IPOM組：選取上腹正中切口，長(zhǎng)度為4 cm，依次將皮膚、皮下各層、肌層以及腹膜切開(kāi)，將腹腔打開(kāi)，選取4-0 Prolene縫合線于壁層腹膜固定生物補(bǔ)片四角，選取4-0普理靈線對(duì)各層組織予以依次縫合，并對(duì)皮膚予以連續(xù)縫合。

1.2.3采集標(biāo)本與檢測(cè)方式

選取10%水合氯醛(按0.4 mL/100 g)對(duì)大鼠予以腹腔麻醉之后，各組在手術(shù)之后1周、2周、1月、3月以及6月將大鼠處死。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究中所有計(jì)量資料結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn) α＝0.05。采用雙因素方差分析，LSD-t進(jìn)行組間兩兩比較。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

本組所有大鼠在手術(shù)之后3～5 h均處于蘇醒狀態(tài)，術(shù)后早期活動(dòng)受到限制，飲食進(jìn)水較少，3 h之后其活動(dòng)基本恢復(fù)至正常狀態(tài)，無(wú)1只大鼠出現(xiàn)麻醉過(guò)量死亡狀況。每組大鼠均未出現(xiàn)術(shù)中、術(shù)后死亡狀況，均于既定時(shí)間點(diǎn)取材，為出現(xiàn)皮下血清種形成、腸瘺以及切口感染狀況，所有切口均于1期愈合。

2.2 大體觀察結(jié)果

三組成年雄性SD大鼠在不同時(shí)間點(diǎn)均未發(fā)生皮下血清腫、腸瘺以及切口感染狀況，所有切口均Ⅰ期愈合。Onlay組與Sublay組補(bǔ)片與腹壁整合優(yōu)于IPOM組，且Onlay組與Sublay組補(bǔ)片在不同時(shí)間點(diǎn)均顯示平展，未出現(xiàn)移位、皺縮狀況，6個(gè)月時(shí)補(bǔ)片大部分與宿主腹壁組合整合。IPOM組1周時(shí)補(bǔ)片與網(wǎng)膜發(fā)生粘連狀況，而且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，腹腔粘連評(píng)分會(huì)逐漸上升，6個(gè)月時(shí)補(bǔ)片大部分未與腹壁組織整合，而且出現(xiàn)補(bǔ)片移位、皺縮狀況。

2.3 大鼠腹壁不同層面中生物補(bǔ)片植入后CD68表達(dá)情況

植入后1周時(shí)三組均可見(jiàn)CD68表達(dá)，陽(yáng)性細(xì)胞主要分布在生物補(bǔ)片與腹壁組織之間，生物補(bǔ)片內(nèi)較少。Onlay組多于其它兩組(P＜0.05)；植入后2周，CD68陽(yáng)性數(shù)目達(dá)到最高；植入后1月后，各組陽(yáng)性細(xì)胞開(kāi)始減少，陽(yáng)性細(xì)胞逐漸出現(xiàn)生物補(bǔ)片中央；但Sublay組陽(yáng)性細(xì)胞少于其它兩組(P＜0.05)；生物補(bǔ)片植入后3月、6月時(shí)，CD68陽(yáng)性細(xì)胞已經(jīng)少見(jiàn)，各個(gè)處理組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，(見(jiàn)表1)。

表1 生物補(bǔ)片植入大鼠腹壁后各組在不同時(shí)間點(diǎn)CD68表達(dá)情況比較(s，個(gè))

表1 生物補(bǔ)片植入大鼠腹壁后各組在不同時(shí)間點(diǎn)CD68表達(dá)情況比較(s，個(gè))

注：與Onlay組相比，＃代表P＜0.05；與Sublay組相比，?代表P＜0.05。

1周 2周 1月 3月 6月Onlay組 20.13±3.57 39.12±3.24?11.03±2.06 5.36±1.02 4.81±0.91 Sublay組 14.41±1.74＃27.23±3.13 9.01±1.87 4.78±1.56 4.78±1.31 IPOM組 16.52±3.63＃31.07±3.22＃?10.21±2.12 4.89±1.81 4.90±1.65

3 討論

本研究中，三組成年雄性SD大鼠在不同時(shí)間點(diǎn)均未發(fā)生皮下血清腫、腸瘺以及切口感染狀況，所有切口均Ⅰ期愈合。Onlay組與Sublay組補(bǔ)片與腹壁整合優(yōu)于IPOM組；OnLy組的CD68表達(dá)情況優(yōu)于Sublay組與IPOM組。

因此我們初步分析認(rèn)為大鼠腹壁肌筋膜前層植入生物補(bǔ)片的組織相容性?xún)?yōu)于腹膜內(nèi)層與肌筋膜后層。但生物補(bǔ)片的組織相容性受補(bǔ)片類(lèi)型、實(shí)驗(yàn)物種及機(jī)體狀態(tài)等影響較大，有待于更大的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察。

[1] 費(fèi) 陽(yáng)，李基業(yè)，田 文.生物補(bǔ)片在會(huì)陰疝盆底重建中的應(yīng)用[J].中國(guó)修復(fù)重建外科雜志，2014，(10).

[2] 徐玲玲，沈宇飛.應(yīng)用生物補(bǔ)片治療盆腔臟器脫垂23例臨床分析[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2014，(06).

[3] 陳衛(wèi)蘭.應(yīng)用生物補(bǔ)片修復(fù)腹壁疝及缺損的圍術(shù)期護(hù)理[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2013，(21).

本文編輯：彭晚林

Experimental Study on the Differences of Histocompatibility of Biological Patch in Different Sides of Abdominal

JIAN Feng-guo，SUN Hong-jie，LIU Guo-zheng，WANG Xiu-qin，WANG Hai-liang
(Department of General Surgery，Changyi People's Hospital of Shandong Province，Shandong Qingdao 261300，China)

ObjectiveTo study the difference of histocompatibility of biologic patch in different abdominal layers of SD rats.MethodsForty adult male SD rats were randomly divided into three groups：30 adult male SD rats.ResultsAll the three groups of male SD rats did not develop subcutaneous serum，intestinal fistula and incision infection at different time points.ConclusionThe histocompatibility of allomax patch implantation in the anterior fascia of the rat is superior to that of the intraperitoneal and myometrium.

rat；abdominal wall；biological patch

R-332

B

ISSN.2095-8242.2017.12.2188.02