制備禽致病性大腸桿菌菌蛻的三種方法比較

胡劍剛，董洪亮，付立霞，左佳坤，吳小卡，米榮升，黃燕，陸珂，陳兆國，韓先干，胡世君

1 西南大學動物科學學院，重慶 402460

2 中國農業科學院上海獸醫研究所，上海 200241

3 揚州大學 動物科學與技術學院 江蘇省人畜共患病學重點實驗室，江蘇 揚州 225009

細菌菌蛻是應用噬菌體 PhiX174的裂解基因E在革蘭氏陰性菌中表達后形成不含細胞質及細胞器的細菌空殼，通常是通過對裂解基因E的嚴格溫度調控實現[1-3]。裂解基因E編碼一種含91個氨基酸的膜蛋白，該蛋白能夠融合在革蘭氏陰性菌的內外膜并使菌膜形成 1個直徑40?200 nm的特異性跨膜通道[4-5]。在滲透壓的作用下，使菌體內容物排出，但內外膜結構和成分基本不變，細菌菌蛻作為一種優良的新型疫苗及佐劑正受到越來越多的關注[6-7]。

細胞穿透肽 (Cell penetrating peptides，CPPs) 是一些能穿透細胞膜的小分子肽，它們一般不超過30個氨基酸，總體多帶正電荷，具有兩極性[8]。CPPs可以充當藥物分子的運載工具，并且有些本身就具有一定的生物學功能[9-10]。發現最早的細胞穿透肽是人免疫缺陷病毒的反式轉錄激活 (Trans-activator of transcription，Tat)蛋白，隨后又在自然界發現和人工合成了各種細胞穿透肽，這些細胞穿透肽不受細胞類型的限制，共價或非共價結合一些核酸、蛋白或顆粒性物質穿過細胞膜進入細胞[11]。細胞穿透肽的研究多集中于對真核細胞的作用，對細菌等原核細胞研究較少。有研究表明，由于原核生物不存在膜修復機制，一些具有抗微生物作用的細胞穿透肽作用于細菌后，能產生類似菌蛻的結構；……