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白頭翁屬藥材鑒別及質量評價研究進展

2017-03-12 01:41:28錢江平王文昊詹志來
皖西學院學報 2017年5期
關鍵詞:研究

錢江平,楊 俊,王文昊,詹志來

(1.安徽中醫藥大學 藥學院,安徽 合肥 230012;2.安徽省中醫藥科學院,安徽 合肥 230012;3.中國中醫科學院 中藥資源中心道地藥材國家重點實驗室培育基地,北京 100700)

白頭翁屬藥材鑒別及質量評價研究進展

錢江平1,2,楊 俊1,2,王文昊1,2,詹志來3

(1.安徽中醫藥大學 藥學院,安徽 合肥 230012;2.安徽省中醫藥科學院,安徽 合肥 230012;3.中國中醫科學院 中藥資源中心道地藥材國家重點實驗室培育基地,北京 100700)

綜述了白頭翁屬藥材白頭翁、朝鮮白頭翁及興安白頭翁在藥材性狀鑒別、顯微鑒別及質量控制方面的研究概況,分析歸納了文獻中白頭翁顯微鑒定存在的分歧,建議對白頭翁的鑒別進行系統研究,為白頭翁的藥材鑒別提供依據;對白頭翁屬幾種藥材中白頭翁皂苷A3、白頭翁皂苷D等成分進行深入研究,為擴大藥源提供支撐;開展白頭翁組織與化學成分積累關系研究,揭示白頭翁藥材“辨狀論質”的科學內涵。

白頭翁;朝鮮白頭翁;興安白頭翁;鑒別;質量評價

白頭翁為常用中藥材,始載于《神農本草經》[1](P262-263),具有治療狂易寒熱,癥瘕積聚等作用。《中國藥典》[2](P104)記載白頭翁來源于毛茛科植物白頭翁Pulsatillachinensis(Bge.) Regel的干燥根,具有燥濕殺蟲、涼血止痢、清熱解毒的功效。現代藥理研究表明白頭翁具有治療炎癥、抗腫瘤、增強免疫功能和治療阿爾茨海默癥等作用[3-5]。目前白頭翁藥材均來源野生,隨著藥理研究的不斷深入,白頭翁用量逐漸增大,野生資源量越來越少。藥材市場調查顯示,白頭翁分布區河北、山西、河南、安徽等地的白頭翁藥材產量逐年減少[6],東北貨逐漸成為市場上白頭翁藥材的主流;產地調查顯示我國東北地區白頭翁屬植物朝鮮白頭翁P.cernua(Thunb.) Berchtold et Presl.、興安白頭翁P.dahurica(Fisch.) Spreng.資源量豐富,尤其是朝鮮白頭翁個大、色澤好而藥農樂意采挖,占市場白頭翁藥材的較大份額[7],東北出產的白頭翁藥材基原包括白頭翁、朝鮮白頭翁、興安白頭翁等多種。前期關于白頭翁的藥理及化學成分研究進展的報道較多[3,8-11],但關于白頭翁與朝鮮白頭翁、興安白頭翁在性狀鑒別、顯微鑒別及質量評價方面的綜述未見報道。本文通過對白頭翁類藥材——白頭翁、朝鮮白頭翁及興安白頭翁的性狀鑒別、顯微鑒別及質量評價等方面的研究報道進行歸納與分析,旨在為白頭翁類藥材鑒別提供依據,為白頭翁的進一步研究與應用提供參考。

1 性狀鑒別研究

1.1 白頭翁

《中國藥典》[2](P104)記載了白頭翁P.chinensis(Bge.)Regel根的性狀特征,呈圓柱形或圓錐形,稍扭曲,長6~20 cm,直徑0.5~2 cm。表面黃褐色或黃棕色,具不規則的縱皺紋或縱溝,有的有裂隙或網狀裂紋,皮部常脫落露出木部,近根頭處常見朽狀凹洞。根頭部有白色絨毛,有的可見鞘狀葉柄殘基。質硬而脆,斷面皮部淡黃色或淡黃棕色,木部黃白色。亦有記載其根呈劈破狀[12](P134-148),根頭有時分叉,中部以下常有2~3支根[13](P239-243);根頭處可見幼葉[13](P239-243)或鱗葉[14](P59-120),還有記載根頭部葉柄可達20 cm,先端撕裂,呈纖維狀[15]。

1.2 朝鮮白頭翁

與白頭翁性狀基本相同,區別點主要為直徑不同,有記載朝鮮白頭翁較細,直徑0.4~0.8 cm[12](P134-148),[13](P239-243),[14](P59-120),[16](P8-9),[17];也有記載較粗,直徑可達2 cm[17,18],最長可達30 cm[17]。

1.3 興安白頭翁

文獻報道興安白頭翁藥材性狀與白頭翁基本相似,區別點為較白頭翁細,直徑0.5~0.7 cm[13](P239-243),[14](P59-120),[16](P8-9),長10~20 cm;也有報道較粗,直徑可達2.4 cm[18];表面顏色稍深,呈棕褐色或黃褐色[14](P59-120);根中下部常有分枝[13](P239-243),[14](P59-120),[16](P8-9),[18]。

2 顯微鑒別研究

文獻報道的白頭翁、朝鮮白頭翁以及興安白頭翁的顯微鑒別,可分為組織構造及粉末鑒別兩個部分。

2.1 組織構造研究

2.1.1 白頭翁

早在20世紀50年代,徐國鈞先生[15]報道了白頭翁的顯微構造,為雙子葉植物根的構造,其組織構造從外到內,依次由表皮、皮層、韌皮部、形成層及木質部等組成,但幼根與老根結構有較大差異。幼根最外保護組織為表皮或表皮脫落后形成后生皮層;皮層為5~7層薄壁細胞組成,具內皮層;常無韌皮纖維。老根中表皮、皮層及內皮層大多脫落,最外層由韌皮部細胞行使保護功能,韌皮部由篩管群、韌皮薄壁細胞及韌皮纖維組成,韌皮纖維單個散在或成束;形成層明顯;木質部約占根的1/2,木質部束2~5個或更多;近根頭部髓部明顯。

綜合其他文獻報道白頭翁結構類型基本與徐國鈞先生的報道相似,主要區別在最外的保護組織、韌皮纖維的多少、木質部束數及所占的比例、髓部的有無以及分泌組織是否存在。李廣民[19]、王桂芹[20]均報道白頭翁次生構造最外為木栓組織,且栽培品的木栓組織更發達[20]。關于韌皮纖維,有報道韌皮纖維偶見或單個散在[18,21];也有報道韌皮纖維散在或成束[14],[22](P997-980),[23](P328-332)。關于白頭翁的木質部束,有文獻報道木質部為3束約占橫切面半徑的3/5~4/7[14](P59-120);亦有報道木質部6~7束[21];還有報道其形成了3個扇面[18]。關于白頭翁中髓的存在,有文獻記載較粗的根有髓[22](P997-980),[23](P328-332);有報道老根有髓而幼根無髓[21];也有文獻描述根上部(粗端)有髓而下部(細端)無髓[24](P130);也有報道整根的中央具有髓部[18],中心可見狹長裂隙;也有報道整根均無髓[19];亦有記載藥用部位存在根狀莖中央有髓[14](P59-120)。

王桂芹等[20,25]報道白頭翁藥用部位中存在分泌組織,且主要存在于栓內層和韌皮部中。組織化學定位顯示皂苷類物質主要分布和積累在分泌細胞、分泌腔和分泌道中,且分泌腔和分泌道的數量變化可以作為判斷皂苷類成分含量變化的結構性指標,生長4-5年的白頭翁藥用部位中分泌組織數量最多[25]。

2.1.2 朝鮮白頭翁

研究報道朝鮮白頭翁與白頭翁的構造基本相似,由表皮、皮層、韌皮部、形成層、木質部等部分構成[14](P59-120),[17],[18],[21]。表皮及皮層僅幼嫩根部可見,老根最外層常為韌皮部,韌皮纖維多見[21]。木質部導管3束約占半徑的1/2[14](P59-120),[17],[18],[21],有時可見6~7束[17],大導管與小導管相間排列[21]。中央無髓[14](P59-120),[17],[18]或有髓,常有裂隙[21],或根頭部有髓[17]。亦有報道藥用部位存在根狀莖,中央有髓[14](P59-120)。

2.1.3 興安白頭翁

文獻報道興安白頭翁的顯微構造與白頭翁基本相似,亦是由表皮、皮層、韌皮部、形成層、木質部組成[14](P59-120),[17],[21]。表皮及皮層常脫落,使最外部分為木栓化增厚的韌皮細胞[21]。韌皮纖維單個散在或數個相連。有的排列成斷續的環狀[17]。木質部導管略作2束狀[17,18,21],或成2~3歧分叉[17,21],也有報道[21]木射線部位可見3~7個斷續同心環狀倒“V”型裂隙。中央有髓[14](P59-120),[17],[21],或根頭部有髓[17]。亦有報道[14](P59-120)藥用部位存在根狀莖,中央有髓。

2.2 粉末特征研究

文獻報道顯示,白頭翁、朝鮮白頭翁、興安白頭翁的粉末顯微特征沒有太大差異,主要鑒別特征有纖維、非腺毛、導管。纖維呈梭形或紡錘形,長可達390 μm,直徑可達42 μm。非腺毛常破碎,為單細胞;完整的非腺毛細長,較平直,上部漸尖,直徑6~32 μm,表面有螺狀角質紋理。導管為網紋導管或具緣紋孔導管,有時可見螺紋導管,導管壁可見穿孔板[14](P59-120)。粉末中還有木栓細胞、淀粉粒[18]、葉柄下表皮細胞[14](P59-120),[17]、后生皮層細胞[14](P59-120),[17],[26](P66-67)。

3 質量評價研究

《中國藥典》[2](P104)記載白頭翁質量評價以高效液相色譜法為含量測定方法,以白頭翁皂苷B4作為白頭翁藥材質量評價的指標成分。對于白頭翁類藥材化學成分的含量測定,相關報道主要以HPLC法測定白頭翁皂苷B4,少量報道測定總皂苷、白頭翁皂苷D以及23-羥基白樺酸,比較不同基原、不同產地以及不同采收期成分含量的區別。

3.1 白頭翁屬不同基原藥材成分的含量測定

郝寧等[27]對4種白頭翁屬藥材的總皂苷進行測定,發現興安白頭翁大于朝鮮白頭翁大于白頭翁大于細葉白頭翁。李海燕等[28]通過測定白頭翁、興安白頭翁、朝鮮白頭翁及細葉白頭翁藥材中白頭翁皂苷B4的含量,結果顯示白頭翁中的含量最高。崔曉東等[29]對遼寧省大連大黑山的野生白頭翁及朝鮮白頭翁中白頭翁皂苷B4進行含量測定,顯示白頭翁要稍高于朝鮮白頭翁。

3.2 不同產地白頭翁類藥材成分的含量測定

不同產地白頭翁成分的含量測定 報道大多以白頭翁皂苷B4為指標,張振華等[30]對全國十七批不同產地的白頭翁進行測定,發現安徽滁州者含量最高。方艷夕等[31]對全國十個產地的白頭翁進行測定,結果顯示產自安徽鳳陽者含量最高,安徽滁州者稍次。李立順等[32]對全國十個不同產地的野生白頭翁進行測定,結果安徽白頭翁含量高出長春20多倍。時維靜等[33]采集滁州野生白頭翁,并對比市場上不同地區的白頭翁藥材及飲片,發現產自安徽滁州的野生白頭翁的含量最高,而采自市場的藥材含量相對較低,飲片則更低。楊傳偉等[34]對市場上25個不同產地的白頭翁進行測定,發現產自東北地區的白頭翁皂苷B4的含量最高。

也有報道比較不同產地白頭翁皂苷D的含量差異,尹姍等[35]對樟樹藥材市場上10個不同地區的白頭翁藥材中白頭翁皂苷D的含量進行測定,結果產吉林者含量高出廣東20倍。饒小勇等[36]對市場上不同地區的白頭翁進行測定,亦發現產吉林者白頭翁皂苷D含量最高,產自浙江的藥材則未檢驗出有白頭翁皂苷D。

此外,王勇等[37]還對安徽境內五個不同地區的野生白頭翁中23-羥基白樺酸含量進行了測定,發現產自金寨皮仿者含量最高,滁州產的含量最低。

不同產地朝鮮白頭翁成分的含量測定 曹祥武等[38]測定了白頭翁皂苷B4在長白山地區十個不同產地朝鮮白頭翁中的含量,發現其含量差異不大。

不同產地興安白頭翁成分的含量測定 鄭光浩等[39]對不同產地的興安白頭翁中常春藤皂苷元的含量進行測定,結果產吉林延吉市者含量最高,產吉林撫松縣者含量最低。

3.3 不同采收期白頭翁屬藥材成分的含量測定

不同采收期白頭翁的含量測定 時維靜等[40]對安徽鳳陽北九華山的野生白頭翁進行每月定點采集,測定其總皂苷含量,發現8月采集的含量最高,10月份的最低。

朝鮮白頭翁不同采收期的含量測定 李海燕等[41]對不同月份的白頭翁的總皂苷的含量進行測定,發現野生型中八月份的含量最高,而三年生的栽培者中9月份最高。

4 討論

4.1 白頭翁藥材鑒別特征研究有待加強

白頭翁治療熱毒血痢療效顯著,藥用歷史悠久,由于古代典籍記載粗略,白頭翁成為本草中偽品最多的藥材[42](P250-251),[43](P2),偽品涉及6個科30多種植物,白頭翁藥材真偽鑒別備受重視。同時本草考證結果顯示朝鮮白頭翁、興安白頭翁可以作為地方習用品[7]。綜上文獻報道顯示,正品白頭翁的顯微結構特征存在五點分歧:1)保護組織是木栓組織還是表皮、皮層或韌皮部?2)韌皮纖維多少?3)維管束的數目多少?4)髓的有無及存在部位?5)有無分泌組織存在?給鑒別白頭翁藥材留下模糊。另一方面,正品白頭翁與朝鮮白頭翁、興安白頭翁性狀特征僅在大小、顏色以及根下部的分支多少上有細微區別;其顯微結構特征僅在韌皮纖維多少及木質部射線中存在裂隙有所差異,依靠這些特征難以區別白頭翁與朝鮮白頭翁、興安白頭翁。因此,本文建議對正品白頭翁的顯微特征進行系統研究,澄清結構上的分歧;同時加強白頭翁與朝鮮白頭翁、興安白頭翁的性狀特征、顯微特征的區別研究,為市場上澄清白頭翁藥材的正品、地方習用品、偽品提供可靠的鑒別依據。

4.2 白頭翁皂苷類成分研究有待深入

文獻報道顯示白頭翁藥理活性顯著,主要有效成分是三萜皂苷,藥理研究表明白頭翁抗菌止痢的主要活性成分是白頭翁皂苷B4[44],《中國藥典》[2](P104)規定以白頭翁皂苷B4作為白頭翁藥材質量檢測的指標成分,白頭翁質量評價研究報道也多集中在測定白頭翁皂苷B4的含量上。近年來的藥理研究表明,白頭翁皂苷A3有較好的舒張血管[45]、治療白血病[46]及阿爾茨海默癥[5]的作用,白頭翁皂苷D能有效抑制腫瘤細胞的增長[47-49],但這兩種成分在白頭翁中的含量少有報道,在朝鮮白頭翁及興安白頭翁中的含量未見報道。基于最新藥理活性進展建議加強白頭翁皂苷A3和白頭翁皂苷D在白頭翁及同屬植物朝鮮白頭翁及興安白頭翁的含量研究,為擴大白頭翁藥源提供支撐。

4.3 開展白頭翁組織與化學成分積累關系研究

根類藥材的形態是其內部組織結構的發育而成,不同組織部位有效成分的積累不同。近年來,一些學者相繼對懷地黃[50,51]、西洋參[52,53]、牛膝[54,55]、太子參[56,57]等根類藥材開展發育解剖學研究,并進行不同組織中次生代謝產物的積累研究,定量地說明了藥材形態與有效成分含量的關系。白頭翁根中主要的活性成分是皂苷類成分,雖然有報道對白頭翁根進行皂苷類成分組織化學定位研究,認為皂苷類物質分布和積累與分泌組織有關[20,25];而白頭翁已有的鑒別標準[2](P104),[23](P328-332)均無分泌組織的記載。白頭翁皂苷類成分在根中的積累規律尚未明確。因此本文建議開展白頭翁不同部位(根頭部、主根、側根)和根的不同組織中次生代謝產物積累的研究,以闡明皂苷類成分在白頭翁藥用部位中的分布情況,進而探明藥材形態與質量的相關性,進一步揭示白頭翁藥材“辨狀論質”的科學內涵。

綜上所述,建議對白頭翁的鑒別進行系統研究,為市場上澄清白頭翁類藥材提供可靠的性狀、顯微鑒別特征依據;同時對白頭翁屬幾種藥材中白頭翁皂苷類成分的含量及在藥用部位分布進行深入研究,為擴大藥源提供支撐,揭示白頭翁藥材“辨狀論質”的科學內涵。

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[56]彭華勝,胡正海,劉文哲,等.栽培太子參塊根的發育解剖學研究[J].西北植物學報,2008,28(5):861-867.

[57]彭華勝,劉文哲,胡正海,等.栽培太子參塊根中皂苷的組織化學定位及其含量變化[J].分子細胞生物學報,2009,42(1):1-10.

ResearchProgressoftheIdentificationandQualityEvaluationofPulsatillaeRadix

QIAN Jiangping1, WANG Wenhao1, ZHAN Zhilai2, YANG Jun1

(1.SchoolofPharmacy,AnhuiUniversityofChineseMedicine/AnhuiAcademyofTraditionalChineseMedicine,Hefei230012,China;2.NationalResourceCenterforChineseMateriaMedica,ChinaAcademyofChineseMedicalSciences,Beijing100700/100069,China)

This paper comprehensively summarized the research situation of the morphological identification, microscopic identification and quality control ofPulsatillachinensis(Bge.) Regel,P.cernua(Thunb.) Bercht. et Opiz. andP.dahurica(Fisch.) Spreng. Meanwhile,it analyzed and summarized the differences in microscopic identification and suggested that a systematic study should be conducted to provide a basis for the identification of Pulsatillae Radix. Additionally, an intensive study on pulsatilla saponins A3, pulsatilla saponins D and several chemical composition was conducted to extend the medicine source. To reveal the scientific connotation of quality evaluation through morphological identification of Pulsatillae Radix, the study on the relationship between the organization structure and chemical composition accumulation was developed.

P.chinensis(Bunge) Regel;P.cernua(Thunb.) Bercht. et Opiz.;P.dahurica(Fisch.) Spreng.; identification; quality evaluation

R284.1

A

1009-9735(2017)05-0094-05

2017-05-08

中央本級重大增減支項目“名貴中藥資源可持續利用能力建設”(2060302);安徽省高校省級自然科學研究項目(KJ2017A293)。

錢江平(1991-),男,安徽安慶人,碩士研究生,研究方向:中藥資源與質量評價;通信作者:楊俊(1961-),女,河北武安人,教授,研究方向:中藥資源與鑒定。

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