中國-東盟進出口水果中殺蟲雙殘留量測定

凌經昌，譚 靈，蔣新英，劉曉松，吳玉杰

（1.憑祥出入境檢驗檢疫局，廣西憑祥 532600；2.廣西出入境檢驗檢疫局技術中心，廣西南寧 530028）

中國-東盟進出口水果中殺蟲雙殘留量測定

凌經昌1，譚 靈1，蔣新英1，劉曉松2，吳玉杰2

（1.憑祥出入境檢驗檢疫局，廣西憑祥 532600；2.廣西出入境檢驗檢疫局技術中心，廣西南寧 530028）

殺蟲雙是一種沙蠶毒素類殺蟲劑。為建立一種適合中國-東盟進出口水果殺蟲雙殘留量測定的方法，試驗樣品經鹽酸溶液提取、硫化鈉溶液衍生化、萃取凈化，采用氣相色譜法（GC-FPD，S濾光片）測定殺蟲雙殘留量，并通過氣相色譜-質譜法進行驗證。結果表明，在0.01～0.05 mg/kg添加水平范圍內，殺蟲雙的平均添加回收率為73.4%～103.3%，相對標準偏差為1.1%～5.7%，最小檢出量（MDL）為0.001 mg/L。該方法的雜質干擾少，準確性和靈敏度均滿足水果中殺蟲雙殘留量測定的要求。

殺蟲雙；中國-東盟；水果

0 引言

殺蟲雙是我國自行開發的一個農藥新品種，是沙蠶毒素衍生物[1]，于1976年被貴州化工研究所等單位開發[2]。該類農藥具有高效、低毒、安全和有一定選擇殺蟲作用等許多優點，經過20多個省、市的大田藥效試驗，證明殺蟲雙對水稻、麥類、蔬菜、果樹等多種農作物主要害蟲均有良好的防治作用[3]。目前，殺蟲雙的檢測方法主要有非水滴定法、薄層-溴化法[4]、高效液相色譜法[5-6]、化學反應-氣相色譜法[7-8]、氣相色譜-質譜聯用法[9-10]、高效液相色譜串聯質譜法[11]。相對而言，與其他農藥殘留的研究相比，關于殺蟲雙在水果等作物中殘留量研究檢測方面文獻報道較少。

殺蟲雙是一種雙鈉鹽，在水溶液中的溶解度很大，易溶于甲醇和熱乙醇[11]，因此農產品中殘留的殺蟲雙難以提取到有機溶劑中，難以提取濃縮和檢測。試驗選擇化學反應-氣相色譜法對殺蟲雙含量進行檢測，將樣品中的殺蟲雙在堿性條件下轉化為沙蠶毒素[13]，通過氣相色譜（GC-FPD，S濾光片） 進行檢測，測定進出口水果樣品中的殺蟲雙殘留量，用氣相色譜-質譜法進行驗證試驗。對殺蟲雙在水果上前處理條件和色譜條件進行了優化，使測定的平行性好，縮短了分析時間，此方法操作簡單、定量準確，為殺蟲雙在水果上的殘留檢測提供了理論依據。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

儀器：GC-2014型氣相色譜儀、帶硫磷檢測器（FPD）、Rtx-1701型30 m×0.25 mm×0.25 μm石英毛細管柱、恒溫水浴鍋、組織搗碎機、離心機、混勻器、恒溫水浴鍋等。

驗證試驗采用儀器：安捷倫7890A-5795型質譜儀（MSD），安捷倫HP-5型色譜柱。

試劑：乙酸乙酯，色譜純；甲醇、鹽酸為優級純；氫氧化鈉、硫化鈉，分析純。經空白試驗氣相色譜檢驗無被測組分。

殺蟲雙標樣：質量濃度為100 μg/mL，農業部環境保護科研監測所研制。

1.2 樣品前處理

1.2.1 提取

稱取5.0 g試樣（精確到0.001 g） 于15 mL具塞離心管中，加入約10 mL 0.1 mol/L的鹽酸溶液，在振蕩器上振蕩提取30 min后，以轉速3 500 r/min離心5 min，將上清液轉入50 mL離心管。殘渣再按上述步驟提取2次，合并提取液。

1.2.2 衍生化

用0.1 mol/L的鹽酸溶液和0.1 mol/L的氫氧化鈉溶液調節上述濾液的pH值至8.5～9.0，加入2 mL 0.1 mol/L硫化鈉溶液（新配），在70℃水浴中保溫2 h（或放置過夜）。此步操作，標準系列與樣品提取液同時進行。

1.2.3 凈化

在反應管中加入適量氯化鈉，搖勻，加等量試樣溶液體積的乙酸乙酯，振搖使萃取完全，靜置分層，將乙酸乙酯層經無水硫酸鈉濾入旋轉濃縮瓶中。再用乙酸乙酯萃取試樣溶液2次，同樣經無水硫酸鈉濾入旋轉濃縮瓶中。

1.2.4 濃縮

于45℃水浴上旋轉蒸發除去乙酸乙酯，直至瓶中剩余少許時立即取出，殘渣用甲醇溶解并定容至1 mL，過0.22 μm濾膜后裝瓶，供GC-FPD測定（S濾光片）和氣相色譜-質譜儀使用。

1.3 色譜條件

1.3.1 氣相色譜條件

進樣體積1 μL，無分流，島津Rtx-1701型30 m× 0.25 mm×0.25 μm石英毛細管色譜柱，初始溫度80℃，保留1 min，以30℃/min升至140℃，保留1 min，再以20℃/min升至230℃，保留5 min，程序總時間13.5 min，進樣口溫度220℃，檢測器（FPD，S濾光片）溫度250℃。在此色譜條件下，沙蠶毒素的保留時間為11.631 min。

殺蟲雙標準品（10 μg/L）衍生化成沙蠶毒素的色譜圖見圖1。

1.3.2 氣相色譜-質譜儀條件

儀器：安捷倫7890A-5795型質譜儀，安捷倫HP-5型色譜柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm），進樣量1μL，無分流，溶劑延遲4 min，進樣口溫度250℃，MSD接口溫度280℃，離子源溫度230℃；升溫程序為初始溫度70℃，保留2 min，以20℃/min升至230℃，保持7 min。在此色譜條件下，沙蠶毒素的保留時間為9.256 min。選擇離子監測：殺蠶毒素的分子量為149，選擇149為定量離子和104，223為定性離子。

殺蟲雙標準品（10 μg/L）衍生化成沙蠶毒素的質譜圖見圖2，殺蟲雙標準品衍生化成沙蠶毒素的離子譜圖見圖3。

圖1 殺蟲雙標準品（10 μg/L）衍生化成沙蠶毒素的色譜圖

圖2 殺蟲雙標準品（10 μg/L）衍生化成沙蠶毒素的質譜圖

圖3 殺蟲雙標準品衍生化成沙蠶毒素的離子譜圖

1.4 線性關系與檢出限

（1）線性相關性。提取的樣品溶液為溶劑，配置殺蟲雙系列標準溶液：0，10，20，30，40，50 μg/L，以所得響應值（峰面積）Y的對數與質量濃度X進行回歸分析。得到的回歸曲線為lgY=0.004 4X+6.675 7，線性相關系數為0.996 8，線性關系良好。

殺蟲雙標準系列峰面積及對數見表1，沙蠶毒標準曲線見圖4。

（2）關于檢出限的確定。以噪音信號的10倍確定方法的定量下限，結合樣品的稱樣量和最終定容體積，殺蟲雙在水果中的檢出限為1 μg/kg。

2 結果與討論

2.1 樣品前處理方法的選擇

（1）提取劑的選擇。依反應方程計算，為充分提取，5.0 g水果樣品中加入了10 mL不同濃度（0.1，0.2，0.5 mol/L）的鹽酸溶液提取2次，加標回收率都在75%～103%，表明鹽酸溶液的濃度對水果提取回收率的影響不大，因而選擇0.1 mol/L的鹽酸溶液作為提取劑。

表1 殺蟲雙標準系列峰面積及對數

圖4 沙蠶毒標準曲線

（2）萃取劑的選擇。根據文獻分別使用了石油醚、乙酸乙酯、三氯甲烷作為萃取劑[7]，比較萃取效果。試驗結果表明，3種溶劑提取回收率均在90%以上。石油醚提取分析譜圖出現少量雜峰，三氯甲烷和乙酸乙酯的萃取效果較好且能得到更為理想的峰形，考慮到三氯甲烷屬易制毒試劑，購買時需要嚴格審批，故最終選擇乙酸乙酯作為萃取試劑，用甲醇置換。

（3）衍生化條件的選擇。根據文獻[8]對比了不同pH值、加入的衍生化試劑硫化鈉溶液的濃度和用量，以及衍生化反應所需要的時間對衍生化反應的影響。試驗表明，水果樣品衍生化在溶液的pH值為8.5～9.0時，加入衍生化試劑2 mL 0.2 mol/L的硫化鈉溶液，放置8 h以上，衍生化產物和穩定性可以滿足要求，考慮到試驗的統籌安排，選擇靜置過夜（8～12 h）。

2.2 回收率和精密度試驗

以火龍果、西瓜、葡萄、毛荔枝、柑橘、柿子、龍眼、哈密瓜為樣品，用以上討論試驗方法分別進行殺蟲雙加標回收試驗及空白基質加標試驗。室內回收率試驗選擇包括測定低限和最高殘留限量在內的3個不同水平，每個水平測定6次。

回收率和相對標準偏差結果（n=6）見表2。

從以上的試驗可以看出線性范圍良好，從表2中可看出，當樣品中殺蟲雙添加水平為0.01～0.05 mg/kg時，在8種進出口水果中的回收率為73.4%～103.3%，相對標準偏差為1.1%～5.7%。在上述儀器條件下，殺蟲雙最小檢出量為1.2×10-9g。

表2 回收率和相對標準偏差結果（n=6）

3 結論

建立了一種用鹽酸溶液提取、加入硫化鈉溶液衍生化測定中國-東盟進出口水果中殺蟲雙殘留量的方法，此方法操作簡單，準確性及靈敏度均滿足農藥殘留檢測的要求。

[1]唐太斌.沙蠶毒系新型殺蟲劑：殺蟲雙的研究 [J].農藥，1980（4）：12-16．

[2]唐太斌．沙蠶毒系農藥研究與應用展望 [J].貴州化工，1984（1）：40-49．

[3]劉乾開，朱國念．新編農藥使用手冊 [M].上海：上海科學技術出版社，1999：453-454.

[4]陳夏嬌，許加文.殺蟲雙水劑3種分析方法的比較 [J].廣西植保，2002，15（1）：3-5.

[5]中華人民共和國衛生部.GB/T 14929.8—1994大米中殺蟲雙殘留量測定方法 [S].北京：中國標準出版社，1994.

[6]中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局.GB 8200—2001殺蟲雙水劑 [S].北京：中國標準出版社，2001.

[7]唐亮，李偉聲，周游，等.殺蟲雙在甘蔗上的消解動態研究 [J].西南農業學報，2013（2）：259-262.

[8]李曉娜，李雄，劉龍騰，等.氣相色譜法測定水稻上的殺蟲雙 [J].廣州化工，2012（23）：105-106，154.

[9]張曉波．氣相色譜－質譜法分析鑒定魚體內殺蟲雙 [J].理化檢驗-化學分冊，2005，41（9）：633-635．

[10]程雪梅，張雪曼，蘇青云.氣相色譜-質譜法測定荔枝、龍眼中殺蟲雙殘留量 [J].分析測試學報，2006，25（增刊）：116-117，119．

[11]黃健祥，路大海，丁晨紅，等.高效液相色譜-串聯質譜法快速測定甘蔗中殺蟲雙殘留量 [J].食品科學，2015（16）：253-255.

[12]蔡馬，姜建國，賀立紅，等.殺蟲雙對杜氏鹽藻生長和生理生化的影響 [J].華南農業大學學報，2013（1）：73-77.

[13]羅志明，李文鳳，黃應昆，等.3.6%殺蟲雙顆粒劑防治甘蔗螟蟲藥效試驗 [J].農藥，2010（5）：79-80.◇

Determination of Dimehypo in the Fruit Trade of Import and Export from China-ASEAN

LING Jingchang1，TAN Ling1，JIANG Xinying1，LIU Xiaosong2，WU Yujie2
（1.Pingxiang Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau，Pingxiang，Guangxi 532600，China；2.Technology Center of Guangxi Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau，Nanning，Guangxi 530028，China）

Dimehypo is a kind of pesticide belongs to nereistoxin.A suitable method for determination of dimehypo residues in the fruit trade of import and export from China-ASEAN is established.The samples are extracted by hydrochloric acid solution，after derivatization by sodium sulfide solution，extraction and purification，then determined by gas chromatography（GCFPD，S filter），and confirmed by GC-MS.The results show that the average recovery rate is 73.4%～103.3%and the relative standard deviation is 1.1%～5.7%in the range of 0.01～0.05 mg/kg.MDL of the method is 0.001 mg/L.The accuracy and sensitivity of the method are satisfied with determination of dimehypo residues in fruits.

dimehypo；China-ASEAN；fruit

TS255.7

A

10.16693/j.cnki.1671-9646（X）.2017.01.054

1671-9646（2017）01b-0056-03

2016-11-16

質檢公益性行業科研專項項目（201410080）；廣西檢驗檢疫科技項目（2012GXCIQ004）。

凌經昌（1974— ），男，碩士，工程師，研究方向為進出口食品安全檢測。