雞馬立克氏病的診斷與防控

徐桂勇

摘要：從流行病學、臨床癥狀、實驗室診斷技術和防控措施等方面對雞馬立克氏病進行了介紹。

關鍵詞：雞馬立克氏病；流行病學；診斷；防制

中圖分類號：S858.31 文獻標識碼：B 文章編號：1007-273X（2016）09-0037-02

馬立克氏病（Marek's Disease，MD）是雞常見的一種淋巴細胞增生性疾病，通常以外周神經、包括虹膜和皮膚在內的多種器官和組織的單核細胞 浸潤和腫瘤 的形成為特征。1907年，由Jozef Marek首次報道本病，因此現在以他的名字命名本病[1]。

在應用疫苗預防MD以前，MD對養禽業構成嚴重的經濟危害，產蛋雞死亡率甚至可高達60%，而肉雞的淘汰率則高達10%。1984年，僅美國由MD引起的雞死亡和淘汰的總損失約為1 200萬美元[2]。我國于20世紀70年代初發現該病，隨著養雞業向集約化方向發展，目前絕大多數養雞地區都有本病流行，受害雞群的發病率從少數幾只雞到20%～30% 不等，最高可達60%。在雞群密集的地區和大規模經營的雞場MD常成流行性[3]。

1 流行病學

1.1 傳播方式

雞群間通過空氣傳播，直接或間接接觸很容易傳播MDV，雞羽毛囊角質層的上皮細胞中可復制出具有完全感染性的病毒，這些細胞成為對環境及其他雞的污染源。與羽毛和皮屑結合的病毒是有感染性的，污染的禽舍灰塵在20～25 ℃至少幾個月、4 ℃數年仍有感染性。在商業化飼養條件下，小雞常常會暴露于MDV，主要是接觸育成雞舍殘存的灰塵和皮屑或是通過氣溶膠（來自相鄰雞舍）、污染物和人員。病毒進入雞群后，不論雞群免疫狀態如何，都會在雞群中快速傳播。接種或接觸后兩周開始排毒，在第3-5周達到高峰。一旦感染，雞會長久排毒。黑色甲殼蟲可被動攜帶病毒，但自由生活的墊料瞞類、蚊子和球蟲的卵囊與傳播無關。MDV不能垂直傳播[4]。

1.2 潛伏期

臨床上，最早有3～4周齡的非免疫產蛋雞暴發本病。大多數嚴重病例都從8或9周齡開始，且有時要到開產后才發病。在免疫的商品雞群中MD的暴發是由于疫苗的明顯免疫失敗不能提供保護。現在實踐中很難判斷新發疾病是早期感染的還是新近感染的，但在某些條件下，MD淋巴瘤的潛伏期可能會達到幾個月或幾年。

1.3 發病率和死亡率

商品雞群馬立克病發病率變動很大，除少數雞可從臨診疾病恢復，一般來說死亡率和發病率相同。應用疫苗以前，感染雞群的損失從25%～30%不等，偶爾可以高達60%。目前，幾乎所有商品產蛋雞都免疫接種MD疫苗，這使大多數國家的MD損失小于5%。因為肉雞出欄較早，有些國家對肉雞群進行免疫，有些國家則沒有[5]。

2 臨床癥狀

馬立克氏病可根據臨床癥狀的不同分為四種類型：神經型、內臟型、眼型和皮膚型[6]。神經型以侵害坐骨神經最為常見，表現為一側較輕，一側較重。病雞步態不穩，開始不全麻痹，后則完全麻痹，不能站立、蹲伏或呈一腿伸向前方一腿伸向后方的特征性姿勢。臂神經受侵時則被侵側翅膀下垂。當支配頸部肌肉的神經受侵時，病雞發生頭下垂或頭頸歪斜。當迷走神經受侵時，可引起失聲、嗦囊擴張和呼吸困難。腹神經受侵時常有拉稀癥狀。病雞采食困難、饑餓、脫水、消瘦，最后衰竭死亡[7]。

內臟型這一型多呈急性暴發，病性急驟，開始時以大批雞精神萎靡。幾天后部分病雞出現共濟失調，隨后出現單側或雙側肢體麻痹。部分病雞死亡而無特征臨診癥狀。很多病雞表現脫水、消瘦和昏迷[8]。

眼型出現于單眼或雙眼，視力減退或消失。虹膜失去正常色素，呈同心環狀或斑點狀以至彌漫的灰白色。瞌孔邊緣不整齊，到嚴重階段瞌孔只剩下針尖大 小的孔[9]。

皮膚型在體表皮膚上出現黃豆大的腫瘤，觸感內容堅實，外觀不斷增大，也不會自行脫落和消失，常零星散發于年齡較大的肉鴿/鵪鶉。且病程較長，逐漸消瘦衰竭死亡[10]。

3 實驗室診斷技術

3.1 病毒分離與細胞培養

病毒來源接種后1～2 d或接觸感染后 5 d的雞及病雞的一生都可以分離到MDV。盡管感染雞的皮膚、皮屑或羽髓尖的細胞游離性制備物可含有病毒，但完整的有活力的細胞為較好的接種物。初次分離 MDV的最常用的方法是用血液淋巴細胞或感染雞淋巴組織的單細胞懸液接種易感的組織培養物。 CKC和DEF是初次分離血清l型MDV的首選培養物，而CEF通常用于分離血清2型和HVT病毒及致弱的血清I型疫苗株。接種培養物在3～12 d內出現典型蝕斑，根據形態學標準可以區分血清I、II型和III型病毒產生的蝕斑。

3.2 病毒分析和滴定

在體外可用與病毒分離相同的技術對血清I、 II型和HVT病毒進行定量測定。不同血清型的方法不同，但均依靠在易感細胞培養物上產生蝕斑進行測定。蝕斑剛成熟就應進行計數（不同的分離物出現的時間不同），因為培養物在液體培養液中維持時可能形成二次蝕斑。

3.3 病毒抗原檢測

現己制備了抗3種MDV所有血清型的共同或特異性表位的單克隆抗體，可用于組織中抗原檢測。可用相應抗體通過熒光抗體試驗、免疫組化試驗、瓊脂凝膠沉淀試驗和酶聯免疫吸附試驗，在羽毛尖和羽毛囊上皮、溶細胞性感染的淋巴組織、腦或感染的培養細胞物中檢測到病毒抗原。

3.4 聚合酶鏈式反應（PCR）

設計引物擴增出血清l型MDV特異性的132 堿基對序列己有報道。用這些引物進行的PCR可區分致弱株和野毒株，并可檢測淋巴瘤中的病毒 DNA，還可應用其他多種引物。然而PCR用于檢測潛伏感染組織卻不夠敏感，可能是由于陽性細胞過少，或每個細胞中病毒基因組的數量過低。定量 PCR也被用來檢測相關的MD疫苗株，而且PCR試驗己用于鑒別野外現場雞血淋巴細胞和羽毛尖中的 MDV和HVT[11]。

3.5 抗體檢測

檢測雞血清中特異抗體的試驗對于病毒的發病機理研究和無特定病原監測很有用。常用方法包括：瓊脂凝膠沉淀試驗、熒光抗體試驗、ELISA和病毒中和試驗。瓊脂凝膠沉淀試驗最不敏感，但用于監測感染或疫苗免疫雞群的血清學還是很合適的，但這些方法中還沒有一種能區分三種血清型的抗體[12]。

4 防控措施

4.1 免疫接種

MD疫苗接種于出殼前和剛孵出的雛雞，因為早期免疫力很重要[13]。細胞結合性疫苗和細胞游離性疫苗都是通過皮下和肌肉注射，一般每只雞劑量超過2000蝕斑形成單位（PFU）。在孵化到18天直接給雞胚接種疫苗也能發揮作用。

4.2 提高遺傳抵抗力

遺傳抗性雞通過免疫接種得到的保護程度比易感雞更大，這使商品雞育種者在選育計劃中更加強調MD的抗性[14]。但宿主抗性與疫苗之間的協同作用很復雜，血清I型疫苗對某種B-單倍體型能提供最好的保護，但血清II型疫苗對B5雞效果最好。這說明在特定品系中優勢B-單倍體型的基礎上可以選擇出最合適的疫苗。

4.3 管理措施

盡管最為主要的疾病控制措施是不現實的，但嚴格的生物安全可減少早期接觸MDV，是疫苗接種的關鍵且費用極低的輔助措施。現代家禽飼養管理中，仍然常常將不同日齡的雞群放置在很遠的地方飼養，甚至還要重復使用上批肉用雞群使用過的墊料，這不利于MD的防控。對于SPF雞群而言，需要更高的生物安全標準。多數SPF企業使用空氣過濾的正壓動物房[15]，連同嚴格的生物安全措施，可以成功的使雞群長期免受MDV感染。在這種情況下，生物安全成為疫苗接種的替代措施，至少在特定條件下能夠在某些雞群根除MDV提供實踐證明。

參考文獻：

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[15] 安洪偉. 淺談某公司SPF級實驗動物房的設計及管理[J].現代制造，2015（35）：52-55.