子宮內膜癌中淀粉樣肽前體樣蛋白2表達變化及對預后的影響分析

吳媛

·論著·

子宮內膜癌中淀粉樣肽前體樣蛋白2表達變化及對預后的影響分析

吳媛

目的 探討子宮內膜癌中淀粉樣肽前體樣蛋白2(APLP2)的表達變化及對預后影響，為改善患者預后提供參考依據。方法 通過免疫組織化學法對38例子宮內膜癌和42例正常子宮內膜石蠟切片的APLP2表達情況，并收集患者的臨床資料和隨訪結果，分析APLP2的表達與患者臨床資料關系，根據患者APLP2表達情況分為陽性組和陰性組，比較2組患者生存情況。結果 子宮內膜癌組織中APLP2的陽性表達率為28.95%，明顯低于正常子宮內膜組織的85.71%(P<0.05)；APLP2陽性表達與肌層浸潤、雌激素受體表達、分化程度相關(P<0.05)，與年齡、FIGO分期、病理類型、淋巴結轉移無關(P>0.05)；隨訪時間6～36個月，陽性組生存率為81.48%，明顯高于陰性組的55.45%(P<0.05)。結論 子宮內膜癌患者中APLP2呈低表達，其低表達與肌層浸潤和分化程度有關，并可作為患者預后的重要評估指標。

子宮內膜癌；淀粉樣肽前體樣蛋白2；免疫組化；雌激素受體；預后

子宮內膜癌是對女性群體身心健康和生命威脅極大的惡性腫瘤之一，其病死率及發病率呈現出逐年上升，且有趨向年輕化的趨勢[1]。目前，在臨床中對于子宮內膜癌的治療方法主要有化療、放療、激素治療、手術等，對于早期子宮內膜癌患者療效滿意，但由于子宮內膜癌患者早期臨床癥狀不典型，患者難以自覺，多數患者確診時已處于中晚期，此時可能已經出現轉移，且在手術、化療等治療后容易復發，使得患者整體預后較差，其生存期中位數在6～15個月內[2]。近幾年，分子生物學標記物在惡性腫瘤患者的診斷及預后評估中得到了相當廣泛地應用。國外研究顯示，在惡性腫瘤的發生發展過程中淀粉樣肽前體樣蛋白2(APLP2)起到了重要作用，具有調節癌細胞增殖、誘導癌細胞凋亡以及重構癌細胞骨架等作用[3]。基于此，本研究分析了子宮內膜癌患者中APLP2的表達變化及對預后的影響，我們的試驗旨在為改善患者預后提供臨床依據，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2013年6月至2015年6月我院收治的子宮內膜癌患者的資料，病歷資料完整且取得子宮內膜癌石蠟切片的患者納入本研究，共納入38例患者。年齡46～71歲，平均年齡(56.1±6.9)歲；國際婦產科聯盟(FIGO)制定的分期[4]：Ⅰ期10例，Ⅱ期18例，Ⅲ期7例，Ⅳ期3例；分化程度：G1者21例，G2者9例，G3者8例；病理類型：子宮內膜樣內膜癌34例，漿乳癌或透明細胞癌4例；肌層浸潤深度：≤1/2者26例，>1/2者12例；有淋巴結轉移5例，無淋巴結轉移33例；雌激素受體：陽性31例，陰性7例。選取同時期存檔的42例正常子宮內膜石蠟切片作為對照，均來自子宮肌瘤或者子宮肌腺病患者，患者年齡45～70歲，平均年齡(55.4±7.2)歲。

1.2 入選與排除標準

1.2.1 入選標準：①均行手術治療；②行手術治療前均未進行放化療或者其他輔助治療；③病歷資料及隨訪結果保存完整者。

1.2.2 排除標準：①伴有遠處轉移者；②復發患者；③資料不完整者。

1.3 方法

1.3.1 檢測方法:子宮內膜癌與正常子宮內膜石蠟標本均行免疫組織化學法檢測APLP2表達水平，操作流程均嚴格參照說明書進行；所有石蠟標本切片均有陽性對照與陰性對照，其中陰性對照通過PBS代替一抗；顯色試劑盒與免疫組化試劑盒由美國GIBCO公司生產，兔抗人APLP2多克隆抗體由北京中杉金橋生物技術有限公司生產。

1.3.2 結果判定:通過半定量積分法對陽性細胞著色強度與陽性細胞率分別進行分級記分[5]，然后根據二者得分乘積確定APLP2陽性表達；其中染色面積分級記分：0分：0%～5%，1分：6%～25%，2分：26%～50%，3分：51%～75%，4分：76%～100%。染色強度分級記分：0分：陰性，1分：弱陽性，2分：中陽性，3分：強陽性；APLP2表達=染色強度×染色面積，總分為12分，其中陰性：0～2分，陽性：3～12分。

1.4 觀察指標 觀察子宮內膜癌和正常子宮內膜石蠟切片的APLP2表達情況，并對不同臨床病理指標間APLP2陽性表達率進行比較；出院后進行隨訪，隨訪時間截止至2016年6月，比較APLP2陽性與陰性患者生存情況。

1.5 統計學分析 應用SPSS 20.0統計軟件，計數資料采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1APLP2表達情況比較APLP2陽性表達呈現棕黃色染色，主要集中在子宮內膜組織的腺上皮細胞細胞質內；在子宮內膜癌組織中APLP2的陽性表達率為28.95%，明顯低于正常子宮內膜組織(P<0.05)。見表1，圖1。

表1 子宮內膜癌與正常子宮內膜組織APLP2表達情況比較 例(%)

圖1A APLP2在正常子宮內膜組織中表達情況(×400)

圖1B APLP2在子宮內膜癌組織中表達情況(×400)

2.2 不同臨床病理指標間APLP2陽性表達率比較APLP2陽性表達與肌層浸潤、雌激素受體表達、分化程度相關(P<0.05)，與年齡、FIGO分期、病理類型、淋巴結轉移無關(P>0.05)。見表2。

2.3 生存分析 對患者的隨訪時間為6～36個月，中位隨訪時間為23個月；根據患者APLP2的表達情況分為陽性組和陰性組。截至隨訪結束時間，38例患者中死亡11例；其中APLP2陽性組患者存活5例(55.45%)，死亡6例(54.55%)；APLP2陰性組患者存活22例(81.48%)，死亡5例(18.52%)；陽性組生存率明顯高于陰性組，差異有統計學意義(χ2=4.932，P<0.05)。

表2 不同臨床病理指標間APLP2陽性表達率比較 例(%)

3 討論

APLP2為Ⅰ型跨膜蛋白，位于11q24-25上，mRNA長度約為3 289bp，其氨基酸序列和APLP1、淀粉樣蛋白前體存在廣泛同源性與區域保守性，均同屬于一個家族，其結構特點為單次跨膜結構[6]。在近年來的相關發現指出，APLP2和人胎盤中所發現的人CDEBP、精子膜蛋白抗體YWK-Ⅱ以及淀粉樣前體蛋白同源性同屬一種蛋白質[7]。國內外多項研究顯示，APLP2蛋白基因在機體各個組織中均存在表達，Weyer等[8,9]的研究結果表明，APLP2參與了機體神經細胞分化和成熟的生理過程。早期亦有相關研究顯示，在生殖系統中APLP2發揮著重要作用，如Vanage等[10]的動物試驗指出，使用APLP2 抗體后可有效降低雄性小鼠與雌性小鼠的生育能力；同時敲除APLP2與淀粉樣蛋白前后可誘導不育。隨著對APLP2研究的逐步深入發現，在惡性腫瘤發生發展過程中APLP2發揮著一定作用，具有調節癌細胞分化、誘導癌細胞凋亡等作用。Pandey等[11]學者在胰腺癌患者中的發現，APLP2能夠對通過細胞骨架蛋白actin造成影響，從而促進癌細胞侵襲和遷移。

本研究中發現，在子宮內膜癌組織中APLP2的陽性表達率為28.95%，明顯低于正常子宮內膜組織的85.71%。研究結果提示，在子宮內膜癌中APLP2存在者低表達現象。楊思勤等[12]的相關研究中亦指出，在子宮內膜癌組織中APLP2mRNA水平顯著低于正常的內膜組織，這與本研究結果相近。進一步分析不同臨床病理指標間APLP2陽性表達率發現，APLP2陽性表達與肌層浸潤、雌激素受體表達、分化程度相關。研究結果提示，在子宮內膜癌中APLP2陽性表達與患者的肌層浸潤和分化程度有關，隨著肌層浸潤程度和分化程度的增加，APLP2陽性表達逐漸降低。同時，本研究亦發現，APLP2陽性表達與子宮內膜癌患者有無淋巴結轉移、年齡、FIGO分期、病理類型并無明顯關系，這提示APLP2可能與子宮內膜癌的淋巴結轉移并無密切關系，不過本研究例數偏少，尚需要進一步研究證實。

目前，在子宮內膜癌患者中以藥物聯合手術的綜合治療方案取得了顯著效果，尤其是一些早期患者的預后得到明顯改善。不過臨床顯示，17%～51%的子宮內膜癌患者會發生遠處轉移，6%～21%出現局部復發，而復發患者轉移是導致子宮內膜癌患者死亡的主要因素[13]。因此，積極探尋反映子宮內膜癌患者病理過程的相關分子標志物，對降低病死率具有重要意義。為了更深入分析APLP2低表達對子宮內膜癌患者術后生存狀況的影響，本研究結合隨訪資料對患者生存率進行了分析。本研究發現，經過6～36個月的隨訪，38例患者共死亡11例，其中APLP2陽性患者存活5例，死亡6例；而陰性患者存活22例，死亡5例；APLP2陰性患者的存活率明顯低于陽性患者。研究結果提示，APLP2低表達的患者其預后較差。不過這一研究結果與既往APLP2在神經腫瘤、胰腺癌等的研究中結論[14]并不一致。其作用機制可能為APLP2存在著多個選擇性的剪切位點，能夠產生多個相關的轉錄本，從而出現了APLP2在不同組織中具有不同的功能與表達形式[15，16]。

綜上所述，在子宮內膜癌患者中APLP2呈低表達，其低表達與肌層浸潤深度和分化程度有關，并可作為患者預后的重要評估指標。不過本研究樣本量偏少，在隨后的研究中可擴大樣本量進一步研究證實，并對其調控機制進行深入分析。

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2 李耀,王興紅.化療對高危因素子宮內膜癌患者預后及生活質量的影響.中國性科學,2014,23:32-34.

3MaW,ZhangTF,LuP,etal.Partialleastsquaresbasedgeneexpressionanalysisinestrogenreceptorpositiveandnegativebreasttumors.EurRevMedPharmacolSci,2014,18:212-216.

4MilgromSA,KollmeierMA,Abu-RustumNR,etal.PositiveperitonealcytologyishighlypredictiveofprognosisandrelapsepatternsinstageIII(FIGO2009)endometrialcancer.GynecolOnc,2013,130:49-53.

5 肖波,余桂梅.GPR30陽性表達對子宮內膜癌患者預后的影響及其與雌、孕激素受體表達的相關性.安徽醫藥,2016,20:538-540.

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10VanageG,LuYA,TamJP,etal.Infertilityinducedinratsbyimmunizationwithsyntheticpeptidesegmentsofaspermprotein.BiochemBiophysResCommun,1992,183:538-543.

11PandeyP,RachaganiS,DasS,etal.Amgloidprecuesor-likeprotein(APLP2)offeotsactincytoskeletonandincreasespancreaticcancergrouthandmetastasis.Oncotarget,2015,6:2064-2075.

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15YeoJC,WauAA,LuoL,etal.DistinctrolesforAPPL1andAPPL2inregulatingtoll-likereceptor4singnalinges.Traffic,2016,17:1014-1026.

16 康彩梅,王振芬,楊改中,等.VEGF和Ki-67在子宮內膜癌中的表達及臨床意義.河北醫藥,2015,37:2607-2609.

The changes of expression levels of amyloid precursor-like protein 2 in endometrial carcinoma and its effects on patient’s prognosis

WUYuan.

GeneralHospitalofShandongProvincialYankuangGroup,Shandong,Zoucheng273500,China

Objective To investigate the expression of amyloid precursor-like protein 2(APLP2) in endometrial carcinoma, and to explore its effects on patient’s prognosis in order to provide reference for improving the prognosis of patients.Methods The xpression levels of APLP2 were detected by immunohistochemistry in 38 cases of endometrial carcinoma tissues and 42 cases of normal endometrium tissues.Moreover the clinical data and follow-up results were collected to analyze the correlation between expression of APLP2 and clinical data.Besides these patients were divided into APLP2 positive expression group and APLP2 negative expression group,and the survival status of patients was observed and compared between two groups.Results The positive expression rate of APLP2 in endometrial carcinoma tissues was 28.95%,which was significantly lower than that (85.71%) in normal endometrial tissues (P<0.05).ThepositiveexpressionofAPLP2wascorrelatedwithmuscularlayerinfiltration,estrogenreceptorexpressionanddifferentiationdegreeofendometrialcarcinoma(P<0.05),however,which was not correlated to patien’s age,FIGO staging,pathological type,lymph node metastasis (P>0.05).After6～36monthfollow-up,thesurvivalrateinAPLP2positiveexpressiongroupwas81.48%,whichwassignificantlyhigherthanthat(55.45%)inAPLP2negativeexpressiongroup(P<0.05).Conclusion The low-expression of APLP2 exists in patients with endometrial cancer,which is correlated to muscular layer infiltration and differentiation degree of tumor,moreover,which can be regarded as as an important index to evaluate patient’s prognosis.

endometrial carcinoma；amyloid precursor-like protein 2；immunohistochemistry；estrogen receptor；prognosis

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.07.009

273500 山東省鄒城市，山東省兗礦集團總醫院

R

A

1002-7386(2017)07-0995-04

2016-10-22)