山莨菪堿聯(lián)合烏司他丁對重癥胰腺炎大鼠模型的應(yīng)用價值

黎永勝

汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院急診科，廣東汕頭 515041

山莨菪堿聯(lián)合烏司他丁對重癥胰腺炎大鼠模型的應(yīng)用價值

黎永勝

汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院急診科，廣東汕頭 515041

目的 探討大劑量山莨菪堿聯(lián)合烏司他丁治療重癥胰腺炎（SAP）的效果。 方法 取健康成年大鼠90只，依據(jù)隨機數(shù)字表法分為對照組1（SAP組）、對照組2（SAP+烏司他丁治療組）和觀察組（SAP+大劑量山莨菪堿+烏司他丁治療組），每組各30只。 結(jié)果 采用大劑量山莨菪堿聯(lián)合烏司他丁治療的觀察組SAP大鼠血清淀粉酶、磷脂酶A2及內(nèi)毒素水平低于對照組，3d存活率（73.33%）明顯高于對照組；對照組2血清淀粉酶、磷脂酶A2及內(nèi)毒素水平明顯低于對照組1（P＜0.05）。 結(jié)論 大劑量山莨菪堿聯(lián)合烏司他丁治療SAP，能有效松弛Oddi括約肌，抑制蛋白酶反應(yīng)，抑制炎性介質(zhì)表達，延長SAP存活期。

重癥胰腺炎；山莨菪堿；烏司他丁；存活率

急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）是臨床外科常見急腹癥，重癥急性胰腺炎（severe acutepancreatitis，SAP）病情兇險，是目前外科急腹癥中最棘手的疾病之一，病死率極高[1-2]。SAP患者Vater壺腹阻塞，膽汁返流入胰管，激活胰腺消化酶，使膽汁中的結(jié)合膽汁酸變成游離膽汁酸，后者激活磷脂酶原A，作用于膽汁中的卵磷脂，產(chǎn)生溶血卵磷脂，溶血卵磷脂的細胞毒性作用使胰腺組織發(fā)生損失及壞死[3]。因此治療急性胰腺炎的關(guān)鍵是松弛Oddi括約肌、解除Vater壺腹處梗阻[4-5]。SAP的治療很大程度上依賴有效藥物的對癥及支持，以降低組織損害。本研究制作大鼠SAP模型，觀察各組SAP大鼠血淀粉酶、磷脂酶A2、內(nèi)毒素指標變化，并探討大劑量山莨菪堿聯(lián)合烏司他丁對SAP的治療作用，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

取實驗用健康大鼠90只，體質(zhì)量均在200～250g，實驗前12h禁食，可自由飲水，依據(jù)隨機數(shù)字表法將90只大鼠進行分組，對照組1（SAP組）、對照組2（SAP+烏司他丁UTI治療組）和觀察組（SAP+大劑量山莨菪堿654-2+烏司他丁UTI治療組），每組各30只。

1.2 SAP大鼠模型制作

所有大鼠均吸入乙醚、腹腔注射氯胺酮進行麻醉，麻醉顯效后，用0.2%活力碘消毒大鼠腹壁，在腹壁正中取一切口入腹，取出十二指腸，仔細尋找膽胰管，將5%?；悄懰徕c溶液0.2mL注入膽胰管末端，制備SAP模型需在顯微手術(shù)鏡下進行操作[6]。模型制作完畢后，為補充術(shù)中丟失的液體，在大鼠背部皮下注射0.9%氯化鈉2.5mL/100g。10min后觀察，如大鼠胰腺出現(xiàn)水腫、或發(fā)生點狀出血及壞死，則SAP模型制作成功。

1.3 藥物治療

模型制作成功后，對照組1不予藥物治療，對照組2靜脈注射烏司他丁2000U（常州天普制藥有限公司，H19990131），觀察組靜脈注射大劑量山莨菪堿（654-2）10mg（杭州民生藥業(yè)集團有限公司，H33021706）+烏司他丁(UTI)2000U。6h后各組再重復(fù)注射上述藥物1次。

1.4 觀察指標

（1）12h后各組處死15只SAP大鼠模型，心臟采血，采用碘比色法檢測血清淀粉酶，采用酸滴定法檢測磷脂酶A2，采用基質(zhì)偶氮顯色鱟實驗法檢測內(nèi)毒素。（2）觀察每組另外15只SAP大鼠的生存情況。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 血清淀粉酶、磷脂酶A2及血漿內(nèi)毒素水平

采用654-2+UTI治療的觀察組SAP大鼠血清淀粉酶、磷脂酶A2及血漿內(nèi)毒素水平低于對照組，采用UTI治療的對照組2各項指標低于對照組1，各組間差異比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（F=73.866，65.708，59.055，P＜0.05），見表1。

表1 各組SAP模型實驗室指標分析

表1 各組SAP模型實驗室指標分析

注：觀察組與對照組1比較，*P＜0.05；觀察組與對照組2比較，#P＜0.05；對照組1與對照組2比較，△P＜0.05

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2.2 SAP模型動物生存情況

觀察組SAP大鼠3d存活率為73.33%，分別高于兩個對照組（33.33%和26.67%），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（x2=6.533，4.821，P＜0.05）；且對照組2存活率高于對照組1，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（x2=0.159，P＞0.05），見表2。

表2 SAP模型動物生存情況比較

3 討論

急性胰腺炎臨床表現(xiàn)為胰管阻塞、胰腺消化酶對其自身進行消化，導(dǎo)致胰腺壞死[7-8]。重癥胰腺炎SAP發(fā)生率約占8%～12%，但病死率高達15%～20%。

山莨菪堿（654-2）是膽堿受體阻滯劑[9]，靜推大劑量山莨菪堿4mg/（kg·d）治療AP，可明顯減輕微循環(huán)損傷，降低病死率后，且不良反應(yīng)很少[10]。大劑量山莨菪堿的全身應(yīng)用，通過解痙作用，松弛Oddi括約肌，降低膽胰管系的壓力[11]；還對胰周植物神經(jīng)起到阻滯作用，減少神經(jīng)性胰液、胰酶分泌，降低胰腺組織的自身消化[12]。Yuthika[13]研究中指出，烏司他丁是一種蛋白酶抑制劑，取自健康成年男性新鮮尿液，能有效抑制胰蛋白酶、α糜蛋白酶、透明質(zhì)酸酶、纖溶酶等多種酶的活性，還可抑制溶酶體酶的釋放，抑制炎癥介質(zhì)釋放，清除氧自由基對機體的傷害。本研究對SAP大鼠模型采用大劑量山莨菪堿（654-2）聯(lián)合烏司他丁治療，結(jié)果顯示血淀粉酶、PLA2及內(nèi)毒素水平明顯低于兩個對照組（P＜0.05），證明該聯(lián)合用藥方案可抑制蛋白酶活性，降低炎性介質(zhì)的表達，從而減小胰腺損傷。

導(dǎo)致SAP死亡的主要并發(fā)癥是ARDS和多器官功能衰竭（MOSF）[14]。大劑量山莨菪堿可解除小血管痙攣，改善肺組織微循環(huán)，保護溶酶體膜，減少肺組織的損傷，因而可降低ARDS發(fā)生率。烏司他丁對多種酶有抑制作用，可有效對抗內(nèi)毒素，降低SAP全身炎性反應(yīng)綜合征（SIRS），預(yù)防MOSF，從而有效延長患者生存期。治療效果明顯。本研究結(jié)果2顯示，觀察組SAP模型3d存活率高達73.33%，證實該聯(lián)合用藥方案可有效延長SAP壽命，值得推廣應(yīng)用。

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Application value of high doses of anisodamine combined with ulinastatin in the treatment of rats with severe acute pancreatitis

LI Yongsheng
Department of Emergency,the First Affiliated Hospital of Shantou University, Shantou 515041,China

Objective To investigate the effects of high doses of anisodamine combined with ulinastatin in the treatment of severe acute pancreatitis (SAP). Methods 90 healthy adult rats were divided into 3 groups according to random number table:the control group 1 (SAP),the control group 2 (SAP rats treated by ulinastatin) and the observation group (SAP rats treated by ulinastatin and high doses of anisodamine),30 rats in each group. Results The level of serum amylase,phospholipase A2 and endotoxin lower in the observation group using high doses of anisodamine combined with ulinastatin than that in the control group,the survival rate on the third day was 73.33%,was significantly higher than that in the control group.The level of serum amylase,phospholipase A2 and endotoxin significantly was lower the control group 2 than that in the control group 1 (P＜0.05). Conclusion The high dosage of anisodamine combined with ulinastatin on SAP,can effectively loose sphincter of Oddi,inhibit the protease reaction,inhibit the expression of inflammatory mediators, prolong the survival period of SAP.

Severe acute pancreatitis;Anisodamine;Ulinastatin;Survival rate

R576

A

2095-0616（2015）07-27-03

2014-12-01）