2012年哈爾濱市手足口病實驗室檢測結果分析

張炳麗 宋曉琳 懷清杰 唐道洲 梁 爽 王 宇 杜溪喬

哈爾濱市疾病預防控制中心，黑龍江哈爾濱 150056

2012年哈爾濱市手足口病實驗室檢測結果分析

張炳麗 宋曉琳 懷清杰 唐道洲 梁 爽 王 宇 杜溪喬

哈爾濱市疾病預防控制中心，黑龍江哈爾濱 150056

目的 了解哈爾濱市2012年手足口病病原特點。 方法 采用Real time RT-PCR 對2012年采集的糞便、咽拭子、肛拭子等標本檢測腸道病毒、CoxA16、EV71。 結果 共檢測手足口標本1046份，腸道病毒陽性676份（64.6%)，EV71陽性83份（7.9%），CoxA16陽性489份（46.7%），其他腸道病毒104份(15.3%)；陽性標本中，男性陽性382份（56.5%），女性陽性294份（43.5%）；全年6 ～ 7月份為高峰，腸道病毒感染主要集中于5歲以下兒童，占陽性標本的89.9%。 結論 5歲以下兒童是手足口病感染的主要人群，2012年哈爾濱市手足口主要流行株為CoxA16，而EV71和其他HEV也同時存在。

手足口病； 腸道病毒；CoxA16； EV71

手足口病是由多種腸道病毒引起的常見腸道傳染病，引起手足口病的腸道病毒有20多種（型），其中以腸道病毒71型（簡稱EV71）和柯薩奇A組16型（簡稱CA16）最為常見[1-2]。該病傳染性強，傳播途徑復雜，短時間內已造成大流行，重癥患兒病情進展快，病死率高，易引起社會恐慌[3]。本研究對2012年哈爾濱市各醫(yī)院診斷疑似手足口病例采集的1046份手足口病標本進行檢測，現(xiàn)將檢測結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源

所有病例均按照《手足口病預防控制指南（2009版）》[4]中診斷標準進行采樣，標本主要來自哈爾濱市兒童醫(yī)院和哈爾濱市傳染病醫(yī)院及各區(qū)縣疾病預防控制中心送檢的疑似手足口病例的咽拭子、肛拭子、糞便等標本。采集的1046份標本均按指南要求采集運輸及保存。

1.2 實驗室檢測

1.2.1 檢測方法 采用Real time RT-PCR對采集的標本進行腸道病毒核酸檢測。咽拭子肛拭子標本充分振蕩，糞便標本加入PBS和氯仿劇烈震蕩混勻，然后各標本3000rpm離心20min，吸取上清液待檢，病毒RNA的提取用德國QIAGEN公司生產(chǎn)的Rneasy Mini Kit試劑盒，提取RNA 50μL。用江蘇碩世生物科技有限公司生產(chǎn)的柯薩奇病毒A16型和腸道病毒71型+腸道病毒通用型核酸檢測試劑盒進行檢測，按試劑盒說明書進行操作。

1.2.2 儀器設備 ABI7500實時定量PCR擴增儀（美國ABI公司）；QIAcube核酸蛋白純化儀（德國QIAGEN公司）。

2 實驗室檢測結果

2.1 實驗室檢測結果果分析

2012年1～12月共采集臨床診斷標本1046份，腸道病毒陽性標本676份（64.6%）。其中EV71陽性83份（8.9%），CA16陽性489份（46.7%），其他HEV陽性104份（9.9%）。

2.2 手足口陽性標本分布

2.2.1 年齡分布 在2012年采集標本中，年齡在幾個月和44歲之間。676份腸道病毒陽性標本中，5歲以下的兒童共607份陽性占89.7%，EV71型陽性75份占EV71型陽性90.3%，CA16型陽性433份占CA16型陽性88.5%。見表1。

2.2.2 季節(jié)分布 2012年全年對手足口病進行監(jiān)測，5月份開始上升，6～7月份為高峰，8月份開始下降，6～7月占全年陽性63.5%，10月份以后只有5份陽性，均為CA16。見表2 。

2.3 性別分布

在2012年檢測的1046份病例中，男性病例數(shù)592例（56.6%），女性病例數(shù)454例（43.4%）。其中腸道病毒陽性標本男性382份（56.5%），女性294份（43.5%），腸道病毒陽性標本病例數(shù)男性與女性比例為1.3∶1。

表1 哈爾濱市2012年不同年齡手足口檢出情況

表2 哈爾濱市2012年不同月份手足口檢出情況

3 討論

手足口病是全球性傳染病，自2008年安徽阜陽手足口病爆發(fā)以來，我國大陸地區(qū)手足口病大范圍流行，部分地區(qū)大規(guī)模爆發(fā)，且發(fā)病率和病死率逐年呈上升的趨勢，EV71感染易導致嚴重和死亡病例，造成巨大的社會負擔，手足口病已成為政府和社會高度關注的公共衛(wèi)生問題。

近年來，哈爾濱市手足口防控形勢十分嚴峻，本文對2012年采集的1046標本檢測結果顯示；EV71陽性率為7.9%，CA16陽性率為46.7%，其它HEV陽性率為9.9%，2012年哈爾濱市手足口優(yōu)勢流行株為CA16，而EV71和其他HEV也同時存在。

從季節(jié)分布來看，哈爾濱市手足口病呈明顯的的季節(jié)流行，5月份開始上升，6～7月份為高峰，8月份開始下降，全年呈單峰流行，而我國南方城市多以4～7月流行高峰及11～12月次高峰流行的雙峰流行模式不同[5-6]。這種流行模式的差異可能由于不同的地域氣候條件所導致。所以做好春夏季手足口病的防控工作，對于降低該病發(fā)病率具有重要意義。從性別分布來看男性陽性病例明顯多于女性[7-9]可能與男孩更好動，喜歡到戶外活動，與外界接觸頻繁，導致感染機會較多。從年齡分布來看，5歲以下兒童為高危人群[10-11]，2～4歲為手足口多發(fā)人群，主要是由于這些人群中和抗體陽性率低[12]，對腸道病毒感染抵抗力低，且衛(wèi)生意識相對較差，托幼機構人員密集，發(fā)生交叉感染機會多有關。因此應加強對5歲以下兒童手足口病病原的監(jiān)測。

本次研究初步掌握了哈爾濱市手足口病的病原學實驗室診斷、人群分布、流行季節(jié)等特點，但未對104份其他腸道病毒進行分型研究，今后要對其進一步的檢測和測序分析，掌握手足口病的病原譜，了解手足口病相關病毒的變異及進化狀態(tài)，為哈爾濱市的手足口防控措施的制定和調整提供科學依據(jù)。

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Clinical laboratory testing of hand foot mouth disease in 2012,harbin city

ZHANG Bingli SONG Xiaolin HUAI Qingjie TANG Daozhou LIANG Shuang WANG Yu DU Xiqiao
Harbin Center for Disease Control and Prevention , Harbin 150056,China

Objective To learn the pathogenic characters of hand-foot- mouth disease(HFMD) in harbin，2012。Methods Stool throal swab and rectal swab samples from patients diagnosed as HFMD were collected to detect pan-enterovirus ，CoxA16 and EV71 by using Real time RT-PCR. Results A total 1046 samples were collected to detect，676 pan-enterovirus positive samples were detected during 2012.Among them，83（7.9%）were EV71，489(46.7%）were CoxA16，and 104 were the other enterovirus.The positive rate of male was 56.5%，The positive rate of female was 43.5%.Enterovirus infection peaked in June to July.A peak age distribution of enterovirus infection was below five year-old(89.9%）. Conclusion The people who is below five year-old is a peak age distribution of enterovirus infection. CoxA16 is the main pathogen of HFMD in harbin in 2012，EV71 and the other enterovirus are existed at the same time.

HFMD; Enterovirus; CoxA16;EV71

R725.1

B

2095-0616（2015）07-208-03

2014-12-19）