免疫組織化學技術在獸醫診斷中的應用

白全亮

摘 要：免疫組織化學技術是通過利用抗原抗體特異結合的原理，把相關的物質標記在抗體上，來表示復合物的存在和狀態。隨著我國科學技術的發展，免疫組織化學技術越來越成熟，已被廣泛應用于獸醫的診斷過程中。免疫組織化學技術應用的范圍非常廣泛，主要包括：對病原體檢測、定位、動態分布，以及新病原體的發現、固定組織的研究過程中，是現代獸醫診斷中主要的技術手段之一，該文通過查詢大量的中外文獻，以及向相關人士咨詢，就免疫組織化學技術在獸醫診斷中的應用進行淺要分析，希望對相關部門有一定幫助。

關鍵詞：免疫組織化學技術 獸醫診斷 應用分析

中圖分類號：S854.4 文獻標識碼：A 文章編號：1674-098X（2016）09（a）-0094-02

免疫組織化學技術在國際上簡稱為IHC，是依靠組織化學發展起來的一種新型獸醫診斷技術，其主要的原理是利用抗原和抗體特異性結合的原理，把抗體當作特異性染色的主要載體，并且把相關的物質標記在抗體分子中，以便在顯微鏡下對抗原抗體進行全方位仔細的觀察，最終達到對細胞和組織內的相應抗原進行定性和定位檢測。免疫組織化學技術的發現和發展使得傳統獸醫診斷發生了很大變化，使得傳統病理學逐漸發展成為免疫信號和形態相結合的現代病理學。自從20世紀70年代末期開始，免疫組織化學技術就對獸醫診斷的發展有著不可替代的作用。這主要是由于IHC可以在石蠟切片、冰凍組織和細胞制品上檢測組織中種類廣泛的病原，以及對活體動物中病原的檢測，亦可用于對動物體內病原的動態分布、半定量等研究。此外，IHC還可對固定組織進行回顧性研究。免疫細胞化學技術在細胞、亞細胞水平原位檢測抗原分子，是其他任何生物技術難以達到和代替的，它能在細胞基因和分子水平同時原位顯示基因及其表達產物，形成新的檢測系統。雖然聚合酶鏈反應（polymerasechain reaction，PCR）方法已經廣泛應用于疾病的診斷，但由于不能在組織和細胞內進行明確的定位而限制PCR在病理組織學上的應用。該文就著重對免疫組織化學技術在獸醫診斷中的應用進行簡要分析，希望對我國獸醫診斷部門有一定的借鑒。

1 免疫組織化學技術對病原體的檢測

近年來，隨著我國科學技術的發展，免疫組織化學技術已被廣泛應用于獸醫診斷過程中，尤其是在獸類傳染病的診斷過程中發揮了不可替代的作用，免疫組織化學技術在獸類傳染病診斷過程中的作用有很多方面因素的影響，其中最主要的原因是因為免疫組織化學技術能夠快速準確地檢測到病原體，比如：病毒、細菌的種類，還能檢測出某些不能在體外分離培養的病原體和病毒。我國著名免疫組織化學技術研究專家周春宇通過多年的工作經驗和大量的實驗建立了檢測鵝細小病毒的間接酶免疫組織化學方法。這種檢測方式的發明使得鵝細小病毒對獸類組織器官和細胞的抗原定位檢測更加清晰明了[1]。除此之外，免疫組織化學技術也可以應用于同一檢樣品病原比的檢測和識別過程中，國外研究者曾經利用免疫組織化學技術檢測了某養殖場公牛心肌炎的主要病原體，并取得了輝煌的成績，檢測了90頭死于心肌炎的公牛感染組織，每個標本都使用了4種抗病原體，即：嗜血桿菌病抗病原體、牛病毒性腹瀉病毒抗病原體、牛支抗病原體、溶血性曼氏桿菌抗病原體。大約有65頭牛在心臟受損中發現了嗜血桿菌，而牛病毒性腹瀉病毒只有4頭，從這幾組數據中可以清楚看到嗜血桿菌才是導致公牛心肌炎的主要病原體。也有人通過免疫組織化學技術檢測到犬瘟熱病毒、衣原體等病毒很難在體外分離，并且培養起來非常費時、費力。也有人通過免疫組織化學技術檢測獸類組織切片中活著的非可培養狀態的副溶血性弧菌，發現利用免疫組織化學技術能夠準確檢測出非可培養狀態的副溶血性弧菌的位置，大大節省了實驗人員的精力和時間，把獸醫診斷檢測人員從繁重的工作中解放出來，所以說免疫組織化學技術不但能夠減少獸醫診斷的工作量，還能提高獸醫診斷的準確性和效率[2]。

2 免疫組織化學技術對病原機體的定位

免疫組織化學技術具有很多優點，但是我國免疫組織化學技術的起步比較晚，相關技術還不夠成熟，還不能精確地測量出病原體的含量，但是免疫組織化學技術卻能使得病原檢測變得更加直觀清晰，還可對病原體進行準確定位。比如：利用免疫組織化學技術能夠快速準確地對犬類傳染性肝炎病毒定位在細胞核內，能夠把狂犬病病毒定位到細胞質當中，這是傳統的獸醫診斷所達不到的技術高度，使得原來被稱為不治之癥的狂犬病有了治愈的希望。我國著名免疫組織化學專家陳海軍曾建立了檢測石蠟組織切片中I型鴨肝炎病毒的間接免疫酶染色方法，利用免疫組織化學技術對I型鴨肝炎病毒導致鴨死亡的組織器官進行深入研究和分析，檢測結果顯示，I型鴨肝炎病毒在死亡鴨的肝、心、盲腸、直腸中的免疫組織化學檢測都是陽性，這個實驗可以清楚看出I型鴨肝炎病毒主要分布在感染細胞的細胞質當中[3]。

3 病原在機體的動態分布研究

病原在機體的動態分布研究是獸醫診斷動物傳染病的基礎，能夠為動物發病的機理研究提供理論依據，對養殖業控制動物病情有非常重要的意義。我國對病原在機體的動態分布研究起步比較晚，到目前為止，主要利用生物學技術、免疫酶組化法進行研究。通過利用免疫組織化學技術能夠清晰明了地觀察到病原在組織細胞中的生長動態，也就能觀察到病毒從一個部位到另一個部位的擴散過程，有助于獸醫研究疫病發病的原因和過程。同時，免疫組織化學技術還能檢測出肉眼病變不明顯的組織內的病因發病過程和狀態[4]。

4 結語

免疫組織化學技術應用的范圍非常廣泛，除了應用在醫院診斷過程中，還應用在獸醫疫病疾病的研究過程中。隨著我國科學技術的發展，生物分子技術和遺傳技術得到了廣泛發展，使得免疫組織化學技術越來越完善，免疫組織化學技術在獸醫診斷過程中發揮的作用和價值越來越大，該文通過查閱大量的中外文獻，分析免疫組織化學技術對病原體的檢測，免疫組織化學技術對病原機體的定位，病原在機體的動態分布研究，希望對獸醫診斷發展有一定幫助。

參考文獻

[1] 萬美梅，孫彥偉，林乃鋒.免疫組織化學技術在獸醫診斷中的應用[J].動物醫學進展，2013（6）：94-97.

[2] 孫亞妮.免疫組織化學技術在雞三種病毒性腫瘤病鑒別診斷中的應用[D].山東農業大學，2014.

[3] 莊金秋，梅建國，沈志強.膠體金免疫層析技術在獸醫臨床診斷中的應用進展[J].中國動物檢疫，2012（9）：70-75.

[4] 溫濤，趙建增，羅勝軍，等.化學發光免疫分析在獸醫診斷中的應用[J].中國畜牧獸醫，2013（10）：73-75.