腫瘤標志物CA125研究

張昊岳

（芮城縣人民醫院，山西 運城 044600）

在正常情形之下，CA125在胎兒時期是由胚腔上皮與羊膜表現出來，在成人體內只要是由胚腔上皮發展出來的組織皆可發現微量的CA125，如肋膜，心包膜，腹膜，輸卵管上皮，子宮內膜與子宮頸等。正常卵巢組織并無CA125。用于腫瘤的偵測時，這種CA125抗原另可由婦科癌癥，乳癌，肺癌，大腸癌中發現[2]。

CA125的化學成分迄今仍未完全確定，目前認為是一種高分子量的醣蛋白，其中能與OC125反應的最小次單位之分子量為200kD。最近也發展出另一種類似的單株抗體，稱之為M11，可以提供第二代的免疫分析，所偵測出的抗原稱之為CA125-II。

1 CA125的檢測方式

目前CA125的檢測方式主要為ELISA的三明治法，但是此法存在著缺點，其一為使用之兩種CA125抗體需要辨別CA125抗原上之不同表位，避免兩種抗體互相競爭抗原上的表位而使得量測失準，其二為在實驗流程中若使用一些化學修飾可能會影響CA125抗體抗原之結合[2]。而其他類型之檢測法也相繼被提出，如表面電漿波檢測之方式，微流道檢測，以及各種電化學檢測法均被運用于CA125抗原之檢測上。

而血液中CA125抗原檢測正常值定在小于35U/ml，只有1%的健康成人血液中的CA125濃度會大于35U/ml。停經后的婦女如果CA125指數上升，就必須要趕快接受進一步檢查，因為停經后的婦女如果CA125上升又合并發現有卵巢腫瘤，其罹患卵巢癌的機率可高達90%[2]。

2 CA125檢測

2.1 CA125抗體抗原復合體之光學紋理比較

本實驗比較單純抗體、抗原以及抗體抗原復合體之光學紋理，為了以同一個重量體積濃度來比較，將濃度0.0001、0.001、0.002、0.005、0.01、0.05、0.1、0.2、0.5、1與2μg/ml之CA125抗體與CA125抗原，在相同濃度下以體積比1：1的比例混合。在此混合的溶液中，CA125抗體的濃度與CA125抗原的濃度皆為原本的一半，但是試管中的蛋白質總濃度不變。取2μl相同濃度之CA125抗體、抗原及抗體抗原免疫復合體各別滴在玻璃基板上，制作成含有不同蛋白質之液晶盒，灌入HDN液晶后，在偏光顯微鏡下觀察，其在6個不同濃度之下的光學紋理，由Qt所計算之11種不同濃度的光學強度。CA125抗體與CA125抗原混合的溶液在濃度范圍0.1ng/ml～0.5μg/ml其亮度平均值皆較單純只有CA125抗體或是CA125抗原來的強，由于濃度在0.1μg/ml以下其強度差異較小，難以肉眼觀察，因此使用TTEST統計分析所得之p-value來判定實驗組別之間的差異程度，并定義p-value小于0.001為顯著差異。

2.2 CA125抗體反應的光學紋理比較

本實驗中取濃度0.1μg/ml的CA125抗原與SSAT抗體各100μl在試管中進行混合，反應6個小時之后取每滴2μl滴在玻璃基板上，等其自然陰干后制成液晶盒，于偏光顯微鏡下觀察，并與濃度0.1μg/ml的CA125抗原、SSAT抗體與CA125抗體抗原復合體的光學紋理做比較，其結果中SSAT抗體與CA125抗原的混合溶液其光學紋理的亮度平均為7.6±1.3（arbitraryunits），而CA125抗體抗原復合體其光學紋理的亮度平均為57±6.7，代表專一結合的CA125抗體抗原復合體可產生較無法結合的SSAT抗體與CA125抗原更高的光學訊號。此外，SSAT抗體的光學紋理平均強度為28.0±6.9，與CA125抗原作用后光學紋理亮度下降為7.6±1.3，代表此結果并不是因為SSAT抗體原本的光學紋理亮度較弱所導致，而是因為SSAT抗體無法與CA125抗原產生復合體，所以蛋白質彼此之間無法克服水化層的靜電斥力而均勻分散于玻璃基板表面，且因為CA125抗原的光學紋理強度較SSAT抗體弱，導致等體積混合時反而光學紋理強度較SSAT抗體來的弱。

3 總 結

研究中，同一濃度與種類的蛋白質光學紋理亮度的標準偏差偏高，顯示檢測結果的再現性與穩定性仍有待提升，且期待后人能持續改進液晶免疫偵測技術，例如：借著抗體與抗原混合后會生成抗體抗原復合體而使的光學紋理增加的現象，再由其增加的速度曲線來判定溶液中含有的欲測抗原的濃度，進而達到量化且多重檢測的目標，并應用于人體血清的檢測。

[1] 磁珠法在抗酸桿菌快速檢測中可行性的研究[J].唐淼龍.中國實驗診斷學.2013(10).

[2] 卵巢癌血清CA125臨界值探討[J].李秋紅,黃 卉.重慶醫學.2003(07).

[3] 腫瘤標志物的研究與臨床應用評價[J].范振符,陳智周.標記免疫分析與臨床.2002(02).