細胞DNA倍體分析及CYFRA21-1、CEA、CA125水平檢測在老年良惡性胸腔積液診斷中的價值

王彩霞 劉崇梅 陽 娟 毛 敏 黃柳炎 毛 霞 陳 萍

(岳陽市一人民醫院，湖南 岳陽 414000)

細胞DNA倍體分析及CYFRA21-1、CEA、CA125水平檢測在老年良惡性胸腔積液診斷中的價值

王彩霞 劉崇梅1陽 娟1毛 敏1黃柳炎1毛 霞2陳 萍2

(岳陽市一人民醫院，湖南 岳陽 414000)

目的 探討胸腔積液中細胞DNA倍體分析與聯合檢測CYFRA21-1、CEA、CA125在其良惡性鑒別診斷方面的應用價值。方法 選取80例惡性及70例良性胸腔積液患者，平均年齡(64±3)歲，分別行CYFRA21-1、CEA、CA125檢測及細胞DNA倍體分析。結果 惡性胸腔積液組CYFRA21-1、CEA、CA125的含量明顯高于良性胸腔積液組(P<0.05)；細胞DNA倍體分析法聯合CYFRA21-1、CEA、CA125檢測的靈敏性及特異性均高于CYFRA21-1、CEA、CA125的測定(P<0.05)。結論 在胸腔積液良惡性的鑒別診斷方面，細胞DNA倍體分析聯合CYFRA21-1、CEA、CA125檢測法具有更好的診斷價值。

胸腔積液；細胞DNA倍體分析；CYFRA21-1；CEA；CA125

胸腔積液是臨床常見的癥狀，單憑某一種診斷方法很難對其明確診斷。傳統的診斷胸腔積液良惡性的方法是腫瘤標志物的測定或常規細胞學涂片，無論采取哪種方法，都不能對其及時做出明確診斷，而及時診斷胸腔積液的良惡性對臨床治療是至關重要的。本課題擬測定胸腔積液中腫瘤標志物細胞角蛋白19(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)及糖類抗原(CA)125的含量，同時對其細胞沉渣進行DNA倍體分析，比較其在診斷良惡性胸腔積液的價值。

1 資料與方法

1.1 一般材料 我院2013年9月至2014年8月胸腔積液患者150例，男79例，女71例，平均年齡(64±3)歲。良性胸腔積液70例，惡性胸腔積液80例，惡性胸腔積液患者均經病理活檢或手術明確診斷為肺癌患者，良性胸腔積液為腎衰竭、結核等病人。

1.2 方法 取胸腔積液50 ml，3 000 r/min離心20 min，取上清液聯合檢測其中CYFRA21-1、CEA及CA125的含量，取細胞沉渣制片，對其進行細胞DNA倍體分析。

1.2.1 胸腔積液CYFRA21-1、CEA、CA125的測定 采用化學發光分析儀及配套試劑盒(均由美國雅培制藥有限公司提供)，嚴格按照儀器及試劑盒的說明書嚴格操作。

1.2.2 胸腔積液細胞沉渣細胞DNA倍體分析 采用麥克奧迪醫療診斷系統有限公司提供的試劑盒，嚴格按照說明書操作對細胞沉渣進行特殊染色，并用該公司提供的Motictometer全自動細胞圖像分析系統對所有Feulgen染色片進行掃描處理。標本染色質量控制采用標準片作對照。

1.2.3 結果判讀 腫瘤標志物CEA≥10 ng/ml，CA125≥35 U/ml，CYFRA21-1≥3.39 ng/ml視為陽性。細胞DNA倍體分析判定標準〔1〕：采用細胞DNA指數(即DI值)判定，在直方圖中，DI值有 3 個或更多的異倍體細胞(DI值>2.5)出現為陽性；無DI值>2.5的異倍體細胞出現為陰性。

1.2.4 統計學方法 采用SPSS17.0統計軟件進行χ2檢驗。

2 結 果

2.1 80例惡性胸腔積液及70例良性胸腔積液中CYFRA21-1、CEA、CA125的含量測定結果及細胞DNA倍體分析 惡性胸腔積液中三種腫瘤標志物的含量明顯高于良性胸腔積液(P<0.05)。惡性胸腔積液細胞DNA倍體分析陽性率高于良性胸腔積液(P<0.05)。見表1。

表1 兩組標本細胞DNA倍體分析及CYFRA21-1、CEA、 CA125的含量比較

與良性胸腔積液比較：1)P<0.05

2.2 單用及聯用細胞DNA倍體分析法、CYFRA21-1、CEA、CA125的含量鑒定惡性胸腔積液 細胞DNA倍體分析法分別聯合CYFRA21-1、CEA、CA125含量測定法的靈敏性及特異性明顯高于單純CYFRA21-1、CEA、CA125的含量測定法(P<0.05)，細胞DNA倍體分析法聯合CYFRA21-1、CEA、CA125含量測定法能提高惡性胸腔積液的靈敏性及特異性，尤其是特異性，可以高達100%。見表2。

表2 單用及聯用細胞DNA倍體分析和腫瘤標志物檢測對 惡性胸腔積液診斷的靈敏性及特異性〔n(%)〕

1)與單用CYFRA21-1比較；2)與單用CEA比較；3)與單用CA125比較；4)與其他方法比較：P<0.05

3 討 論

在中國，惡性疾病累及胸膜導致胸腔積液是繼肺結核之后的第二大主要原因，明確惡性胸腔積液的原因對治療惡性胸腔積液是至關重要的，影響惡性胸腔積液患者生存率的最重要的因素是腫瘤的來源〔2〕。胸腔積液在臨床是常見的癥狀，它的出現不僅僅是由惡性腫瘤引起，有些良性疾病，比如腎衰竭、心衰竭，肺結核、胸膜炎等也可以導致胸腔積液。在老年人，主要表現為肺部惡性腫瘤或結核性胸膜炎，及時對胸腔積液做出良惡性的診斷，就可以為臨床提供治療指導。CYFRA21-1是上皮細胞支架蛋白，主要分布在上皮細胞，尤其是單層上皮細胞，在該類上皮來源的惡性腫瘤組織中的含量明顯升高〔3〕。CEA升高常見于大腸癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌、甲狀腺髓樣癌等。但吸煙、妊娠期和心血管疾病、糖尿病、非特異性結腸炎等疾病，15%～53%的病人血清CEA也會升高。CA125最常見于上皮性卵巢腫瘤患者的血清中，其診斷的敏感性較高，但特異性較差。腫瘤標志物多種多樣，單一的腫瘤標志物更是沒有很好的靈敏性及特異性，臨床應用價值有限〔4〕。所以多數學者主張多種腫瘤標志物聯合使用，以提高診斷價值〔4～8〕。有學者測定了惡性血清及胸腔積液中CEA的含量明顯高于良性組〔3〕，在本課題中，惡性胸腔積液中CYFRA21-1、CEA、CA125的含量明顯高于良性胸腔積液，與上述報道一致。細胞DNA倍體分析是近幾年迅速發展起來的一種新型技術，在細胞學良惡性診斷方面有著不可替代的優越性，它從DNA水平對細胞進行分析，以直方圖和點陣分布圖的形式描繪出細胞中非整倍體細胞的個數。但是也有其不足之處，比如掃描結果直接受制片質量的影響，易將玻片上的污點或重疊的細胞核誤認為是異型細胞核，所以當出現該情況時，技術員應該重新制片，在顯微鏡下辨別可疑細胞核。在用該方法檢測80例惡性胸腔積液時，出現了61例陽性，19例陰性，19例陰性標本中有17例標本的細胞DNA掃描時發現1-2個細胞DNA異倍體，說明這17例標本中存在異型細胞，只是沒有達到該測量方法的陽性判讀標準，隨著病情的繼續發展，或許不久就會成為陽性標本。另外2例標本為陰性，分析原因估計是病人出現了癌栓堵塞淋巴管導致胸腔積液，而積液中的細胞未出現異型。70例良性胸腔積液中有1例出現了陽性，查閱其臨床資料，該患者為肺結核患者，可能是該患者的結核桿菌感染導致了間皮細胞的增生活躍，在細胞DNA掃描時誤將增生的間皮細胞判讀為異型癌細胞。

由此可見，單純地依靠腫瘤標志物的測定，很難對胸腔積液進行精確診斷。某一種或兩種標志物升高時不能武斷的診斷為惡性胸腔積液，其濃度沒有出現升高也不能武斷的診斷為良性胸腔積液。將多種腫瘤標志物聯合起來檢測，能提高胸腔積液診斷的靈敏性及特異性。細胞DNA倍體分析法也會有個別病例誤診或漏診，將細胞DNA倍體分析與多種腫瘤標記物聯合檢測，能最大程度上減少胸腔積液的誤診率及漏診率。

綜上，腫瘤標志物聯合細胞DNA倍體分析法檢測胸腔積液，能最大程度上提高癌性胸腔積液診斷靈敏性及特異性。

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3 Mizuguchi S，Nishiyama N，Iwata T，etal.Clinical value of serum cytokeratin 19 fragment and Sialyl-Lewis X in non-small cell lung cancer〔J〕.Ann Thorac Surg，2007；83(1)：216-21.

4 臧鳳蕾，李 丹，王 莉.老年結核性、癌性胸腔積液聯合檢測指標的臨床診斷價值〔J〕.中國老年學雜志，2011；31(11)：4336-8.

5 刑桂芝，周秀艷.應用ROC曲線評價血清CA125、CA199和CEA對卵巢癌的診斷價值〔J〕.現代預防醫學，2006；36(18)：3592-4.

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7 劉 敘.ADA，CEA，CA153及CA125在胸腔積液診斷中的價值〔J〕.海南醫學院學報，2013；19(9)：1270-2.

8 楊桐樹，李文輝，孫喜文，等.胸腔積液5種腫瘤標志物聯合檢測在肺癌診斷中的價值〔J〕.中國衛生檢驗雜志，2010；30(7)：1602-5.

〔2015-12-29修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

湖南省科技廳科技資助項目(2014SK3144)

劉崇梅(1972-)，男，副主任醫師，主要從事腫瘤病理學研究。

王彩霞(1980-)，女，主治醫師，碩士，主要從事病理診斷技術研究。

R734.2

A

1005-9202(2017)05-1158-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.05.054

1 岳陽市二人民醫院 2 岳陽職業技術學院