NMDAR1蛋白膜外抗原結構域的重組表達、純化和免疫反應原性鑒定

包玎，李偉，石樂明，李全貞

1 溫州醫科大學 檢驗醫學院與生命科學學院，浙江 溫州 325035

2 復旦大學 生命科學學院，上海 200433

N-甲基-D-天冬氨酸受體1 (NMDAR1) 是谷氨酸受體NMDAR的1型亞基。NMDAR由不同的亞基構成異四聚體，亞基組成主要包括 NR1(NDMAR1)、NR2和 NR3。NMDAR1是 NMDAR受體必不可少的組成亞基，可結合甘氨酸，為該受體的功能單位[1-4]。

人 NMDAR1基因定位于染色體的 9q34.3，由938個氨基酸組成，分子量為105.5 kDa，總長度為4213 bp，開放閱讀框為2814 bp。1991年Moriyoshi用蟾蜍卵母細胞表達系統結合電生理學的方法首次成功克隆出大鼠NMDAR1基因[5]，人與大鼠NMDAR1的氨基酸序列具有99%的同源性。NMDAR1細胞外區域有兩個突出部分，N末端位于細胞外，C末端位于細胞內，中間有3個跨膜片段 (Transmenbrane segments, TM)，細胞外區域包括N末端和激動劑結合區[6]。NMADR1主要包括 3個結構域，分別為氨基末端結構域(Animoacid terminal domain, ATD)、激動劑結合結構域 (Ligand binding domain, LBD) 和跨膜結構域 (Transmembrane domain, TMD)[3]。

NMDAR是一種興奮性神經突觸受體，是谷氨酸受體的重要亞型，主要存在于哺乳動物神經細胞。它不僅參與正常生理過程如神經元的增殖、遷移和塑造，并在許多神經系統疾病，如中風、癲癇和神經性退變等過程中發揮重要作用[7-13]。抗NMDAR抗體首先發現于腦炎伴卵巢畸胎瘤年輕女性患者的血清和腦脊液中，隨后在無潛在腫瘤的腦炎患者中亦證實該抗體的存在[14-20]。進一步研究發現，NMDAR也參與一些免疫性疾病，如神經精神性系統性紅斑狼瘡(NPSLE)。NPSLE是SLE疾病中最難診斷和高風險的疾病亞型。其最顯著的檢測指標是患者血清或腦脊液中存在抗NR2或NR1的自身抗體[21-28]。另外，抗NMDAR腦炎作為一種新型腦炎亞類受到廣泛關注，是一種NMDAR抗體相關自身免疫性腦炎。……