蛋氨酸對奶牛乳腺上皮細胞內(nèi)乳脂合成相關(guān)基因和蛋白表達的影響

趙艷麗 陳 璐 史彬林 郭曉宇 閆素梅

(內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，呼和浩特010018)

蛋氨酸對奶牛乳腺上皮細胞內(nèi)乳脂合成相關(guān)基因和蛋白表達的影響

趙艷麗 陳 璐 史彬林 郭曉宇 閆素梅*

(內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，呼和浩特010018)

本試驗旨在研究蛋氨酸(Met)對奶牛乳腺上皮細胞(BMECs)內(nèi)乳脂合成相關(guān)基因和蛋白表達的影響，以探討Met對乳脂合成的影響機理。將第3代BMECs隨機分為6個處理(每個處理6個重復(fù))，培養(yǎng)液中Met濃度分別為0.13、0.26、0.39、0.52、0.65和0.78 mmol/L。在37 ℃、5% CO2條件下培養(yǎng)48 h后測定BMECs內(nèi)甘油三酯(TG)的含量及乳脂合成相關(guān)基因和過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)與固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1(SREBP1)蛋白的相對表達量。結(jié)果顯示：Met濃度對BMECs內(nèi)TG含量無顯著影響(P>0.05)。0.52～0.78 mmol/L Met處理BMECs內(nèi)脂肪酸結(jié)合蛋白3(FABP3)、乙酰輔酶A羧化酶A(ACACA)和PPARγ基因的相對表達量均顯著高于其他處理(P<0.05)。BMECs內(nèi)脂蛋白脂酶(LPL)基因的相對表達量以0.26～0.39 mmol/L Met處理較高，顯著高于0.65～0.78 mmol/L Met處理(P<0.05)。脂肪酸合成酶(FASN)基因的相對表達量以0.39～0.52 mmol/L Met處理較高，且0.52 mmol/L Met處理顯著高于0.13～0.26 mmol/L和0.65～0.78 mmol/L Met處理(P<0.05)。Met濃度可顯著影響SREBP1和乙酰甘油磷酸脂酰轉(zhuǎn)移酶6(AGPAT6)基因及SREBP1和PPARγ蛋白的表達(P<0.05)，均以0.26 mmol/L Met處理的相對表達量最高。結(jié)果表明，Met濃度影響B(tài)MECs內(nèi)脂肪酸攝取、從頭合成的基因的表達及乳脂合成調(diào)控因子PPARγ和SREBP1的基因和蛋白的表達，Met濃度為0.26～0.52 mmol/L時對BMECs內(nèi)脂肪酸從頭合成及長鏈脂肪酸攝取的促進效果較好。

奶牛；乳腺上皮細胞；蛋氨酸；乳脂

乳脂是牛奶的重要組成成分，也是衡量乳品質(zhì)的重要指標(biāo)。研究表明，氨基酸(AA)作為乳蛋白合成的重要前體物，不僅影響乳蛋白的合成，也是影響乳脂合成與組成的因素之一[1]。蛋氨酸(Met)作為奶牛的必需氨基酸，在對乳蛋白合成影響的同時，對乳腺內(nèi)脂肪酸的從頭合成也具有顯著的影響[2]。因此，深入探討Met對乳脂合成的影響及其機理對改善乳品質(zhì)有重要意義。體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)，皺胃灌注40 g/d的Met后，奶牛乳腺內(nèi)中短鏈脂肪酸(medium and short chain fatty acids,SMCFA)(C4～C14)與長鏈脂肪酸(long-chain fatty acids,LCFA)的含量分別增加11.1%和9.8%[2]。體外研究發(fā)現(xiàn)，30 μg/mL的Met上調(diào)奶牛乳腺上皮細胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)內(nèi)脂肪酸從頭合成基因乙酰輔酶A羧化酶α(acetyl-coenzyme A carboxylase α,ACACA)的相對表達量[3]。可……