免疫性血小板減少癥患兒免疫功能研究

高長(zhǎng)俊, 張 晴, 楊 慧, 韓 靜

(河北省唐山市婦幼保健院 小兒血液科, 河北 唐山, 063000)

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免疫性血小板減少癥患兒免疫功能研究

高長(zhǎng)俊, 張 晴, 楊 慧, 韓 靜

(河北省唐山市婦幼保健院 小兒血液科, 河北 唐山, 063000)

免疫性血小板減少癥; T細(xì)胞亞群; 免疫功能

免疫性血小板減少癥(ITP)是以血小板免疫性破壞伴巨核細(xì)胞成熟障礙、外周血中血小板減少的出血性疾病，臨床表現(xiàn)主要為皮膚紫癜、黏膜出血、血小板減少、骨髓巨核細(xì)胞增多及成熟障礙等。其發(fā)病機(jī)制與免疫相關(guān)，病前多有病毒感染史，多認(rèn)為血小板表面糖蛋白(GP)與病毒等病原微生物間存在相同或相似的抗原，抗病毒抗體與血小板膜抗原發(fā)生交叉免疫反應(yīng)，但確切機(jī)制復(fù)雜且未完全明確。研究[1]顯示, ITP患兒體內(nèi)存在免疫功能失調(diào)，發(fā)病前多有病毒感染史。外周血T淋巴細(xì)胞的活化、增殖、凋亡異常與ITP的發(fā)生密切相關(guān)。本研究對(duì)唐山市婦幼保健院血液科ITP患兒的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，探討血清免疫球蛋白、T淋巴細(xì)胞亞群的作用，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年6月—2015年6月本院血液科住院治療的初治ITP患兒45例，其中男19例，女26例，年齡1個(gè)月～12歲，平均年齡30.9個(gè)月，均符合免疫性血小板減少癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2], 且骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)符合ITP骨髓象特點(diǎn)，排除既往使用過(guò)激素、免疫抑制劑等治療者。所有ITP患兒均有不同程度的皮膚黏膜出血。選擇同期30名健康兒童作為對(duì)照組，男16例，女14例，年齡2個(gè)月～13歲, 2組年齡、性別差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)應(yīng)用美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特LX流式細(xì)胞分析儀及其配套試劑。IgA、IgG及IgM測(cè)定采用WL-快速免疫消濁比濁法(試劑、指控血清及標(biāo)準(zhǔn)液由浙江夸克生物科技有限公司提供)。

1.3 治療方法

所有ITP患兒入院即給予地塞米松0.2～0.3 mg/(kg·d)靜滴治療，若外周血血小板計(jì)數(shù)≤20×109/L或伴有嚴(yán)重出血情況時(shí)，予血小板輸注及丙種球蛋白400 mg/(kg·d)靜點(diǎn)治療3～5 d。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，對(duì)所有檢測(cè)結(jié)果采用單因素的方差分析以及組間的兩兩比較(LSD法),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

45例ITP患兒均接受地塞米松靜點(diǎn)治療，部分患兒同時(shí)接受丙種球蛋白400 mg/(kg·d)靜點(diǎn)治療3～5 d或輸血小板治療，治療后45例均顯效或良效。治療前, ITP組CD3+T淋巴細(xì)胞百分比、CD3+CD4+T淋巴細(xì)胞百分比及CD3+CD4+/CD3+CD8+均較正常對(duì)照組及ITP治療后顯著減低(P<0.05), CD3+CD8+T淋巴細(xì)胞百分比較正常對(duì)照組及ITP治療后顯著升高(P<0.05), 正常對(duì)照組及治療后ITP組比較，各淋巴細(xì)胞亞群百分比及比值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。治療前ITP組IgA、IgM較治療后及正常對(duì)照組顯著升高(P<0.05), 治療后及正常對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05); IgG治療后較治療前及正常對(duì)照組無(wú)顯著變化(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表1 治療前后ITP患兒與正常對(duì)照淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果

與ITP組治療前比較, *P<0.05。

表2 治療前后ITP患兒與正常對(duì)照免疫球蛋白檢測(cè)結(jié)果

與ITP組治療前比較, *P<0.05。

3 討 論

免疫性血小板減少癥(ITP)是臨床上最為常見(jiàn)的出血性疾病，約占出血性疾病的30%, 表現(xiàn)為血小板破壞過(guò)多伴血小板生成減少，關(guān)于其發(fā)病機(jī)制的研究多集中于T淋巴細(xì)胞及B淋巴細(xì)胞異常、巨核細(xì)胞成熟障礙及血小板破壞加速等多個(gè)方面，但其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明[3]。近年來(lái)雖然發(fā)現(xiàn)了T淋巴細(xì)胞在ITP的發(fā)病過(guò)程中有重要作用[4-5], 但具體機(jī)制尚不清楚。

既往研究[6]表明，T淋巴細(xì)胞按細(xì)胞膜表面分化抗原及其功能不同，可分為CD3+CD4+T淋巴細(xì)胞(誘導(dǎo)性T細(xì)胞Ti/輔助性T細(xì)胞Th)和CD3+CD8+T淋巴細(xì)胞(抑制性T細(xì)胞Ts/細(xì)胞毒性T細(xì)胞Tc), Ti淋巴細(xì)胞能影響Th淋巴細(xì)胞和Ts淋巴細(xì)胞的成熟, Th細(xì)胞能促進(jìn)CD19+B淋巴細(xì)胞、CD3+CD8+T淋巴細(xì)胞活化增殖, Ts細(xì)胞能抑制CD19+B淋巴細(xì)胞的合成分泌抗體，負(fù)性調(diào)節(jié)Tc淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的特異性細(xì)胞毒性作用, Tc細(xì)胞對(duì)帶有特異性抗原的靶細(xì)胞有直接殺傷作用。進(jìn)一步研究[7-8]發(fā)現(xiàn), ITP患者CD3+CD4+T淋巴細(xì)胞下降，主要表現(xiàn)為T(mén)i細(xì)胞下降，而Th細(xì)胞明顯增多; CD3+CD8+增多主要是Tc細(xì)胞增多, Ts細(xì)胞明顯下降，由此推測(cè)Th/Ts細(xì)胞的平衡在自身免疫病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起著重要作用。涂亞蘭[9]研究發(fā)現(xiàn), CD4+和CD8+通過(guò)相互制約和相互誘導(dǎo)而形成T淋巴細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)，兩者水平細(xì)微變化即可決定免疫反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展及類型。另有研究表明, CD3+CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量減少，對(duì)機(jī)體自身反應(yīng)性T細(xì)胞的抑制作用減弱，自身反應(yīng)性CD3+CD8+T細(xì)胞失抑制后活化增殖，導(dǎo)致CD19+B淋巴細(xì)胞的激活，產(chǎn)生大量抗體(包括抗血小板抗體)，引起血小板生存時(shí)間縮短，同時(shí)抑制骨髓巨核細(xì)胞，使其成熟障礙，血小板減少，進(jìn)而發(fā)展成ITP。

本研究中45例ITP患兒治療前CD3+、CD3+CD4+T淋巴細(xì)胞百分比、CD4+/CD8+較對(duì)照組均顯著降低(P<0.01), CD8+較正常對(duì)照組顯著升高(P<0.01), 與文獻(xiàn)報(bào)道一致[10]。提示ITP患兒存在明顯的免疫功能紊亂。治療后較治療前CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+均升高，CD8+減低，顯示經(jīng)激素、丙種球蛋白等相關(guān)治療患兒的免疫紊亂得到糾正，這與馮燕玲等[11]的報(bào)道一致。張焱等[12]研究發(fā)現(xiàn), ITP患兒IgG、IgA及IgM的表達(dá)水平較對(duì)照組顯著低下; 劉文彬等[13]研究發(fā)現(xiàn), ITP患兒的血清IgM含量明顯增高，而IgA、IgG則無(wú)顯著變化。本研究中，血清IgG含量無(wú)顯著變化，可能與病毒感染后IgG暫時(shí)不會(huì)出現(xiàn)明顯變化有關(guān); 血清IgA含量明顯增高可能與病毒感染有關(guān)，因?yàn)椴《靖腥竞罂僧a(chǎn)生抗病毒抗體導(dǎo)致IgA增加。

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2016-10-19

R 558

A

1672-2353(2017)05-201-02

10.7619/jcmp.201705069