曙紅-蛋白質(zhì)體系吸收光譜的應(yīng)用

張 彥 青

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曙紅-蛋白質(zhì)體系吸收光譜的應(yīng)用

張 彥 青

(衡水學(xué)院 化工學(xué)院，河北 衡水 053000)

采用分光光度法，以曙紅染料為顯色劑，研究了在酸性介質(zhì)中曙紅與牛血清蛋白作用的吸收光譜并用于測定樣品中蛋白質(zhì)的含量．曙紅與蛋白質(zhì)作用構(gòu)成了曙紅－蛋白復(fù)合物，研究了影響該復(fù)合物穩(wěn)定和靈敏度的因素，確定了該實驗的最佳條件．實驗表明，曙紅-蛋白質(zhì)復(fù)合物最大吸收波長從515 nm紅移到531 nm．在最佳條件下，線性范圍為0.4×10-5~ 1.6×10-5mol/L，檢出限為0.09×10-5mol/L．

曙紅；牛血清蛋白；吸收光譜；分光光度法

蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)之一，在生物化學(xué)和其他生物學(xué)科、食品檢驗、臨床檢驗、疾病診斷、生物藥物分離提純和質(zhì)量檢驗中蛋白質(zhì)的分離與定性、定量分析是最重要的工作[1]．蛋白質(zhì)也是生命科學(xué)中很重要的研究對象，化學(xué)家及生物學(xué)家對蛋白質(zhì)的分析研究極為關(guān)注．目前，蛋白質(zhì)測定方法有分光光度法、凱氏定氮法、熒光法、質(zhì)譜法等方法．其中分光光度法因操作簡便、快速、可測范圍廣、儀器價廉而得到廣泛的應(yīng)用，由此建立曙紅-蛋白質(zhì)體系吸收光譜的應(yīng)用分析．

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

PH-3C型精密酸度計(上海精密科學(xué)儀器有限公司)；TU-1901雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)；FA2204B電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)．牛血清蛋白(衛(wèi)生部上海生物制品研究所)標準溶液1.0 × 10-4mol/L，曙紅儲備液濃度1.0 × 10-4mol/L；磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖溶液：0.2 mol/L磷酸氫二鈉溶液與0.1 mol/L檸檬酸溶液按一……