不同級別腦膠質瘤及正常腦組織中MGMT與XRCC1基因的表達及相關性分析

趙 克 趙 明 徐 欣 韓 磊 尤 宇 趙四軍

鄭州大學附屬腫瘤醫(yī)院神經外科 鄭州 450008

不同級別腦膠質瘤及正常腦組織中MGMT與XRCC1基因的表達及相關性分析

趙 克 趙 明 徐 欣 韓 磊 尤 宇 趙四軍

鄭州大學附屬腫瘤醫(yī)院神經外科 鄭州 450008

目的 分析不同級別腦膠質瘤及正常腦組織中MGMT與XRCC1基因的表達及相關性。方法 選取我院2012-06—2013-06收治的65例腦膠質瘤患者為研究對象，設為膠質瘤組，另選取腦組織正常的顱內高壓患者40例，設為對照組。實驗室檢查切除的腦組織，比較MGMT、XRCC1在膠質瘤與正常腦組織中的表達情況，MGMT、XRCC1在不同級別腦膠質瘤的分布，并分析MGMT與XRCC1表達的關系。結果 膠質瘤組MGMT表達陽性率(46.15%)高于對照組(2.50%)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。MGMT在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級膠質瘤中的分布比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。膠質瘤組XRCC1表達陽性率(38.46%)高于對照組(5.00%)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。XRCC1在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級膠質瘤中的分布比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。相關性分析結果顯示，MGMT與XRCC1在膠質瘤中的表達無相關性(r=0.897，P=0.346)。結論 腦膠質瘤患者MGMT與XRCC1表達陽性率較正常腦組織高，MGMT與XRCC1在不同級別腦膠質瘤中分布無顯著差異，且表達無顯著相關性。

不同級別腦膠質瘤；正常腦組織；MGMT；XRCC1；相關性

腦膠質瘤起源于腦組織中的神經膠質細胞，是顱內最常見的原發(fā)性惡性腫瘤，占顱內腫瘤的40%以上[1]。腦膠質瘤與肝癌、肺癌并稱為人體三大早亡的實體惡性腫瘤，其生存期較短。目前，臨床主要采用手術聯合放、化療等綜合治療方案進行治療，但術后復發(fā)率極高，接近100%，嚴重威脅患者身體健康，且臨床也缺少療效確切的化療藥物，預后較差，臨床治療是神經外科醫(yī)師面臨的重要難題[2]。近年來，隨著分子生物學的快速發(fā)展，監(jiān)測腫瘤基因表達產物逐漸被應用到臨床試驗中。本文分析不同級別腦膠質瘤及正常腦組織中MGMT(06-甲基鳥嘌呤DNA甲基轉移酶)與XRCC1(人類X線交錯互補修復基因1)基因的表達及相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選取我院2012-06—2013-06收治的65例腦膠質瘤患者為研究對象(膠質瘤組)，另選取腦組織正常的顱內高壓患者40例為對照組。本研究經醫(yī)院倫理委員會審查通過，所有患者均簽署知情同意書。膠質瘤組男40例，女25例；年齡18～70(40.56±7.68)歲；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級膠質瘤患者分別為13例、15例、21例、16例。對照組男28例，女12例；年齡20～72(40.37±7.75)歲。2組性別、年齡等基線資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1．2 方法 做腦部手術冰凍切片，且經病理診斷為惡性，30 min后取材，甲醛固定1～2 d后自來水沖洗，酒精脫水，二甲苯與無水酒精透明，經過浸蠟、包埋、切片、展片及粘片等制成切片后進行HE染色，常規(guī)病理切片觀察，采用S-P免疫組織化學法檢測，由2位經驗豐富的醫(yī)生采用雙盲法觀察，對照為贈送的陽性結果切片，PBS代替一抗作為陰性對照，細胞膜與細胞漿內出現棕黃色顆粒為陽性表現，染色后用低倍鏡觀察，然后用高倍視野觀察，計算陽性細胞百分數。參考標準：(1)0分：陽性細胞數<5%；1分：陽性細胞數為6%～50%；3分：陽性細胞數為51%～75%；4分：陽性細胞數>75%。(2)陽性強度：1分為淡黃色，2分為黃色，3分為棕褐色。以(1)、(2)乘積判斷陽性等級，陰性(-)為0分，弱陽性(+)為1～4分，陽性(++)為5～8分，強陽性(+++)為9～12分。

1．3 觀察指標 MGMT、XRCC1在膠質瘤與正常腦組織中的表達情況，MGMT、XRCC1在不同級別腦膠質瘤的分布；并比較MGMT與XRCC1表達的關系。

2 結果

2．1 MGMT在膠質瘤與正常腦組織中的表達情況比較 膠質瘤組MGMT表達陽性率高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 MGMT在膠質瘤與正常腦組織中的表達情況比較 [n(%)]

2．2 MGMT在不同級別腦膠質瘤的分布 MGMT在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級膠質瘤中分布比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 MGMT在不同級別腦膠質瘤的分布

2．3 XRCC1在腦膠質瘤及正常腦組織患者腦組織中表達情況比較 膠質瘤組XRCC1表達陽性率高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 XRCC1在腦膠質瘤及正常腦組織患者腦組織中表達情況比較 [n(%)]

2．4 XRCC1在不同級別腦膠質瘤的分布 XRCC1在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級膠質瘤中分布比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表4。

表4 XRCC1在不同級別腦膠質瘤的分布

2．5 MGMT與XRCC1表達的關系 進行相關性分析結果顯示，MGMT與XRCC1在膠質瘤中的表達無相關性(r=0.897，P=0.346)。見表5。

表5 MGMT與XRCC1表達的關系

3 討論

2007年，世界衛(wèi)生組織(WHO)根據腫瘤細胞的細胞組成、血管增生、不典型性、浸潤程度等病理學、組織學因素將腦膠質瘤分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級，每個級別中又有各自的分類；近年來，膠質瘤發(fā)病率逐年提高，5 a存活率為20%～30%[3]。膠質瘤具有浸潤性生長、生長迅速等特點，采用手術聯合化療等綜合治療方法也療效甚微。研究表明，MGMT與XRCC1的表達情況與腦膠質瘤有密切相關[4]。胡永珍等[5]認為MGMT與XRCC1基因單核苷酸多態(tài)性與惡性腫瘤的發(fā)生相關，MGMT與XRCC1可能參與維持基因組的穩(wěn)定性，也可與抑癌基因p53相互作用。

本研究主要分析不同級別腦膠質瘤及正常腦組織中MGMT與XRCC1基因的表達及相關性。MGMT與XRCC1在不同級別膠質瘤中分布比較差異無統(tǒng)計學意義，可能是不同個體、不同器官、同一腫瘤組織的不同部位MGMT與XRCC1的基因表達存在較大差異，且不同級別腫瘤細胞染色強度與分布不均勻，所以MGMT與XRCC1的基因的陽性表達率與腫瘤惡性程度無關聯。膠質瘤組MGMT、XRCC1表達陽性率高于對照組，MGMT作為一種修復O6甲基鳥嘌呤的酶，可修復DNA損傷，且修復DNA烷化損傷的重要酶類，因此惡性膠質瘤細胞可對化療藥物產生耐藥性。在腫瘤細胞中，XRCC1編碼的蛋白質與DNA連接酶Ⅲ可相互作用，可使DNA單鏈斷裂得到修復，致使腫瘤細胞耐藥；腫瘤細胞XRCC1表達陽性率越高，則DNA修復能力越強，也會導致腫瘤耐藥性增強。Tang等[6]研究表明，MGMT與XRCC1可通過加強表達促進DNA的自我修復，均為參與腫瘤自我修復的部分基因。MGMT與XRCC1在膠質瘤中的表達無相關性，腫瘤的發(fā)生與發(fā)展是多事件、多基因、多階段復雜過程積累的結果。本研究選取樣本量較少，不能得出肯定的結論，尚需進一步研究。張亞飛[7]對不同級別腦膠質瘤及正常腦組織中MGMT與XRCC1基因的表達及相關性研究結果顯示，腦膠質瘤患者MGMT與XRCC1表達陽性率較高，在不同級別腦膠質瘤中分布無顯著差異，兩者表達無明顯相關性。

綜上，腦膠質瘤患者MGMT與XRCC1表達陽性率高于正常腦組織，在不同級別腦膠質瘤中分布無顯著差異，且表達無顯著相關性，尚需進一步研究。

[1] Stupp R，Hegi ME，Van den Bent MJ，et al．Changing paradigms：an update on the multidisciplinary management of malignant glioma[J]．Oncologist，2006，11(2)：165-180．

[2] 牛華濤，羅林，胡早秀，等．XRCC1在腦膠質瘤中的表達及與放療的相關性研究[J]．昆明醫(yī)科大學學報，2013，34(11)：29-32．

[3] 吳建珩，李曉輝，單嶠，等．星形膠質細胞上調基因1和基質金屬蛋自酶9在人腦膠質瘤中的表達及其相關性研究[J]．中國全科醫(yī)學，2014，17(6)：648-651．

[4] 梁曉陽，劉洛同，明揚，等．人腦膠質瘤中Fas、Caspase8的表達[J]．海南醫(yī)學，2014，7(23)：947-949．

[5] 胡永珍，王殿洪，龔海東，等．XRCC1和MGMT基因多態(tài)性與東北地區(qū)漢族人群膠質瘤易感相關性研究[J]．中華腫瘤防治雜志，2013，20(21)：1 629-1 633．

[6] Tang K，Jin Q，Yan W，et al．Clinical correlation oI MUMT protein expression and promoter methylation in Chinese glioblasto ma patients[J]．Med Oncol，2012，12(23)：15-17．

[7] 張亞飛．不同級別腦膠質瘤及正常腦組織中MGMT與XRCC1基因的表達及相關性研究[J]．海南醫(yī)學院學報，2015，21(9)：1 225-1 227．

(收稿2016-06-27)

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A

1673-5110(2017)01-0043-03