富血小板血漿對(duì)脂肪干細(xì)胞體外增殖及成脂分化的影響

李鋒，黃盛斌，趙樹蕃，鄧輝

（1.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔頜面外科，浙江溫州 325027；2.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔醫(yī)學(xué)研究所，浙江溫州 325027；3.廣州醫(yī)科大學(xué)附屬廣州市婦女兒童醫(yī)療中心口腔科，廣東廣州 510120；4.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院牙周科，浙江溫州 325027）

·論 著·

富血小板血漿對(duì)脂肪干細(xì)胞體外增殖及成脂分化的影響

李鋒1，黃盛斌2，趙樹蕃3，鄧輝4

（1.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔頜面外科，浙江溫州 325027；2.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔醫(yī)學(xué)研究所，浙江溫州 325027；3.廣州醫(yī)科大學(xué)附屬廣州市婦女兒童醫(yī)療中心口腔科，廣東廣州 510120；4.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院牙周科，浙江溫州 325027）

目的：研究不同體積分?jǐn)?shù)富血小板血漿（PRP）對(duì)脂肪干細(xì)胞（ASCs）體外增殖及成脂分化的影響。方法：采用酶消化組織塊法分離培養(yǎng)ASCs，有限稀釋法克隆純化，檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志物并進(jìn)行鑒定。改良兩步離心法從人全血中制備PRP。利用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒（CCK-8）檢測(cè)在培養(yǎng)基中分別添加不同體積分?jǐn)?shù)（0、10%、20%、30%）PRP對(duì)ASCs增殖的影響。反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)在成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加不同體積分?jǐn)?shù)PRP對(duì)ASCs成脂分化相關(guān)基因過氧化物酶體增殖體激活受體γ（PPARγ）、脂蛋白脂肪酶（LPL）、脂肪分化相關(guān)蛋白（adipophilin）表達(dá)的影響。結(jié)果：CCK-8結(jié)果顯示，培養(yǎng)基中添加PRP顯著促進(jìn)了ASCs的增殖（P＜0.01）；與10% PRP相比，20% PRP或30% PRP更好地促進(jìn)了ASCs的增殖（P＜0.01），而20% PRP與30% PRP相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。RT-PCR結(jié)果顯示，成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加PRP時(shí)，PPARγ、LPL、adipophilin表達(dá)均明顯升高（P＜0.05），而加入PRP的體積分?jǐn)?shù)為10%、20%、30%時(shí)，對(duì)PPARγ、adipophilin表達(dá)的影響差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），以20% PRP對(duì)LPL表達(dá)的促進(jìn)作用最為明顯（P＜0.01）。……