香加皮對斑馬魚發(fā)育毒性及心臟毒性的影響

馮婭茹 趙崇軍 倪媛媛 田敬歡 夏青 張文婷 樊嬌嬌 馬志強 林瑞超

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·論著·

香加皮對斑馬魚發(fā)育毒性及心臟毒性的影響

馮婭茹 趙崇軍 倪媛媛 田敬歡 夏青 張文婷 樊嬌嬌 馬志強 林瑞超

目的 探討香加皮水提液對斑馬魚的發(fā)育毒性及不同暴露時間藥物對心臟毒性的影響。方法 參照經濟合作與發(fā)展組織推薦的方法，將受精后6小時(6 hour-post-fertilization，6 hpf)胚胎暴露在含有不同濃度香加皮水溶液的24孔板中，分別在24、48、72、96 hpf階段測定胚胎/幼魚的自主抽動次數、心率、孵化率、死亡率等指標。隨后，使用不同濃度的香加皮水溶液處理發(fā)育至48、72、96 hpf的斑馬魚24小時，通過死亡率確定不同暴露階段對斑馬魚心臟毒性的影響。結果 各暴露組24 hpf自主抽動次數增加、48 hpf心率以及72 hpf孵化率顯著降低，與正常對照組相比均有顯著性差異(P<0.05)；24 hpf低濃度給藥組胚胎發(fā)育遲緩、眼點未發(fā)育、頭部偏小或未發(fā)育，高濃度組發(fā)育畸形或停留在體節(jié)期；48 hpf胚胎卵黃囊畸形、黑色素生成抑制、尾芽未脫落；72 hpf 幼魚出現身體彎曲、心包水腫、卵黃囊畸形等中毒癥狀。不同發(fā)育階段斑馬魚急性毒性暴露實驗結果表明：香加皮對48、72、96 hpf斑馬魚的半數致死濃度(LC50)分別為：0.866 mg/mL、0.693 mg/mL和0.843 mg/mL。結論 香加皮對斑馬魚具有明顯的發(fā)育毒性和心臟毒性，且48 hpf斑馬魚非常適合進行心臟毒性藥物篩選。

香加皮； 發(fā)育毒性； 心臟毒性； 斑馬魚

香加皮Cortex Periplocae亦稱北五加皮，為蘿藦科植物杠柳PeriplocasepiumPunge的干燥根皮，有祛風濕、強筋骨的功效，常用于治療風寒濕痹，腰膝酸軟，心悸氣短，下肢浮腫[1]。香加皮為藥典規(guī)定的有毒藥，誤用、劑量過大以及長期服用皆可引起機體出現心率減慢、早搏、房室傳導阻滯等心臟中毒癥狀，甚至致死[2]，但其并非孕婦禁忌藥，有關發(fā)育毒性的研究也未見報道。

作為一種脊椎動物模型，斑馬魚與人類基因相似度高達87%，具有完整的組織器官。斑馬魚胚胎母體外發(fā)育，發(fā)育時間短，數量大，早期胚胎透明，可直接在顯微鏡下觀察各組織臟器形態(tài)變化及血液流動情況[3]，能夠極大地彌補體內實驗與體外實驗之間的間隙。……