臭氧自體血回輸治療急性腦梗死抗氧化指標的對照研究

彭凱潤 武肖娜 劉曉燕 張 濤

廣州軍區廣州總醫院神經內科 廣州 510010

·論著·

臭氧自體血回輸治療急性腦梗死抗氧化指標的對照研究

彭凱潤 武肖娜*劉曉燕 張 濤

廣州軍區廣州總醫院神經內科 廣州 510010

目的 研究臭氧自體血回輸治療急性腦梗死患者血漿抗氧化指標，進一步探討其治療急性腦梗死的作用機制。方法 選取我院收治的60例急性腦梗死患者(具有單側大腦中動脈供血區的皮質下累及內囊的單一病灶)，隨機分為治療組和對照組各30例。2組基礎用藥均為拜阿司匹林腸溶片0.3 g，1次/晚+血栓通注射液0.45 g，1次/d，治療組除基礎治療外加用臭氧自體血回輸治療，1次/d，(10±2)d一療程；對照組僅使用基礎治療。于治療前及治療(10±2)d后，分別對2組進行抗氧化指標、如超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的測定。結果 治療(10±2)d后，2組血漿中SOD、NO含量均較治療前升高，且NO含量治療組升高幅度高于對照組(P<0.05)；2組血漿中MDA含量均較治療前下降，治療組下降幅度大于對照組(P<0.01)。結論 臭氧可能通過抗氧化、清除自由基等途徑減輕梗死灶局部及遠隔部位的損傷而發揮治療作用。

臭氧；腦梗死；超氧化物歧化酶；丙二醛；一氧化氮

臭氧自體血回輸，即臭氧基本自血療法(major ozonated autohemotherapy，MOAH)對腦血管疾病亦有一定的療效[1-3]。研究發現，在腦梗死后，特別是腦缺血再灌注后引起的腦水腫及組織破壞可能是由氧自由基產生的大量產物引起的[4-5]，臭氧激活抗氧化酶和清除自由基作用。本研究通過對臭氧自體血回輸治療急性腦梗死患者的抗氧化指標的研究，探索臭氧對急性期腦梗死的作用。

1 材料和方法

1.1 一般資料 納入2008-12—2010-01廣州軍區廣州總醫院神經內科住院急性腦梗死患者60例，用數字表法隨機分為2組。2組性別、年齡、發病時間、梗死灶體積均無顯著性差異(P>0.05)，具有可比性。見表1。

表1 2組基本資料比較

1.2 選擇標準 (1)入選標準：年齡30～80歲；NIHSS評分6～20分；發病時間>6 h～<72 h，且未進行靜脈溶栓；病灶具單側大腦中動脈供血區，累及內囊的單一病灶，首次發病；(2)排除標準：既往有腦梗死、腦出血、腦腫瘤、腦挫裂傷及其他腦部病變者；已進行溶栓治療的患者；凝血功能障礙或血小板量及功能異常者，地中海貧血、鐮狀細胞性貧血患者，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺乏癥患者；已使用抗自由基制劑；消化性潰瘍、胃腸道出血；嚴重心肝腎功能不全患者；甲狀腺功能亢進；妊娠期或哺乳期婦女；精神病患者；高敏體質。

1.3 治療方法 基礎治療：按美國心臟學會卒中分會2003年頒布的卒中患者早期處理指南常規規范治療：(1)卒中單元監護治療；(2)高血壓、心律紊亂、高血糖等并發癥監測和治療；(3)神經并發癥治療；(4)康復治療。2組基礎用藥均為拜阿司匹林腸溶片0.3 g/晚+血栓通注射液(廣西梧州制藥股份有限公司)0.45 g，1次/d，對照組僅給予基礎治療，治療組同時給予臭氧自體血回輸治療，1次/d，(10±2)d為一療程。臭氧自體血回輸儀及配套裝置由德國赫美斯公司(hyper-med-ozone comfort)提供。具體操作步驟如下：采集肘中靜脈血100 mL置于回輸專用輸血袋內，與預先設定的臭氧濃度(47 μg/mL)按1：1的比例混合，5～10 min后即血液充分臭氧化后，于15 min內將血液回輸患者體內。整個治療過程在專用臭氧治療室內由經培訓過的護士進行完成。

1.4 觀察指標 血漿超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase SOD)、丙二醛(Maleic Dialdehyde MDA)和一氧化氮(NO)：治療前1 d和治療(10±2)d后分別采集清晨空腹肘靜脈血4 mL，3 000 r/min離心10 min后，取血漿，置于-70℃冰箱保存待測。分別采用黃嘌呤氧化酶法(羥胺法)測定SOD活力，硫代巴比妥(Thibabituric Acid，TBA)法測定MDA，硝酸還原酶法測定NO。試劑由南京建成生物工程研究所提供，嚴格按說明書由操作。

2 結果

2.1 2組血漿SOD、MDA和NO水平比較 治療前2組血漿SOD、MDA和NO含量比較無明顯差異(P>0.05)。2組治療后均較治療前SOD、NO含量明顯增高(P<0.01)，MDA含量明顯下降，治療組較對照組NO含量明顯升高，MDA含量明顯下降，差別有統計學意義(P<0.01)。見表2、圖1～3。

2.2 安全性評價 治療期間2組均未見明顯不良反應，血生化指標未見明顯異常。治療后復查顱腦MRI發現，治療組3例、對照組2例出現少量滲血，考慮為缺血再灌注造成的毛細血管滲血，但患者臨床癥狀無加重，無需停用抗血小板治療。

表2 2組治療前后血漿SOD、MDA和NO水平比較

圖1 2組治療前后血漿SOD水平比較

圖2 2組治療前后血漿MDA水平比較

圖3 2組治療前后血漿NO水平比較

3 討論

急性腦梗死治療過程中減少自由基的產生及提高體內各種清除自由基酶的活性是減輕腦缺血性損害的一個重要環節。SOD是體內清除自由基的一種重要酶，其活性高低可部分反映機體清除自由基的能力，MDA是多不飽和脂肪酸的分解產物，可間接反映體內氧自由基的代謝狀況[6]；NO是一種可通過細胞膜擴散的可溶性氣體，NO及其前體和供體除了能擴張血管，增加血液纖溶性，降低纖維蛋白原的含量外，還能抑制血小板聚集和抑制多形核白細胞的黏附，有利于減輕腦梗死和恢復腦血流[7]。

研究發現，臭氧能夠維持紅細胞膜的完整性，提高紅細胞的代謝，激活糖的磷酸戊糖旁路，增加紅細胞內2，3-二磷酸甘油酸含量，從而增加組織供氧效應，同樣臭氧處理后也增加了紅細胞內的ATP含量，即促進了紅細胞的新陳代謝作用。研究[8]認為其能激活機體內抗氧化物酶的功效。Calunga等[9]發現，臭氧可以通過激活機體抗氧化系統改善血液循環和細胞內氧的新陳代謝的作用。Chen等[10]研究也發現，臭氧的抗缺血及抗再灌注損傷保護作用與其增加一氧化氮合酶(eNOS、iNOS)的表達，促進一氧化氮的釋放有關，因此推測其可減少細胞凋亡，促進膠質細胞遷移，保護缺血的組織。

本文采用臭氧自體血回輸療法治療急性腦梗死，觀察到臭氧治療組血漿丙二醛和一氧化氮含量較對照組明顯改善(P<0.05)，超氧化物歧化酶差異無統計學意義(P>0.05)。

綜上，臭氧可能通過激活機體的抗氧化系統、解除自由基酶的抑制作用、降低脂質過氧化物的速率和程度達到治療急性腦梗死及遠隔性損害，發揮神經保護的作用。臭氧自體血回輸療法是一種相對安全有效的治療方法，為無法進行溶栓治療的急性腦梗死患者提供了新的有效治療選擇，值得臨床推廣應用。

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(收稿2016-19-25)

A control study on the effect of ozone autohemotherapy on antioxidant indices in treatment of acute cerebral infarction

PengKairun，WuXiaona，LiuXiaoyan，ZhangTao

DepartmentofNeurology，GuangzhouGeneralHospitalofGuangzhouMilitaryCommand，Guangzhou510010，China

Objective To study the antioxidant indices in the acute cerebral infarction patients after the treatments of ozone autohemotherapy，in order to further explore the mechanism of the treatment in acute cerebral infarction.Methods A total of 60 cases with acute cerebral infarction(characterized by a single internal capsule lesion in unilateral subcortical area caused by the ischemic middle cerebral artery) were randomly divided into ozone group and control group，30 cases in each group.In addition to the basic treatment containing aspirin enteric-coated tablets 0.3 g，once a night and Xueshuantong injection 0.45 g，once a day for both two groups，the zone group received ozone autohemotherapy，once a day and (10±2)d as a treatment course.Then antioxidant indicators including superoxide dismutase(SOD)，malondialdehyde(MDA) and nitric oxide(NO) were assessed to compare the differences between two groups.Results After treatment，the plasma SOD and NO levels of the two groups were increased compared with those before treatment，and the ozone group showed more changes than the control group with statistical differencec(P<0.05).What’s more，the MDA level was declined in both two groups，especially in the Ozone group(P<0.01).Conclusion Ozone may play a therapeutic role in acute cerebral infarction probably by reducing the damage of local and distant infarct lesions through anti-oxidation，clearance of free radicals and other approaches.

Ozone；Cerebral infarction；Superoxide dismutase；Malondialdehyde；Nitric oxide

廣東省醫學科學技術研究基金資助，編號：B200258)

*通訊作者：武肖娜，女，廣州軍區總醫院神經內科，510010

R743.33

A

1673-5110(2017)04-0001-03