分析食品微生物檢驗中的無菌操作技術

宋紅梅

摘 要：無菌是指當前環境當中的微生物孢子或者營養細胞不存在，因此，無菌操作技術就是在無菌的環境下，通過無菌的器材進行細胞傳代以及植物組織培養工作。無菌操作屬于微生物檢測當中的重要工作，只有保障檢測設備在無菌的狀態下，才能確保樣品不受到任何污染。該文主要分析食品微生物檢驗中的無菌操作技術。

關鍵詞：食品 微生物檢驗 無菌操作

中圖分類號：TS207 文獻標識碼：A 文章編號：1672-3791（2016）12（b）-0221-02

食品的微生物檢測主要是測試食物菌群繁殖狀況，比如大腸菌群、酵母菌群等的狀況，對于保障食品安全具有十分重要的作用，為食品安全標準以及衛生標準提供必要的科學依據。然而，由于食品當中存在糖、蛋白質等成分，為微生物繁殖提供很好的營養環境，從而對檢驗產生干擾，導致微生物檢驗比較困難以及復雜。因此，應當嚴格按照無菌操作的流程以及規范進行操作。

1 無菌操作方法及注意事項

通過對食物微生物進行詳細的檢查、分析，總結出無菌操作方法。無菌的定義是在生活中不包括對生命活動營養細胞情況的保障。無菌制作是用無菌裝備來分析植物構成、細胞接種等方法來提高制作水平，進而可以阻止微生物潛入無菌的環境。通過對微生物的檢查、分析獲知，如果沒有檢查裝備，養殖菌無菌的根基就不可能對抽樣物品進行保護。因此，可以把無菌操作定義為安全保障制作。以下對無菌制作方法應注意的事項進行一些介紹。

第一，在食物微生物檢查、分析的基準上，在無污染的區域范圍中進行普通的抽樣檢查。如，試驗平臺、共同操作平臺、討論平臺等。在觀察病原微生物方面，一定要在生物二級試驗室中進行。其目的就是為了使無菌室內清潔，保障墻四周、桌子上、臺上等的消菌工作。但是在操作前運用紫外線裝備進行30 min的照射。還要在每一個時間段內對沉降菌的信息進行計數、對微生物新陳代謝狀況進行觀察。不許經常在無菌室內走動，避免在無菌室中侃侃大笑。

第二，就是對檢查工作人員的具體要求。例如，踏入試驗室前要洗干凈手，禁止穿上與工作無關的平常著裝，穿上室內所要求的工作服、鞋子、帽子等。

第三，在微生物操作步驟中，打開抽樣物品時要注意檢查人員與抽樣物品間的距離關系，物品沒進行消毒前是禁止與抽樣物品進行觸碰，抽樣物品只允許在短時間內在空氣中暴露，利用無菌器件進行取樣，檢查工作員絕不可將手放在樣品上面及禁止取出來過的樣品再放回去。操作時動作只許慢不許快，裁接裝備在使用前后都要利用灼燒方法進行消毒，吸管嚴禁與嘴巴接觸。

第四，開封袋口或瓶口前，要通過酒精涂擦的方法進行清潔，在液體接種培養方面，禁止將使用液在其他裝備或工作桌上濺灑，確保一個安全干凈的環境。假如真出現這樣的意外，就要用到酒精涂擦，再用消毒液進行清潔。但是具有菌液的玻璃片或吸管要在消毒液中進行消毒。

第五，對物品進行分類、物品設置也要進行分類安放、做出檢查計劃。

2 無菌操作技術在微生物檢驗中的應用

2.1 顯微鏡技術

微生物體積極小，肉眼不便觀察。可以利用顯微鏡裝備來觀看。而在實驗室中光學顯微鏡更易于觀察微生物的形態結構。在使用顯微鏡時，了解染料的技能、涂片技能也是極其重要的。無論在染料過程還是在涂片過程中，都要利用無菌制作來預防對雜菌的污染。如果玻片在操作中被污染，那么以上所做的觀察都是沒有準確保障的。毋庸置疑，在制作階段中，為了達到無菌制作，應對以下幾點進行關注：（1）在實驗室觀看平板栽培物中，一般不采用開瓶檢查，只是利用檢查結果來進行開瓶檢查。如，在移植培種及樣品涂片過程中，可以開縫隙，但要適度，絕不可以完全開瓶；（2）涂片過程，玻片要被架子牢牢夾住，禁止與手進行直接性的接觸，避免細菌受到感染；（3）玻片在用前或是在用后都要進行清潔消毒。

2.2 無菌操作技術

在微生物檢查的過程中接種菌苗、分離操作、移植操作都要排除與雜菌間的干擾，才達到培養體的要求。其中就要營造出無雜菌干擾的工作氛圍，在這個工作氛圍中對無菌制作的要求必須嚴格，才能為制作的安全指數做出質量保證。常態下，無菌接種要在酒精燈周圍操作，要達到操作的嚴格要求，就可以在無菌室內與生物安全、高能清潔工作臺相結合進行工作。無菌制作技能包括無菌范圍、無菌裝備及無菌制作共3個方面。當然，所謂的無菌范圍是具有相對性的。就是在無菌室內環境中所提供的無菌環境，其中需要生物安危等裝備對危害飄浮顆粒進行隔離，確保抽樣物品的安全性、環境的無污染性、人員的安危性。對無菌室的設計要求要達到布局合理性、運作安全性、成本優惠性。與生物安危相比較，更易清潔消毒、外形小、移動性高，但在使用過程中不易于操作。與普通接種制作相比較，處于適中層次。就如致命菌檢查接種制作：高能清潔工作臺的使用率高，而無菌狀況下也是以高細過濾無菌氣體來達到的。然而，無菌裝備常用于微生物的檢查裝備中，其含有滅菌裝備和消毒裝備。滅菌裝備在檢查操作中的滅菌程序，如，稀釋液體、養殖基地、玻璃容器等。在器皿裝備材料的滅菌中，首先要利用紙進行打包整理。但是也有些東西又不能進行滅菌的操作。在消毒材料上，就要關注檢查中操作未能使用的滅菌處理材料，就需要用到消毒的方法。例如，工作裝、稱枰、試管器材等，常用帶有化學性物品處理。最終，實現無菌制作。

2.3 純種分離、培養技術

首先，食品微生物檢測的過程中，為了確定微生物群體，應當將微生物群體從混雜的物體當中分離開來，從而得到純種的培養物。一般情況下，具有根據微生物的不同特點設計培養基，促使微生物大量繁殖。或者采取某些微生物的抑制素等，通過抑制其他微生物，從而將其他無關的菌群淘汰。然后，通過稀釋的方式，在培養基上形成單菌落，保障分離的菌群為純菌群。其次，純種培養技術，微生物檢驗的過程中，純種培養物從器皿當中調換，肉眼無法觀察到其中的污染物質，然而，打開器皿之后，可能導致培養基被空氣中的微生物污染。因此，在微生物的移接過程中，應當保障在無菌的環境下進行嚴格的無菌操作。接種是非常基礎的操作，關鍵是做到無菌，如果操作不嚴格，將導致培養基污染，從而影響檢驗的效果。

3 結語

綜上所述，該文主要論述了無菌操作技術以及操作過程中的注意事項，無菌操作技術在食品的微生物檢測中得到應用并發揮重要作用，只有無菌操作，才能切實保障食品微生物檢驗的可靠性以及準確性。

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