渾濁尿液標本在U F-5 0 0 i分析儀上的應用

梁朝坤

攀鋼集團總醫院密地院區檢驗科，四川攀枝花617063

渾濁尿液標本在U F-5 0 0 i分析儀上的應用

梁朝坤

攀鋼集團總醫院密地院區檢驗科，四川攀枝花617063

尿液分析是一項很常規的檢驗，而目前自動化尿液分析儀器也只能是起過篩作用，最終確認有形成分還得以顯微鏡鏡檢結果為準。尿液中有形成分過多的標本外觀往往呈渾濁狀態，用UF-500i檢測這些渾濁標本往往會產生相互干擾或引起攜帶污染，合理處理渾濁的尿液標本，可減少假陽性的結果，降低顯微鏡復檢率，從而提高工作效率。

渾濁；尿液有形成分；攜帶污染

Sysmex UF-500i全自動尿液有形成分分析儀是通過流式細胞術對尿液有形成分的電阻抗變化和熒光散射強度進行檢測和分析[1]，具有操作簡單、檢測快速、精密度高，人為偏差小、安全等優點。雖然該儀器性能相比前幾代產品有所提高，但還是不能完全取代顯微鏡鏡檢，而顯微鏡雖然是尿液有形成分診斷的“金標準”，但畢竟使用顯微鏡鏡檢費時費力，且由于檢驗人員之間的差異，不利于檢驗流程的標準化。所以清楚儀器的工作原理以及會對檢測結果產生影響的因素后，檢測前合理處理一些“特殊”標本，就能減少標本本身對檢測結果產生的影響及干擾，從而提高工作效率。在工作過程中，也發現了一些問題，如當尿液標本中的有形成分濃度過高時，尿液外觀呈現出渾濁的狀態，檢測結果多會受到干擾出現假陽性甚至出現攜帶污染。引起尿液標本外觀渾濁的原因一般是因為尿液中的有形成分較多、濃度較高所致，如尿液標本中含有較多量紅細胞、白細胞（膿細胞）、細菌、酵母樣菌、管型、草酸鈣結晶、尿酸結晶、磷酸鹽結晶、上皮細胞等。

1 儀器的檢測原理

Sysmex UF-500i應用了流式細胞術和電阻抗的原理。儀器吸入定量的尿液標本，經稀釋、加溫和染色后，依靠液壓作用噴射入鞘液流動池。儀器將捕捉到的熒光強度（Fl，從染色細胞發出的熒光，主要反映細胞染色的強度）、前向熒光脈沖寬度（Flw，主要反映細胞染色質的長度）、前向散射光強度（Fsc，主要反映細胞大小）、前向散射光脈沖寬度（Fscw，主要反映細胞長度）、電阻抗（主要與細胞體積成正比）等轉變成電信號，并對各種信號進行分析、綜合識別和計算得到相應細胞的大小、長度、體積和染色質長度等信息，形成紅細胞、白細胞、細菌、管型等有形成分定量報告，并得到有形成分的直方圖和散點圖，從而對尿中有形成分進行鑒別并計數。

UF-500i尿液有形成分分析儀檢測速度快，在檢測報告中，除了給出紅細胞、白細胞、上皮細胞、管型、細菌等主要有形成分的定量參數外，還給出了一些標記參數和紅細胞的相關信息。UF-500i的使用極大地提高了工作效率，同時也為臨床提供了較多的輔助診斷的信息，如可根據紅細胞的形態信息輔助診斷泌尿道出血的位置；可根據定量計數的動態結果來有效監測患者病情的發展趨勢及治療效果等。尿液標本中的有形成分較為復雜，部分有形成分之間的檢測參數相似，從而造成UF-500i不能準確地將它們區分，從而造成假陽性結果的出現。

2 大量有形成分造成檢測出現假陽性結果

2.1 對紅細胞計數的影響

尿液中一些有形成分如酵母樣菌、結晶等在形態、大小、染色上與紅細胞類似，儀器不能完全準確區分這些有形成分，從而造成紅細胞計數不準確。工作中該研究發現許多尿液干化學分析儀檢測紅細胞陰性而UF-500i檢測紅細胞結果為陽性的標本，會報警提示“RBC/ X'TAL刻度異常”，鏡檢后發現這些尿液存在草酸鈣等結晶，然后觀察散點圖，也確實會出現結晶與紅細胞分布區域交叉；酵母樣菌雖然有細胞核，但染料對膜的通透性低，染色后酵母樣菌的熒光強度和前向散射光強度較低[2]，所以當尿液中含有酵母樣菌時，也可能會干擾紅細胞的檢測，從散點圖分布中可以看出，紅細胞與酵母樣菌所分布的區域有交叉現象，有些酵母樣菌含量較高的標本，儀器會報警提示“RBC/YLC刻度異常”。有研究表明尿液中的酵母樣菌含量越高，被儀器誤認為紅細胞的情況越嚴重[3]；細菌因含有核酸，故經染色后熒光強度大于紅細胞的熒光強度，UF-500i對細菌進行了特異性染色且專門設有細菌檢測通道，大大提高了檢測細菌的準確度，但尿液中大量球菌和桿菌存在時，細菌在代謝時產生的一些有毒物質，可改變細胞膜通透性及變形性，使得細菌在尿液中成堆出現。菌團大小與紅細胞相似有可能被誤認為紅細胞[4]，此時在散點圖中可見細菌與紅細胞在散點圖中有交叉的區域，且有時儀器會報警提示“RBC/BACT刻度異常”；聚集成團的非晶形尿酸鹽、磷酸鹽也會使紅細胞測定結果假性升高并影響紅細胞分析。

2.2 對紅細胞信息的影響

Sysmex UF-500i尿有形成分分析儀對紅細胞識別計數的同時記錄其形態信息，尿有形成分流式細胞儀可將尿紅細胞形態自動分為均一性、非均一性、混合性3型。儀器將80%紅細胞前向散射光強度（FSC）≥84 ch，歸為均一性紅細胞，多為非腎小球性血尿；將80%紅細胞前向散射光強度（FSC）≤126 ch，歸為非均一性紅細胞，多為腎小球性血尿；而紅細胞前向散射光強度介于兩者之間時，則為可判斷為混合性紅細胞，提示出血不是起源于一個部位[5]。紅細胞形態的檢測有利于泌尿系統疾病的診斷，對判斷出血部位有很大的輔助診斷價值，當紅細胞計數受到干擾時，紅細胞形態信息也必然受到影響，造成檢測結果的不準確，此時可能干擾臨床對患者病情的診斷甚至導致誤診。

2.3 對白細胞計數的影響

白細胞檢測中，UF-500i與鏡檢結果比較陽性和陰性符合率比較高，但還是有假陽性出現[6]，主要由檢測參數相似的小圓上皮細胞引起，當尿液中有大量非晶形鹽類結晶時，也會出現白細胞的假陽性。

2.4 影響管型識別

UF-500i尿沉渣分析儀根據前向散射光脈沖測定管型的長度，通過熒光測定管型內是否含有顆粒（病理管型），電阻抗脈沖測定管型的體積。當尿液中出現與管型檢測參數相似的物質時就會干擾管型（病理管型）的檢測。尿中含有大量粘液絲時，如粘液絲大小和外形接近管型時，易被儀器誤認歸為管型；當粘液絲上粘附有白細胞、細菌、真菌等物質時，經過染色后，易被儀器識別為病理管型；尿中含有較多膿細胞時，成團的膿細胞在通過儀器檢測孔時易形成串珠狀排列，此時易被儀器誤認為是病理管型；當發生上皮細胞粘連成一體時，其分布寬度和散射寬度均增大，被儀器誤認為病理管型[7]。

3 高濃度尿液有形成分容易引起攜帶污染

3.1 大量紅細胞

當采用自動進樣模式檢測含有大量紅細胞的尿液標本時，可能會因為攜帶污染而影響后面相鄰標本的檢測結果，尤其可能引起排在血尿后面的陰性標本結果假性升高，造成假陽性。有學者的研究也證實有此情況[8-9]。

3.2 較多白細胞（膿細胞）

尿液標本中的白細胞濃度過高時，可能會因為濃度過高，儀器清洗不干凈，而導致下一個標本的假陽性，有學者也對因為尿液中白細胞濃度過高而引起的攜帶交叉污染有過報道[10]。

3.3 尿液中含大量細菌

當尿液標本中細菌濃度較高時，外觀也會呈渾濁狀，此時連續檢測標本同樣也可能會引起攜帶污染而造成假陽性結果，有報道稱用Sysmex尿液有形成分儀檢測無菌的生理鹽水得到了較高的本底值[11]，可想而之當有攜帶污染現象存在時，檢測結果更是會假性升高。

3.4 較多量結晶

當尿液中含有大量的草酸鈣、尿酸、磷酸鹽、尿酸鹽等結晶時，往往會影響紅細胞計數，造成紅細胞計數假性升高；且該研究在工作中發現結晶含量高時也可能會引起攜帶污，影響下一個標本的檢測，同時儀器會報警提示“RBC/X'TAL刻度異常”或（和）“攜帶污染？”。

有學者提出使用Sysmex尿液有形成分分析儀檢測尿液標本的陰性結果與顯微鏡鏡檢的符合率較高，出現的漏診率極低，故陰性結果可信度較高[12]，而陽性結果中會出現因為其他檢測參數相似的物質而引起的假陽性，所以對于陽性結果的標本，就必須借助顯微鏡人工復檢，結合顯微鏡檢驗結果審核報告。雖然目前顯微鏡是檢測有形成分的“金標準”，但當復檢的標本太多時，就會耗費大量的人力物力，降低工作效率[13]，且不可避免地出現不同檢測者之間結果不一致，不利于檢驗流程的標準化。

綜上所述，當尿液標本中含有較多量紅細胞、白細胞（膿細胞）、細菌、結晶、酵母樣菌、管型、粘液絲、上皮細胞等成分時，尿液往往呈渾濁狀態。使用UF-500i尿液有形成分分析儀自動進樣模式連續檢測這些渾濁的標本時，可能會因為檢測參數之間的相似而產生相互干擾，導致假陽性結果出現；可能會因為相應的有形成分濃度過高引起攜帶交叉污染而導致下一個標本的結果假性升高，甚至造成假陽性。所以日常工作中可以將外觀渾濁的標本挑選出來單獨處理，如通過稀釋樣本等方法以減少干擾和攜帶污染的發生，從而降低復檢率，提高工作效率。

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R446.12

A

1672-5654（2017）03（b）-0053-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.08.053

2016-12-11）

梁朝坤（1988-），男，四川廣元人，大專，檢驗師，主要從事醫學檢驗工作。